书 书 书犐犆犛 ７１ ． ０６０ ． ５０ 犌 １２ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２３７６３ — ２００９ 光催化抗菌材料及制品 抗菌性能的评价 犘犺狅狋狅犮犪狋犪犾狔狋犻犮犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾犿犪狋犲狉犻犪犾狊犪狀犱狆狉狅犱狌犮狋狊 — 犃狊狊犲狊狊犿犲狀狋犳狅狉犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾犪犮狋犻狏犻狋狔犪狀犱犲犳犳犻犮犪犮狔 ２００９  ０５  １３ 发布 ２０１０  ０１  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准由中国石油和化学工业协会提出 。 本标准由全国化学标准化技术委员会无机化工分会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ６３ ／ ＳＣ１ ） 归口 。 本标准负责起草单位 ： 中国科学院理化技术研究所 。 本标准参加起草单位 ： 东陶 （ 中国 ） 有限公司 、 湖南日之谷环保科技有限公司 、 广东微生物分析检测 中心 、 攀枝花纳尔美环境科技有限公司 。 本标准主要起草人 ： 郑苏江 、 只金芳 、 高月红 。 本标准为首次发布 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２３７６３ — ２００９ 引 　　 言 　　 随着社会的发展 、 科技的进步 ， 光催化材料及制品的应用日渐广泛 。 为保护光催化抗菌产业的健康 发展 ， 建立评价体系 ， 规范生产企业相关产品质量 ， 规范市场准入及增强国际竞争力 ， 特制定本标准 。 本标准主要涉及光催化材料及制品的抗菌性能试验方法与评价 ， 对于光催化材料及制品的其他性 能如自清洁 、 空气净化 、 水体净化等试验方法可参考其他相关标准 ， 本标准不涉及 。 另外 ， 光催化抗菌效果的长期保持性能涉及因素较多 ， 需要进一步研究 ， 本标准暂不涉及 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ２３７６３ — ２００９ 光催化抗菌材料及制品 抗菌性能的评价 １ 　 范围 本标准规定了光催化抗菌材料及制品的抗菌性能的术语和定义 、 抗菌性能的评价 、 试验方法和试验 报告 。 本标准适用于在光照激发下产生抗菌性能的光催化抗菌材料及制品 ， 要求试验样品表面平整 、 与覆 盖膜接触良好 ， 其材质可以为玻璃 、 陶瓷 、 塑料 、 涂层 、 织物等 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ４７８９．２ 　 食品卫生微生物学检验 　 菌落总数测定 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 　 分析实验室用水规格和试验方法 （ ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ 抑菌 　 犫犪犮狋犲狉犻狅狊狋犪狊犻狊 抑制微生物生长繁殖的作用 ， 称为抑菌 。 ３ ． ２ 杀菌 　 犫犪犮狋犲狉犻犮犻犱犲 具有杀死微生物营养体和繁殖体的作用 ， 称为杀菌 。 ３ ． ３ 抗菌 　 犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾 同时具有抑菌和杀菌作用 ， 称为抗菌 。 ３ ． ４ 光催化 　 狆犺狅狋狅犮犪狋犪犾狔狊犻狊 在一定光源激发下 ， 所产生的催化作用 ， 称为光催化 。 ４ 　 抗菌性能的评价 按本标准规定的试验方法 ， 得到的总抗细菌率 （ 犚 总 ） 的评价 ： 抗细菌率 ≥ ９０％ ， 具有抗菌作用 ； 抗细菌率 ≥ ９９％ ， 具有较强的抗菌作用 。 注 ： 在报告上同时注明在 ３６５ｎｍ 光源照射下的光催化抗菌贡献值 （ 犚 光 ）。 ５ 　 试验方法 ５ ． １ 　 安全提示 本试验方法中使用的紫外光源对于眼晴及皮肤具有伤害 ， 操作者须小心谨慎 ！ 注意反应器须密闭 ， 当光源打开时不要用眼睛直接观察 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２３７６３ — ２００９ 本试验方法中使用的部分试剂具有腐蚀性 ， 操作者须小心谨慎 ！ 如溅到皮肤或眼睛应立即用水冲 洗 ， 严重者应立即治疗 。 ５ ． ２ 　 一般规定 本标准所用试剂和水 ， 在没有注明其他要求时 ， 均指分析纯试剂和 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 中规定的三 级水 。 ５ ． ３ 　 设备 ５ ． ３ ． １ 　 黑灯管 （ ＵＶＡ ）： 主波长 ３６５ｎｍ ； ５ ． ３ ． ２ 　 紫外照度计 ： 传感器在 ＵＶＡ 段 ， 测定范围 ０．１ μ Ｗ ／ ｃｍ ２ ～ １９９ｍＷ ／ ｃｍ ２ ； ５ ． ３ ． ３ 　 恒温培养箱 ； ５ ． ３ ． ４ 　 压力蒸汽灭菌器 。 ５ ． ４ 　 试剂和材料 ５ ． ４ ． １ 　 磷酸盐缓冲 （ 犘犅犛 ， ０ ． ０６ 犿狅犾 ／ 犔 ） 生理盐水洗脱液 ： 称取 ２．７ｇ 磷酸二氢钾 ， ７．