书 书 书犐犆犛 ６７ ． ０６０ 犡 ０４ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２３８１６ — ２００９ 大豆中三嗪类除草剂残留量的测定 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋狉犻犪狕犻狀犲犺犲狉犫犻犮犻犱犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狊狅狔犫犲犪狀 ２００９  ０５  ２５ 发布 ２００９  ０９  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ａ 、 附录 Ｂ 和附录 Ｃ 均为资料性附录 。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院 、 中国农业大学 、 中华人民共和国江西出入境检验检疫局 。 本标准主要起草人 ： 陈冬东 、 祁彦 、 张新忠 、 杨强 、 占春瑞 、 李建中 、 安娟 、 李淑娟 、 储晓刚 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２３８１６ — ２００９ 大豆中三嗪类除草剂残留量的测定 １ 　 范围 本标准规定了大豆中西玛通 、 西玛津 、 氰草津 、 阿特拉通 、 嗪草酮 、 西草净 、 莠去津 、 扑灭通 、 特丁通 、 莠灭净 、 特丁津 、 扑草净 、 异丙净残留量的高效液相色谱和液相色谱  质谱 ／ 质谱的测定方法 。 本标准适用于大豆中西玛通 、 西玛津 、 氰草津 、 阿特拉通 、 嗪草酮 、 西草净 、 莠去津 、 扑灭通 、 特丁通 、 莠灭净 、 特丁津 、 扑草净 、 异丙净残留量的检测及确证 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析试验室用水规格和试验方法 （ ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ ， ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ３ 　 原理 试样中三嗪类除草剂用乙腈提取 ， 经凝胶渗透色谱仪 （ ＧＰＣ ） 及中性氧化铝 ＳＰＥ 柱净化后 ， 用高效 液相色谱和液相色谱  质谱 ／ 质谱测定 ， 外标法定量 。 ４ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 所有试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的一级水 。 ４ ． １ 　 乙腈 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ 　 二氯甲烷 。 ４ ． ３ 　 甲酸 。 ４ ． ４ 　 磷酸 。 ４ ． ５ 　 固相萃取柱 ： 中性氧化铝 １０００ｍｇ ， ６ｍＬ ， 使用前用 ５ｍＬ 二氯甲烷活化 。 ４ ． ６ 　 滤膜 ： ０．２２ μ ｍ 。 ４ ． ７ 　 标准品 ： 西玛通 、 西玛津 、 氰草津 、 阿特拉通 、 嗪草酮 、 西草净 、 莠去津 、 扑灭通 、 特丁通 、 莠灭净 、 特丁 津 、 扑草净 、 异丙净 ， 纯度均大于 ９８％ ， 相关信息参见附录 Ａ 中表 Ａ．１ 。 ４ ． ８ 　 标准储备液 ： 准确称取适量的 １３ 种三嗪类农药标准品 ， 用乙腈分别配制成浓度为 １００ μ ｇ ／ ｍＬ 的 标准储备液 。 ４ ． ９ 　 混合标准工作液 ： 根据需要 ， 分别吸取 １３ 种三嗪类农药标准储备液用流动相稀释配制成适当浓度 的混合标准工作液 。 ５ 　 仪器和设备 ５ ． １ 　 高效液相色谱仪 （ ＨＰＬＣ ）： 配有二极管阵列检测器 。 ５ ． ２ 　 液相色谱  质谱质谱仪 （ ＬＣＭＳ ／ ＭＳ ）： 配有电喷雾离子源 （ ＥＳＩ ）。 ５ ． ３ 　 均质器 。 ５ ． ４ 　 凝胶渗透色谱 ： 玻璃柱 ， ７００ｍｍ×２５ｍｍ ； 填料 ， ＢｉｏｂｅａｄｓＳＸ３ ， ４０ｇ 。 ５ ． ５ 　 振荡器 。 ５ ． ６ 　 离心机 。 ５ ． ７ 　 旋转蒸发仪 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２３８１６ — ２００９ ５ ． ８ 　 固相萃取装置 。 ５ ． ９ 　 氮吹仪 。 ５ ． １０ 　 聚四氟乙烯离心管 。 ６ 　 试样制备与保存 ６ ． １ 　 试样制备 取代表性试样 ５００ｇ ， 用粉碎机粉碎并使其全部通过 ０．４２５ｍｍ 的样品筛 ， 混和均匀 ， 装入洁净的容 器内 ， 密封并标识 。 ６ ． ２ 　 试样保存 试样于 ０℃ ～ ４℃ 避光保存 。 取样 、 制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发 生变化 。 ７ 　 分析步骤 ７ ． １ 　 提取 称取 １０ｇ （ 精确至 ０．０１ｇ ） 试样于 ５０ｍＬ 聚四氟乙烯离心管中 ， 加入 ４０ｍＬ 乙腈 ， 旋涡 ２ｍｉｎ 混匀 ， 于振荡器振荡 ３０ｍｉｎ ， ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 下离心 ５ｍｉｎ ， 将上清液转移至 １００ｍＬ 圆底烧瓶中 。 样品残渣再加 入 ４０ｍＬ 乙腈重复以上操作提取一次 ， 合并两次提取液 ， 于 ３５℃ 下旋转浓缩至约 １ｍＬ ， Ｎ ２ 吹干 。 