书 书 书犐犆犛 ６７ ． ０６０ 犡 ０４ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２３８１７ — ２００９ 大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀狔犾狌狉犲犪犺犲狉犫犻犮犻犱犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狊狅狔犫犲犪狀 ２００９  ０５  ２５ 发布 ２００９  ０９  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ａ 、 附录 Ｂ 和附录 Ｃ 均为资料性附录 。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院 。 本标准主要起草人 ： 陈冬东 、 李淑娟 、 祁彦 、 李建中 、 安娟 、 张新忠 、 杨强 、 占春瑞 、 李晓娟 、 储晓刚 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２３８１７ — ２００９ 大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定 １ 　 范围 本标准规定了大豆产品中环氧嘧磺隆 、 噻吩磺隆 、 甲磺隆 、 醚苯磺隆 、 氯磺隆 、 苄嘧磺隆 、 氟磺隆 、 吡 嘧磺隆 、 氯嘧磺隆 、 氟嘧磺隆残留量的高效液相色谱和液相色谱  质谱 ／ 质谱的测定方法 。 本标准适用于大豆中环氧嘧磺隆 、 噻吩磺隆 、 甲磺隆 、 醚苯磺隆 、 氯磺隆 、 苄嘧磺隆 、 氟磺隆 、 吡嘧磺 隆 、 氯嘧磺隆 、 氟嘧磺隆残留量的检测及确证 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析试验室用水规格和试验方法 （ ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ ， ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ３ 　 原理 试样中磺酰脲类除草剂用乙腈提取 ， 经氟罗里硅土柱净化后 ， 用高效液相色谱和液相色谱  质谱 ／ 质 谱测定 ， 外标法定量 。 ４ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 所有试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的一级水 。 ４ ． １ 　 乙腈 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ 　 甲醇 。 ４ ． ３ 　 丙酮 。 ４ ． ４ 　 二氯甲烷 。 ４ ． ５ 　 正己烷 。 ４ ． ６ 　 甲酸 。 ４ ． ７ 　 氟罗里硅土 ： ６０ｍｍ ～ １００ｍｍ ， ６５０℃ 烘 ４ｈ ， 降至室温后 ， 称取 ９５ｇ 氟罗里硅土加入 ５ｇ 水 ， 配制 成含水量为 ５％ 的氟罗里硅土 ， 放入磨口瓶中在干燥器中平衡过夜后备用 。 ４ ． ８ 　 无水硫酸钠 ： ６５０℃ 灼烧 ４ｈ ， 冷却后置于干燥器中存放备用 。 ４ ． ９ 　 二氯甲烷  丙酮  甲醇 （ ７．５＋２＋０．５ ， 体积比 ）： 量取 ７．５ｍＬ 二氯甲烷 、 ２ｍＬ 丙酮和 ０．５ｍＬ 甲醇 ， 混匀 。 ４ ． １０ 　 二氯甲烷  甲醇 （ １＋１ ， 体积比 ）： 量取 １０ｍＬ 二氯甲烷和 １０ｍＬ 甲醇 ， 混匀 。 ４ ． １１ 　 滤膜 ： ０．２２ μ ｍ 。 ４ ． １２ 　 标准品 ： 环氧嘧磺隆 、 噻吩磺隆 、 甲磺隆 、 醚苯磺隆 、 氯磺隆 、 苄嘧磺隆 、 氟磺隆 、 吡嘧磺隆 、 氯嘧磺 隆 、 氟嘧磺隆 ， 纯度均大于 ９８％ ， 相关信息参见附录 Ａ 中表 Ａ．１ 。 ４ ． １３ 　 标准储备液 ： 准确称取适量的 １０ 种磺酰脲标准品 ， 用乙腈分别配制成浓度为 １００ μ ｇ ／ ｍＬ 的标准 储备液 。 ４ ． １４ 　 混合标准工作液 ： 根据需要 ， 分别吸取 １０ 种磺酰脲标准储备液用乙腈稀释配制成适当浓度的混 合标准工作液 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２３８１７ — ２００９ ５ 　 仪器和设备 ５ ． １ 　 高效液相色谱仪 （ ＨＰＬＣ ）： 配有二极管阵列检测器 。 ５ ． ２ 　 液相色谱  质谱质谱仪 （ ＬＣＭＳ ／ ＭＳ ）： 配有电喷雾离子源 （ ＥＳＩ ）。 ５ ． ３ 　 均质器 。 ５ ． ４ 　 玻璃净化柱 ： ３００ｍｍ×１０ｍｍ （ 内径 ） 玻璃层析柱 ， 依次填入 ２ｃｍ 无水硫酸钠 ， ２．５ｇ 的 ５％ 氟罗里 硅土 ， ２ｃｍ 高的无水硫酸钠 。 使用前用 ２０ｍＬ 二氯甲烷活化 。 ５ ． ５ 　 振荡器 。 ５ ． ６ 　 离心机 。 ５ ． ７ 　 旋转蒸发仪 。 ５ ． ８ 　 聚四氟乙烯离心管 。 ６ 　 试样制备与保存 ６ ． １ 　 试样制备 取代表性试样 ５００ｇ ， 用粉碎机粉碎并使其全部通过 ０．４２５ｍｍ 的样品筛 ， 混和均匀 ， 装入洁净的容 器内 ， 密封并标识 。 ６ ． ２ 　 试样保存 试样于 ０℃ ～ ４℃ 避光保存 。 