书 书 书犐犆犛 ６５ ． ０２０ ． ０１ 犅 １６ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２４８３１ — ２００９ 香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 犕犲狋犺狅犱狊犳狅狉狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲犪狀犱犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犫狌狉狉狅狑犻狀犵狀犲犿犪狋狅犱犲 ， 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊狊犻犿犻犾犻狊 （ 犆狅犫犫 ， １８９３ ） 犜犺狅狉狀犲 ， １９４９ ２００９  １２  １５ 发布 ２０１０  ０６  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准的附录 Ｂ 为规范性附录 ， 附录 Ａ 、 附录 Ｃ 为资料性附录 。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中国检验检疫科学院 、 中华人民共和国上海出入境检验检疫局 、 中华人民共和国 江苏出入境检验检疫局 、 中华人民共和国云南出入境检验检疫局和中华人民共和国深圳出入境检验检 疫局 。 本标准主要起草人 ： 葛建军 、 戚龙君 、 粟寒 、 杜宇 、 张明 、 李芳荣 、 李生贵 、 龙海 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２４８３１ — ２００９ 香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 １ 　 范围 本标准规定了香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 。 本标准适用于观赏植物 、 蔬菜 、 果树等多种植物根部和土壤及栽培介质中的香蕉穿孔线虫检疫 鉴定 。 ２ 　 规范性引用 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。 凡是注日期的引用文件 ， 其随后所有 的修改单 （ 不包括勘误的内容 ） 或修订版均不适用于本标准 ， 然而 ， 鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本适用于本标准 。 ＳＮ ／ Ｔ２１２２ 　 进境植物及植物产品检疫抽样 ３ 　 鉴定依据 英文俗名 ： ｂｕｒｒｏｗｉｎｇｎｅｍａｔｏｄｅ 、 ｐｅｐｐｅｒｙｅｌｌｏｗｓｎｅｍａｔｏｄｅ 、 ｓｌｏｗｗｉｌｔｎｅｍａｔｏｄｅ 、 ｃｉｔｒｕｓｂｕｒｒｏｗｉｎｇ ｎｅｍａｔｏｄｅ 、 ｂａｎａｎａｂｕｒｒｏｗｉｎｇｎｅｍａｔｏｄｅ 。 学名 ： 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊狊犻犿犻犾犻狊 （ Ｃｏｂｂ ， １８９３ ） Ｔｈｏｒｎｅ ， １９４９ 异名 ： 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊狊犻犿犻犾犻狊犮犻狋狉狅狆犺犻犾狌狊 Ｈｕｅｔｔｅｌ ， Ｄｉｃｋｓｏｎ＆Ｋａｐｌａｎ ， １９８４ 犃狀犵狌犻犾犾狌犾犻狀犪犵狉犪狀狌犾狅狊犪 （ Ｃｏｂｂ ， １８９３ ） Ｇｏｏｄｅｙ ， １９３２ 犜犲狋狔犾犲狀犮犺狌狊犵狉犪狀狌犾狅狊狌狊 （ Ｃｏｂｂ ， １８９３ ） Ｆｉｌｉｐｊｅｖ ， １９３６ 