用二 氯甲烷溶解残渣 ， 定容至 １０ｍＬ 。 ７ ． ２ 　 净化 由 ＧＰＣ 自动进样系统吸入上述提取样品液 ７．５ｍＬ ， 定量环 ５．０ｍＬ 进样 ， 以二氯甲烷为流动相 ， 流量 ５ｍＬ ／ ｍｉｎ ， 检测波长 ２２８ｎｍ ， 收集 １４ｍｉｎ ～ ２４ｍｉｎ 的馏分于梨形瓶中 ， 在 ４０℃ 水浴下旋转蒸发至 近干 。 用 ５ｍＬ 二氯甲烷溶解 。 将上述溶解液转移至活化好的小柱中 。 从上样开始就接收流出液 （ 流速约 １ｍＬ ／ ｍｉｎ ）， 再用 ５ｍＬ 二氯甲烷洗脱 ， 收集洗脱液 ， 合并流出液和洗脱液 ， 经氮气吹干后用 １ｍＬ 流动相定容 。 过 ０．２２ μ ｍ 滤 膜 ， 供 ＨＰＬＣ 和 ＬＣＭＳ ／ ＭＳ 测定 。 ７ ． ３ 　 测定 ７ ． ３ ． １ 　 犎犘犔犆 参考条件 ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ 柱 ， ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ 内径 ）， ５ μ ｍ ， 或相当者 ； ｂ ） 　 流动相 ： 乙腈  水 ， 梯度条件参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．１ ； ｃ ） 　 流速 ： １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｄ ） 　 检测波长 ： ２２８ｎｍ ； ｅ ） 　 进样量 ： １０ μ Ｌ ； ｆ ） 　 柱温 ： ３０℃ 。 ７ ． ３ ． ２ 　 犔犆犕犛 ／ 犕犛 参考条件 ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ 柱 ， １５０ｍｍ×２．１ｍｍ （ 内径 ）， ３．５ μ ｍ ， 或相当者 ； ｂ ） 　 流动相 ： 乙腈 ０．１％ 甲酸水溶液 ， 梯度条件参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．２ ； ｃ ） 　 流速 ： ０．２ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｄ ） 　 进样量 ： １０ μ Ｌ ； ｅ ） 　 柱温 ： ３０℃ ； ｆ ） 　 质谱条件 ： 参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．３ 和表 Ｂ．４ 。 ７ ． ３ ． ３ 　 定量测定 ７ ． ３ ． ３ ． １ 　 ＨＰＬＣ 法 ： 根据样液中三嗪类除草剂的含量 ， 选定浓度相近的标准工作溶液 ， 待测样液中三 嗪类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内 。 对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定 。 在上 述 ＨＰＬＣ 仪器条件下 ， 参考保留时间分别为 ： 西玛通 ９．１０ｍｉｎ ， 西玛津 １２．１０ｍｉｎ ， 氰草津 １２．３０ｍｉｎ ， 阿 ２ 犌犅 ／ 犜 ２３８１６ — ２００９ 特拉通 １３．３６ｍｉｎ ， 嗪草酮 １３．９６ｍｉｎ ， 西草净 １６．７０ｍｉｎ ， 莠去津 １７．５３ｍｉｎ ， 扑灭通 １９．２１ｍｉｎ ， 特丁通 ２１．３２ｍｉｎ ， 莠灭净 ２３．４２ｍｉｎ ， 特丁津 ２５．５２ｍｉｎ ， 扑草净 ２９．００ｍｉｎ ， 异丙净 ３２．８０ｍｉｎ 。 液相色谱图参 见附录 Ｃ 中图 Ｃ．１ 。 ７ ． ３ ． ３ ． ２ 　 ＬＣＭＳ ／ ＭＳ 法 ： 根据样液中三嗪类除草剂的含量 ， 选定浓度相近的标准工作溶液 ， 待测样液 中三嗪类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内 。 对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定 。 在上述仪器条件下 ， 参考保留时间分别为 ： 西玛通 ７．６６ｍｉｎ ， 西玛津 ９．１２ｍｉｎ ， 氰草津 ９．２３ｍｉｎ ， 阿特拉 通 ９．０６ｍｉｎ ， 嗪草酮 ９．３８ｍｉｎ ， 西草净 ９．９６ｍｉｎ ， 莠去津 １０．１５ｍｉｎ ， 扑灭通 １０．１９ｍｉｎ ， 特丁通 １０．４５ｍｉｎ ， 莠灭净 １０．８８ｍｉｎ ， 特丁津 １１．２１ｍｉｎ ， 扑草净 １１．６２ｍｉｎ ， 异丙净 １２．２３ｍｉｎ 。 液相色谱  质 谱 ／ 质谱色谱图参见附录 Ｃ 中图 Ｃ．２ 。 ７ ． ３ ． ４ 　 定性测定 按照上述条件测定试样和标准溶液 ， 如果试样中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液相比在 ±２．５％ 的允许偏差之内 ； 样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比 ， 相对 丰度偏差不超过表 １ 的规定 ， 则可判断样品中存在相应的目标化合物 。 表 １ 　 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ／ ％ ＞ ５０ ＞ ２０ ～ ５０ ＞ １０ ～ ２０ ≤ １０ 允许的相对偏差 ／ ％ ±２０ ±２５ ±３０ ±５０ ７ ． ４ 　 空白试验 除不加试样外 ， 按上述测定步骤进行 。 ８ 　 结果计算和表达 试样中待测化合物的残留量可以采用测定仪器的软件处理器或者按式 （ １ ） 计算 ： 犡 ＝ 犃 × 犮