取样 、 制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发 生变化 。 ７ 　 分析步骤 ７ ． １ 　 提取 称取 ５ｇ 试样 （ 精确至 ０．０１ｇ ） 于 ５０ｍＬ 聚四氟乙烯离心管中 ， 加入 ３０ｍＬ 乙腈于振荡器提取 ２０ｍｉｎ ， ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ５ｍｉｎ ， 将上清液转入 １５０ｍＬ 分液漏斗中 。 再向残渣中加入 ３０ｍＬ 乙腈重复 上述操作一次 ， 合并两次提取液于分液漏斗中 。 向分液漏斗中加入 ３０ｍＬ 用乙腈饱和的正己烷 ， 振摇 ２ｍｉｎ ， 静置分层后弃去正己烷层 ， 乙腈层转于 １００ｍＬ 梨形瓶中 ４０℃ 旋转浓缩蒸发至干 ， 用 ５ｍＬ 二氯 甲烷溶解残渣 。 ７ ． ２ 　 净化 将上述提取液全部转移至柱上 。 用 １０ｍＬ 二氯甲烷  丙酮  甲醇 （ ７．５＋２＋０．５ ， 体积比 ）（ ４．９ ） 淋洗 柱子并弃去 ， 再用 ２０ｍＬ 二氯甲烷  甲醇 （ １＋１ ， 体积比 ）（ ４．１０ ） 进行洗脱并收集于梨形瓶中 。 洗脱液于 旋转蒸发器 ４０℃ 下浓缩至干 ， 用 １ｍＬ 流动相溶解定容 。 过 ０．２２ μ ｍ 滤膜 ， 供 ＨＰＬＣ 和 ＬＣＭＳ ／ ＭＳ 测定 。 ７ ． ３ 　 测定 ７ ． ３ ． １ 　 犎犘犔犆 参考条件 ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ ， ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ 内径 ）， ５ μ ｍ ， 或相当者 ； ｂ ） 　 流动相 ： 乙腈  水 （ 磷酸调 ｐＨ＝２．５ ）， 梯度条件参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．１ ； ｃ ） 　 流速 ： １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｄ ） 　 检测波长 ： ２３０ｎｍ ； ｅ ） 　 进样量 ： １０ μ Ｌ ； ｆ ） 　 柱温 ： ３０℃ 。 ７ ． ３ ． ２ 　 犔犆犕犛 ／ 犕犛 参考条件 ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ ， １５０ｍｍ×２．１ｍｍ （ 内径 ）， ５ μ ｍ ， 或相当者 ； ｂ ） 　 流动相 ： 乙腈 ０．１％ 甲酸水溶液 ， 梯度条件参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．２ ； ２ 犌犅 ／ 犜 ２３８１７ — ２００９ ｃ ） 　 流速 ： ０．２ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｄ ） 　 进样量 ： １０ μ Ｌ ； ｅ ） 　 柱温 ： ３０℃ 。 ｆ ） 　 质谱条件 ： 参见附录 Ｂ 中表 Ｂ．３ 和表 Ｂ．４ 。 ７ ． ３ ． ３ 　 定量测定 ７ ． ３ ． ３ ． １ 　 ＨＰＬＣ 法 ： 根据样液中磺酰脲的含量 ， 选定浓度相近的标准工作溶液 ， 待测样液中某种磺酰 脲的响应值应在仪器检测的线性范围内 。 对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定 。 在上述 ＨＰＬＣ 仪器条件下 ， 参考保留时间分别为 ： 环氧嘧磺隆 １０．７４ｍｉｎ ， 噻吩磺隆 １１．２５ｍｉｎ ， 甲磺隆 １２．３０ｍｉｎ ， 醚 苯磺隆 １３．５９ｍｉｎ ， 氯磺隆 １４．１１ｍｉｎ ， 苄嘧磺隆 １７．３５ｍｉｎ ， 氟磺隆 １９．１５ｍｉｎ ， 吡嘧磺隆 １９．３３ｍｉｎ ， 氯 嘧磺隆 １９．８４ｍｉｎ ， 氟嘧磺隆 ２０．８９ｍｉｎ 。 液相色谱图参见附录 Ｃ 中图 Ｃ．１ 。 ７ ． ３ ． ３ ． ２ 　 ＬＣＭＳ ／ ＭＳ 法 ： 根据样液中磺酰脲类的含量 ， 选定浓度相近的标准工作液 ， 待测样液中某种 磺酰脲的响应值应在仪器检测的线性范围内 。 对标准工作液及样液等体积参插进样测定 。 在上述仪器 条件下 ， 参考保留时间分别为 ： 环氧嘧磺隆 ５．４９ｍｉｎ ， 噻吩磺隆 ５．６３ｍｉｎ ， 甲磺隆 ６．１５ｍｉｎ ， 醚苯磺隆 ６．６３ｍｉｎ ， 氯磺隆 ６．８６ｍｉｎ ， 苄嘧磺隆 ８．４６ｍｉｎ ， 氟磺隆 ９．４９ｍｉｎ ， 吡嘧磺隆 ９．９１ｍｉｎ ， 氯嘧磺隆 ９．９１ｍｉｎ ， 氟嘧磺隆 １０．４６ｍｉｎ 。 液相色谱  质谱 ／ 质谱色谱图参见附录 Ｃ 中图 Ｃ．２ 。 ７ ． ３ ． ４ 　 定性测定 按照上述条件测定试样和标准溶液 ， 如果试样中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液相比在 ±２．５％ 的允许偏差之内 ； 样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比 ， 相对 丰度偏差不超过表 １ 的规定 ， 则可判断样品中存在相应的目标化合物 。 表 １ 　 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ／ ％ ＞ ５０ ＞ ２０ ～ ５０ ＞ １０ ～ ２０ ≤ １０ 允许的相对偏差 ／ ％ ±２０ ±２５ ±３０ ±５０ ７ ．