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊犵狉犪狀狌犾狅狊狌狊 （ Ｃｏｂｂ ， １８９３ ） Ｓｉｄｄｉｑｉ ， １９８６ 犃狀犵狌犻犾犾狌犾犻狀犪犪犮狌狋狅犮犪狌犱犪狋狌狊 （ Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ ， １８９８ ） Ｇｏｏｄｅｙ ， １９３２ 犜狔犾犲狀犮犺狅狉犺狔狀犮犺狌狊犪犮狌狋狅犮犪狌犱犪狋狌狊 （ Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ ， １８９８ ） Ｆｉｌｉｐｊｅｖ ， １９３４ 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊犪犮狌狋狅犮犪狌犱犪狋狌狊 （ Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ ， １８９８ ） Ｓｉｄｄｉｑｉ ， １９８６ 犜狔犾犲狀犮犺狌狊犫犻犳狅狉犿犻狊 Ｃｏｂｂ ， １９０９ 犃狀犵狌犻犾犾狌犾犻狀犪犫犻犳狅狉犿犻狊 （ Ｃｏｂｂ ， １９０９ ） Ｇｏｏｄｅｙ ， １９３２ 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊犫犻犳狅狉犿犻狊 （ Ｃｏｂｂ ， １９０９ ） Ｓｉｄｄｉｑｉ ， １９８６ 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊犮犻狋狉狅狆犺犻犾狌狊 Ｈｕｅｔｔｅｌ ， Ｄｉｃｋｓｏｎ＆Ｋａｐｌａｎ ， １９８４ 分类地位 ： 线虫门 （ Ｎｅｍａｔｏｄａ ）、 侧尾腺纲 （ Ｓｅｃｅｒｎｅｎｔｅａ ）、 垫刃目 （ Ｔｙｌｅｎｃｈｉｄａ ）、 短体线虫科 （ Ｐｒａｔｙ ｌｅｎｃｈｉｄａｅ ）、 穿孔线虫属 （ 犚犪犱狅狆犺狅犾狌狊 ） 香蕉穿孔线虫是一种根部迁移性内寄生线虫 ， 危害寄主植物呈现如下症状 ： ——— 线虫一般穿刺根表皮进入皮层 ， 在根的外部形成多个暗黑色的斑痕 ， 接着邻近的斑痕融合 ， 根 的皮层组织萎缩 ， 变黑 ； 严重危害时 ， 斑痕可环割根 ； 对于整个根系而言 ， 表现为根系明显减少 。 ——— 生姜 （ 大姜 ） 等根茎受侵害可造成组织萎缩 ， 表现为根茎小 、 干缩 。 ——— 地上部分表现为生长不良 ， 叶片褪绿 、 黄化 、 叶片较少等症状 ， 植株矮化 、 衰退 ， 甚至凋萎 、 死亡 。 香蕉穿孔线虫的寄主非常广泛 ， 达数百种之多 ， 主要侵染单子叶植物的芭蕉科 Ｍｕｓａｃｅａｅ （ 芭蕉属 犕狌狊犪 和鹤望兰属 犛狋狉犲犾犻狕犻犪 ）、 天南星科 Ａｒａｃｅａｅ （ 喜林芋属 犘犺犻犾狅犱犲狀犱狉狅狀 和花烛属 犃狀狋犺狌狉犻狌犿 ）、 竹芋 科 Ｍａｒａｎｔａｃｅａｅ （ 肖竹芋属 犆犪犾犪狋犺犲犪 ） 和凤梨科 （ 果子蔓属 犌狌狕犿犪狀犻犪 和丽穗凤梨属 犞狉犻犲狊犲犪 等 ）， 但也危 害双子叶植物 。 香蕉穿孔线虫的主要农作物和经济作物寄主包括香蕉 、 胡椒 、 芭蕉 、 椰子 、 槟榔 、 可可 、 芒 果 、 柑橘 、 咖啡 、 茶树 、 美洲柿 、 鹗梨 、 油柿 、 生姜 、 花生 、 大豆 、 高粱 、 甘蔗 、 茄子 、 番茄 、 马铃薯 、 甘薯 、 薯蓣 、 １ 犌犅 ／ 犜 ２４８３１ — ２００９ 酸豆 、 姜黄 、 小豆蔻 、 肉豆蔻 、 蚕豆 、 油棕 、 山葵 、 王棕等 。 香蕉穿孔线虫的形态学特征 、 传播途径 、 寄主范围和地理分布是制定该标准的主要依据 。 ４ 　 符号和缩略语 ｎ ——— 测量的线虫标本数目 ； Ｌ ——— 虫体体长 （ ｍｍ 或 μ ｍ ）； ａ ——— 体长 ／ 最大体宽 ； ｂ ——— 体长 ／ 虫体前端至食道与肠连接处的距离 ； ｂ ’——— 体长 ／ 虫体前端至食道腺末端的距离 ； ｃ ——— 体长 ／ 尾长 ； ｃ ’——— 尾长 ／ 肛门处体宽 ； Ｓｔ． ——— 口针长度 （ μ ｍ ）； Ｓｐ． ——— 交合刺长度 （ μ ｍ ）； Ｇｕｂ． ——— 引带长度 （ μ ｍ ）； Ｖ ——— 虫体前端至阴门的距离 ×１００ ／ 体长 。 ５ 　 仪器 、 用具 ５ ． １ 　 生物显微镜 （ １００× 以上 ）。 ５ ． ２ 　 生物体视显微镜 （ １０× 以上 ， 具透射光源 ）。 ５ ． ３ 　 电热恒温箱 。 ５ ． ４ 　 载玻片和凹玻片 。 ５ ． ５ 　 盖玻片 。 ５ ． ６ 　 网筛 （ ２０ 目 、 １００ 目 、 ５００ 目 ）。 ５ ． ７ 　 烧杯 （ ５００ｍＬ 、 １０００ｍＬ ）。 ５ ． ８ 　 漏斗 。 ５ ． ９ 　 漏斗架 。 ５ ． １０ 　 乳胶管或硅胶管 。 ５ ． １１ 　 止水夹 。 ５ ． １２ 　 小镊子 。 ５ ． １３ 　 剪刀 。 ５ ． １４ 　 挑针 。 ５ ． １５ 　 浅盘 。 ５ ． １６ 　 线虫滤纸或卫生纸 。 ５ ． １７ 　 酒精灯 。 ５ ． １８ 　 钟面皿或培养皿 。 ５ ． １９ 　 加热板 。 ５ ． ２０ 　 干燥器 。 ５ ． ２１ 　 试管 。 ５ ． ２２ 　 水浴锅 。 ６ 　 药品 ６ ． １ 　 ４％ 甲醛 。 ６ ． ２ 　 指甲油 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２４８３１ — ２００９ ６ ． ３ 　 甘油 。 ６ ． ４ 　 ９５％ 酒精 。 ６ ． ５ 　 石蜡 。 ７ 　 现场检疫 ７ ． １ 　 抽样 具体抽样方法见 ＳＮ ／ Ｔ２１２２ 。 ７ ． ２ 　 外观症状的检查 ７ ． ２ ． １ 　 对花卉 、 观赏植物 、 果树 、 蔬菜等根及根茎部分进行检查 ， 注意检查是否有变褐和坏死等症状 。 ７ ． ２ ． ２ 　 收集上述可疑植物材料及所夹带的土壤或栽培介质等 ， 和采集的样品一并送实验室进行香蕉穿 孔线虫的检验 。 ８ 　 实验室检验 ８ ． １ 　 样品分离 对于抽取的样品 ， 仔细检查根部 ， 尽量选取有变褐和坏死等症状的根及根围介质作为分离样品 。 ８ ． ２ 　 线虫分离 用浅盘分离法或漏斗法分离线虫 ， 具体分离方法见附录 Ａ 。 ８ ． ３ 　 体视显微镜检查 分离获得的线虫样在生物体视显微镜下检查 。 ８ ． ４ 　 显微镜检查 挑取线虫若干条制成临时玻片在生物显微镜下镜检 ， 观察线虫的形态 。 ９ 　 形态鉴定特征 ９ ． １ 　 穿孔线虫属形态鉴定特征 ９ ． １ ． １ 　 雌虫 ——— 虫体长 ０．４ｍｍ ～ ０．９ｍｍ ， ａ 值在 ２０ ～ ３０ 之间 ； ——— 头部低 ， 不缢缩或稍缢缩 ， 头架骨化显著 ； ——— 口针粗短 ， １４ μ ｍ ～ ２３ μ ｍ ， 基部球发达 ； ——— 中食道球发达 ， 后食道腺叶较长叶状从背部覆盖肠 ； ——— 侧区刻线 ３ 条 ～ ７ 条 ， 非网格化 ； ——— 无颈乳突 ， 侧尾腺孔常位于尾的前部 ； ——— 双生殖腺 、 对伸 ， 或后生殖腺退化 ， 授精囊园至卵园形 ， 内多有杆状精子 ； ——— 尾长圆锥形至亚圆柱形 ， 长为肛门处体宽的 ２ 倍 ～ ４ 倍 ， 末端窄圆至稍尖 。 ９ ． １ ． ２ 　 雄虫 ——— 头部高 ， 显著缢缩呈球状 ； ——— 口针和食道明显退化 ； ——— 交合伞延伸到近尾端 ， 极少延伸到尾端 ； ——— 引带大