书 书 书犐犆犛 ７１ ． １００ ． ７０ 犢 ４２ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２４８００ ． ２ — ２００９ 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱 ／ 串联质谱法和薄层层析法 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳 ４１ 犵犾狌犮狅犮狅狉狋犻犮狅犻犱狊 犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊犫狔犔犆犕犛犕犛犪狀犱犜犔犆犿犲狋犺狅犱 ２００９  １１  ３０ 发布 ２０１０  ０５  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ａ 、 附录 Ｂ 和附录 Ｃ 为资料性附录 。 本标准由中国轻工业联合会提出 。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５７ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 大连市产品质量监督检验所 、 大连标准检测技术研究中心 、 国家日化产品质量监 督检验中心 。 本标准主要起草人 ： 潘炜 、 李鹏 、 毛希琴 、 王春燕 、 郑顺利 、 关成 、 于利军 、 董广彬 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２４８００ ． ２ — ２００９ 引 　　 言 　　 本标准中的被测物质是我国 《 化妆品卫生规范 》 规定的禁用物质 ， 不得作为化妆品生产原料即组分 添加到化妆品中 。 如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时 ， 则化妆品成品应符合 《 化妆品 卫生规范 》 对化妆品的一般要求 ， 即在正常及合理的 、 可预见的使用条件下 ， 不得对人体健康产生危害 。 目前我国尚未规定这些物质的限量值 ， 本标准的制定 ， 仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ２４８００ ． ２ — ２００９ 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定 液相色谱 ／ 串联质谱法和薄层层析法 １ 　 范围 本标准规定了化妆品中 ４１ 种糖皮质激素的液相色谱 ／ 串联质谱方法和薄层层析方法二种测定方法 。 本标准液相色谱 ／ 串联质谱测定方法适用于化妆品中糖皮质激素的定量测定 ， 其检出限为 ０．０３ μ ｇ ／ ｇ ， 定量限为 ０．１ μ ｇ ／ ｇ 。 本标准薄层层析方法适用于化妆品中糖皮质激素的定性筛选 。 点样量为 １０ｍｇ 时 ， 其检出限为 ５０ μ ｇ ／ ｇ ； 点样量为 ２０ｍｇ 时 ， 其检出限可达 ２５ μ ｇ ／ ｇ 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＧＢ ／ Ｔ６３７９．１ 　 测量方法与结果的准确度 （ 正确度与精密度 ） 　 第 １ 部分 ： 总则与定义 （ ＧＢ ／ Ｔ６３７９．１ — ２００４ ， ＩＳＯ５７２５１ ： １９９４ ， ＩＤＴ ） ＧＢ ／ Ｔ６３７９．２ 　 测量方法与结果的准确度 （ 正确度与精密度 ） 　 第 ２ 部分 ： 确定标准测量方法重复 性与再现性的基本方法 （ ＧＢ ／ Ｔ６３７９．２ — ２００４ ， ＩＳＯ５７２５２ ： １９９４ ， ＩＤＴ ） ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 （ ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ ， ＩＳＯ３６９６ ： １９８７ ， ＭＯＤ ） ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 ３ ． １ 　 　　 糖皮质激素 　 犵犾狌犮狅犮狅狉狋犻犮狅犻犱狊 糖皮质激素类药物属甾体类化合物 ， 外用糖皮质激素的基本化学结构为氢化可的松结构 。 即含 １７ 个碳原子的环戊烷并多氢菲母核 、 Ｃ１０ 和 Ｃ１３ 位上有甲基 、 Ｃ１７ 位上有二碳侧链 、 Ｃ３ 位酮基和 Ｃ４Ｃ５ 位双键 。 在此基础上 ， 进行 Ｃ１Ｃ２ 位脱氢 、 Ｃ６ α 位甲基化 、 Ｃ９ α 位氟化 、 Ｃ１１ 位羟基化等修饰后 ， 构成一 类应用范围不同 、 效果强弱不同的糖皮质激素类药物 。 ４ 　 液相色谱  串联质谱法 ４ ． １ 　 原理 膏霜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散 ， 精油类化妆品用正己烷分散 ， 用乙腈从分散液中提取激素类 药物 ， 用亚铁氰化钾和醋酸锌从提取液中沉淀大分子基质 ， 经固相萃取小柱净化 ， 用反相高效液相色谱 ／ 串联质谱测定 ， 外标法定量 。 ４ ． ２ 　 试剂与标准物质 ４ ． ２ ． １ 　 甲醇 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ ． ２ 　 乙腈 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ ． ３ 　 乙酸 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ ． ４ 　 正己烷 ： 分析纯 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２４８００ ． ２ — ２００９ ４ ． ２ ． ５ 　 饱和氯化钠溶液 。 ４ ． ２ ． ６ 　 １０％ 亚铁氰化钾溶液 ： 称量 １１５ｇＫ ４ Ｆｅ （ ＣＮ ） ６ · ３Ｈ ２ Ｏ 固体 ， 用水溶解定容至 １Ｌ 。 ４ ． ２ ． ７ 　 ２０％ 乙酸锌溶液 ： 称量 ２３９ｇＣ ４ Ｈ ６ Ｏ ４ Ｚｎ · ２Ｈ ２ Ｏ 固体 ， 用水溶解定容至 １Ｌ 。 ４ ． ２ ． ８ 　 ＯａｓｉｓＨＬＢ 固相萃取小柱 １ ） 或相当者 ： ６０ｍｇ ， ３ｍＬ 。 １ ） 　 ＯａｓｉｓＨＬＢ 固相萃取小柱是 Ｗａｔｅｒｓ 公司产品的商品名称 ， 给出这一信息是为了方便本标准的使用者 。 如果其 他等效产品具有相同的效果 ， 则可使用这些等效产品 。 ４ ． ２ ． ９ 　 样品过滤器 ： 有机膜 ， 孔径 ０．２ μ ｍ 。 ４ ． ２ ． １０ 　 标准物质 ： ４１ 种糖皮质激素标准物质的分子式 、 相对分子质量 、 ＣＡＳ 登录号列于表 １ ， 纯度不 小于 ９９．０％ 。 化学结构图参见附录 Ａ 的图 Ａ．１ 。 表 １ 　 ４１ 种糖皮质激素药物中文名称 、 英文名称 、 犆犃犛 登录号 、 分子式 、 相对分子质量 序号 中文名称 英文名称 ＣＡＳ 登录号 分子式 相对分子质量 １ 曲安西龙 Ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ １２４９４７ Ｃ ２１ Ｈ ２７ ＦＯ ６ ３９４．１７９２ ２ 泼尼松龙 Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ ５０２４８ Ｃ ２１ Ｈ ２８ Ｏ ５ ３６０．１９３７ ３ 氢化可的松 Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ ５０２３７ Ｃ ２１ Ｈ ３０ Ｏ ５ ３６２．２０９３ ４ 泼尼松 Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ ５３０３２ Ｃ ２１ Ｈ ２６ Ｏ ５ ３５８．１７８０ ５ 可的松 Ｃｏｒｔｉｓｏｎｅ ５３０６５ Ｃ ２１ Ｈ ２８ Ｏ ５ ３６０．１９３７ ６ 甲基泼尼松龙 Ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ ８３４３２ Ｃ ２２ Ｈ ３０ Ｏ ５ ３７４．２０９３ ７ 倍他米松 Ｂｅｔａｍｅｔｈａｓｏｎｅ ３７８４４９ Ｃ ２２ Ｈ ２９ ＦＯ ５ ３９２．１９９９ ８ 地塞米松 Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ ５００２２ Ｃ ２２ Ｈ ２９ ＦＯ ５ ３９２．１９９９ ９ 氟米松 Ｆｌｕｍｅｔｈａｓｏｎｅ ２１３５１７３ Ｃ ２２ Ｈ ２８ Ｆ ２ Ｏ ５ ４１０．１９０５ １０ 倍氯米松 Ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｎｅ ４４１９３９０ Ｃ ２２ Ｈ ２９ ＣｌＯ ５ ４０８．１７０４ １１ 曲安奈德 Ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅａｃｅｔｏｎｉｄｅ ７６２５５ Ｃ ２４ Ｈ ３１ ＦＯ ６ ４３４．２１０５ １２ 氟氢缩松 Ｆｌｕｄｒｏｘｙｃｏｒｔｉｄｅ １５２４８８５ Ｃ ２４ Ｈ ３３ ＦＯ ６ ４３６．２２６１ １３ 曲安西龙双醋酸酯 Ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅｄｉａｃｅｔａｔｅ ６７７８７ Ｃ ２５ Ｈ ３１ ＦＯ ８ ４７８．２００３ １４ 泼尼松龙醋酸酯 Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ５２２１１ Ｃ ２３ Ｈ ３０ Ｏ ６ ４０２．２０４２ １５ 氟米龙 Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｌｏｎｅ ４２６１３１ Ｃ ２２ Ｈ ２９ ＦＯ ４ ３７６．２０５０ １６ 氢化可的松醋酸酯 Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ５００３３ Ｃ ２３ Ｈ ３２ Ｏ ６ ４０４．２２００ １７ 地夫可特 Ｄｅｆｌａｚａｃｏｒｔ １４４８４４７０ Ｃ ２５ Ｈ ３１ ＮＯ ６ ４４１．２１５１ １８ 氟氢可的松醋酸酯 Ｆｌｕｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ５１４３６３ Ｃ ２３ Ｈ ３１ ＦＯ ６ ４２２．２１０５ １９ 泼尼松醋酸酯 Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ １２５１００ Ｃ ２３ Ｈ ２８ Ｏ ６ ４００．１８８６ ２０ 可的松醋酸酯 Ｃｏｒｔｉｓｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ５００４４ Ｃ ２３ Ｈ ３０ Ｏ ６ ４０２．２０４２ ２１ 甲基泼尼松龙醋酸酯 Ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ５３３６１ Ｃ ２４ Ｈ ３２ Ｏ ６ ４１６．２１９９ ２２ 倍他米松醋酸酯 Ｂｅｔａｍｅｔｈａｓｏｎｅ２１ａｃｅｔａｔｅ ９８７２４６ Ｃ ２４ Ｈ ３１ ＦＯ ６ ４３４．２１０５ ２３ 布地奈德 Ｂｕｄｅｓｏｎｉｄｅ ５１３７２２９３ Ｃ ２５ Ｈ ３４ Ｏ ６ ４３０．２３５５ ２４ 氢化可的松丁酸酯 Ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ１７ｂｕｔｙｒａｔｅ１３６０９６７１ Ｃ ２５ Ｈ ３６ Ｏ ６ ４３２．２５１２ ２５ 地塞米松醋酸酯 Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