０ｇ 磷酸氢二钾 ， ８．５ｇ 氯化钠 ， 加 １０００ｍＬ 蒸馏水溶解 。 为便于细菌洗 脱 ， 可加入少量表面活性剂 （ 如吐温 ８０ ）。 置于压力蒸汽灭菌器中 ， 于 １２１℃ 下高压湿热灭菌 １５ｍｉｎ 。 灭菌后的洗脱液应于 ５℃ ～ １０℃ 下保存 。 保存期为 ３０ 天 。 ５ ． ４ ． ２ 　 菌种 ５ ． ４ ． ２ ． １ 　 大肠埃希氏菌 （ 犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻 ） 　　　　　 ＡＳ１．９０ ５ ． ４ ． ２ ． ２ 　 金黄色葡萄球菌 （ 犛狋犪狆犎狔犾狅犮狅犮犮狌狊犪狌狉犲狌狊 ） ＡＳ１．８９ 等同 ＡＴＣＣ６５３８ｐ 注 ： 根据产品的使用要求 ， 也可选用其他菌种作为试验菌种 ， 但所用菌种必须由国家相应菌种保藏管理中心提供并 可溯源 。 ５ ． ４ ． ３ 　 营养肉汤 （ 犖犅 ） 称取 ３．０ｇ 牛肉膏 ， １０．０ｇ 蛋白胨 ， ５．０ｇ 氯化钠 ， 加 １０００ｍＬ 蒸馏水溶解 ， 室温下用 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的 氢氧化钠或 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的盐酸溶液调节 ｐＨ 值为 ７．０ ～ ７．２ ； 置于压力蒸汽灭菌器中 ， 于 １２１℃ 下高压湿 热灭菌 １５ｍｉｎ 。 灭菌后的营养肉汤应于 ５℃ ～ １０℃ 下保存 。 保存期为 ３０ｄ 。 ５ ． ４ ． ４ 　 营养琼脂 （ 犖犃 ） 称取 ５．０ｇ 牛肉膏 ， １０．０ｇ 蛋白胨 ， ５．０ｇ 氯化钠 ， １５．０ｇ 琼脂 ， 加 １０００ｍＬ 蒸馏水溶解 ， 室温下用 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的氢氧化钠或 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的盐酸溶液调节 ｐＨ 值为 ７．０ ～ ７．２ ； 置于压力蒸汽灭菌器中 ， 于 １２１℃ 下高压湿热灭菌 １５ｍｉｎ 。 灭菌后的营养琼脂应于 ５℃ ～ １０℃ 下保存 。 保存期为 ３０ｄ 。 ５ ． ４ ． ５ 　 平板计数琼脂 称取 ２．５ｇ 酵母粉 ， ５．０ｇ 胰蛋白胨 ， １．０ｇ 葡萄糖 ， １５．０ｇ 琼脂 ， 加 １０００ｍＬ 蒸馏水溶解 ， 室温下用 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的氢氧化钠或 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的盐酸溶液调节 ｐＨ 值为 ７．０ ～ ７．２ ， 置于压力蒸汽灭菌器中 ， 于 １２１℃ 下高压湿热灭菌 １５ｍｉｎ 。 灭菌后的平板计数琼脂应于 ５℃ ～ １０℃ 下保存 。 保存期为 ３０ｄ 。 ５ ． ５ 　 操作步骤 ５ ． ５ ． １ 　 菌种保藏 将标准菌种用接种环接种在营养琼脂 （ ＮＡ ） 斜面培养基或其他适合的培养基上 ， 置于恒温培养箱 中 ， 在 ３７℃±１℃ 下培养 ２４ｈ ～ ４８ｈ ， 然后于冰箱中在 ５℃ ～ １０℃ 下保藏 。 一个月内将其接种到新的 斜面 （ 以此类推 ）， 但接种次数从菌种中心得到的细菌算起不应超过 １４ 代 。 如保存时间达到或超过一个 月 ， 不可进行继代培养 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２３７６３ — ２００９ ５ ． ５ ． ２ 　 菌种的活化 将斜面保藏菌转接到 ＮＡ 平板或斜面培养基上 ， 置于恒温培养箱中 ， 在 ３７℃±１℃ 下培养 ２４ｈ± １ｈ ， 每天转接 １ 次 ， 连续转接不超过 ２ 周 。 试验时应采用连续转接 ２ 次后 （ 第 ３ ～ １４ 代 ） 的 ２４ｈ 内转接 的新鲜细菌培养物 。 ５ ． ５ ． ３ 　 接种菌液的制备 用于大肠杆菌菌悬液配制的 ＮＢ 为 ５００ 倍水稀释液 （ 即 ０．２％ＮＢ ）， 用于金黄色葡萄球菌菌悬液配 制的 ＮＢ 为 １００ 倍水稀释液 （ 即 １％ＮＢ ）。 室温下用 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的氢氧化钠或 ０．１ｍｏｌ ／ Ｌ 的盐酸溶液调 节 ｐＨ 值为 ７．０ ～ ７．２ ； 为便于细菌分散可加入少量表面活性剂 （ 如吐温 ８０ ）。 用接种环从活化好的新鲜细菌培养物上取少量新鲜细菌 ， 加到上述稀释液中 ， 依次 １０ 倍梯度稀释 ， 选取菌液浓度为 ２．５×１０ ５ ｃｆｕ ／ ｍＬ ～ １０×１０ ５ ｃｆｕ ／ ｍＬ 的梯度作为试验用菌液 。 若配好的接种液不能立刻使用 ， 则应在 ０℃ 下保存 ， ４ｈ 内使用 。 ５ ． ５ ． ４ 　 样片制备 ５ ． ５ ． ４ ． １ 　 标准空白对照样 采用医用级聚乙烯 （ ＰＥ ） 制成的试样 ， 标准尺寸为 （ ５０ｍｍ±２ｍｍ ） × （ ５０ｍｍ±２ｍｍ ）， 厚度小于 １０ｍｍ 。 准备 ９ 片 ， 其中 ３ 片用于 ０ 接触时间洗脱 ， ３ 片用于明条件试验 ， ３ 片用于暗条件试验 。 ５ ． ５ ． ４ ． ２ 　 光催化试样 从制品或材料上选取平整的部分