书 书 书犐犆犛 ６５ ． ０２０ ． ３０ 犅 ４３ 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２５１７２ — ２０２０ 代替 ＧＢ ／ Ｔ２５１７２ — ２０１０ 猪常温精液生产与保存技术规范 犜犲犮犺狀犻犮犪犾狊狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犳狅狉狆狉狅犱狌犮狋犻狅狀犪狀犱狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀狅犳犳狉犲狊犺犫狅犪狉狊犲犿犲狀 ２０２０  １１  １９ 发布 ２０２１  ０６  ０１ 实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ２５１７２ — ２０１０ 《 猪常温精液生产与保存技术规范 》， 与 ＧＢ ／ Ｔ２５１７２ — ２０１０ 相比主要变化如下 ： ——— 增加了 “ ＧＢ２３２３８ ” 和 “ ＧＢ ／ Ｔ６６８２ ”（ 见第 ２ 章 ）； ——— 增加了 “ 宜用设备采精法 ， 按使用说明书操作 ”（ 见 ５．１．２．３ ）； ——— 将精子畸形率由 “ ≤ １８％ ” 修改为 “ ≤ ２０％ ”（ 见 ５．２．２ ， ２０１０ 年版的 ５．２ ）； ——— 删除了 “ 细菌菌落数 ”（ 见 ５．２ ， ２０１０ 年版的 ５．２ ）； ——— 精子活力证实方法增加了 “ 使用自动分析仪器应按其检测方法操作 ”（ 见 ５．２．３．２ ）； ——— 将稀释液 ｐＨ 值 “ ６．４ ～ ７．２ ” 修改为 “ ６．８ ～ ７．２ ”（ 见 ４．５．４ ， ２０１０ 年版的 ６．１．３ ）； ——— 将稀释后精液 “ 每头份剂量 ”“ 总精子数 ” 修改为 “ 剂量 、 每剂量中直线前进运动精子数应符合 ＧＢ２３２３８ 的规定 。”（ 见 ５．４．１ ， ２０１０ 年版的 ６．２．５ ）； ——— 将 “ 精液产品质量 （ 见表 ２ ）” 修改为 “ 常温精液产品质量和标志应符合 ＧＢ２３２３８ 的规定 。”（ 见 ５．６．４ ， ２０１０ 年版的 ８．４ ）。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出 。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２７４ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 青岛市畜牧兽医研究所 、 华南农业大学 、 北京养猪育种中心 、 黄岛区家畜改良站 。 本标准主要起草人 ： 戈新 、 张守全 、 王建华 、 周海深 、 张宝 繤 、 李培培 、 刘玉华 、 程明 、 孟庆利 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２５１７２ — ２０２０ 猪常温精液生产与保存技术规范 １ 　 范围 本标准规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求 ， 描述了对应的试验方法 ， 给出了保存和运输的内容 。 本标准适用于猪的常温精液生产与保存 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文 件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ＧＢ２３２３８ 　 种猪常温精液 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 　 原精液 　 狉犪狑狊犲犿犲狀 采集后未经稀释的精液 。 ３ ． ２ 　 常温精液 　 犳狉犲狊犺狊犲犿犲狀 经稀释后在 １６℃ ～ １８℃ 下保存 ， 仍具有受精能力的精液 。 注 ： 改写 ＧＢ２３２３８ — ２００９ ， 定义 ３．２ 。 ３ ． ３ 　 精子活力 　 狊狆犲狉犿犿狅狋犻犾犻狋狔 在 ３７℃ 下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率 。 ３ ． ４ 　 精子密度 　 狊狆犲狉犿犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀 单位体积精液中的精子数 。 ３ ． ５ 　 精子畸形率 　 犪犫狀狅狉犿犪犾狊狆犲狉犿狆犲狉犮犲狀狋犪犵犲 畸形精子占总精子数的百分率 。 ４ 　 基本要求 ４ ． １ 　 种公猪 应健康且达到种用要求 。 成年公猪宜每周采精二次至三次 ， 青年公猪宜每周一次至二次 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２５１７２ — ２０２０ ４ ． ２ 　 采精员 应经过专业培训 ， 工作时应着洁净工作衣 、 帽 ， 穿长胶鞋 ， 戴无毒塑料手套 。 ４ ． ３ 　 采精室 应设置采精区和安全区 。 采精区设置假台猪 ， 地面防滑 ， 并保持清洁 、 安静和避光 。 ４ ． ４ 　 精液处理室 应设置精液检查 、 稀释和分装区 ， 温度宜控制在 ２２℃ ～ ２５℃ ， 避免太阳光直射或紫外灯照射 。 配 备仪器和用品参见附录 Ａ 。 ４ ． ５ 　 稀释液 ４ ． ５ ． １ 　 配制用水应符合 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 中二级水或三级水的要求 。 ４ ． ５ ． ２ 　 商品稀释剂按说明书使用 。 不得使用过期或变质稀释剂 。 ４ ． ５ ． ３ 　 自配稀释液所用试剂应为分析纯 ， 稀释液配方参见附录 Ｂ 。 ４ ． ５ ． ４ 　 稀释液 ｐＨ 值应为 ６．８ ～ ７．２ 。 ４ ． ５ ． ５ 　 使用前 １ｈ 配制 ， 配制后应及时贴上标签 ， 标明品名 、 配制日期和时间 、 经手人 。 ４ ． ５ ． ６ 　 稀释液应密封后置于冰箱中 ０℃ ～ ４℃ 冷藏 ， 保存时间不应超过 ２４ｈ 。 ５ 　 技术要求 ５ ． １ 　 精液采集 ５ ． １ ． １ 　 采精前准备 ５ ． １ ． １ ． １ 　 集精杯或保温杯 （ 内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸 ）、 载玻片 、 盖玻片 、 精液 处理器皿应预热至 ３７℃ 。 ５ ． １ ． １ ． ２ 　 显微镜载物台恒温板应预热至 ３７℃ 。 精子密度仪使用前应预热 。 ５ ． １ ． ２ 　 采精 ５ ． １ ． ２ ． １ 　 应剪去公猪包皮部长毛 ， 清洁体表 ， 擦干水渍 。 ５ ． １ ． ２ ． ２ 　 应挤净包皮积液 ， 先用 ０．１％ 高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮 ， 再用温水清洗后擦干 。 ５ ． １ ． ２ ． ３ 　 宜用设备采精法 ， 按使用说明书操作 。 手握法采精时 ， 应一只手戴双层无毒聚乙烯手套 ， 按摩公猪包皮部 ， 待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎 ， 脱去外层手套 ， 握紧龟头 ， 使其不能旋转 ， 顺势将阴茎的 “ Ｓ ” 状弯曲延直 。 另一只手持集精杯或保温杯 ， 弃去最初射出的少量精液 ， 收集精液至射精完毕 。 ５ ． １ ． ２ ． ４ 　 采精完毕后 ， 应标记公猪耳号 ， 送至精液处理室 。 ５ ． ２ 　 精液检验 ５ ． ２ ． １ 　 检验项目 外观 、 气味 、 采精量 、 精子活力 、 精子密度和精子畸形率 。 ５ ． ２ ． ２ 　 原精液质量 应符合表 １ 的规定 ， 其中任何一项不符合要求的则废弃 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ２５１７２ — ２０２０ 表 １ 　 原精液质量 编号 项 　　 目 指 　　 标 证实方法 １ 外观 呈乳白色 ， 均匀一致 目测 ２ 气味 略带腥味 ， 无异味 鼻嗅 ３ 采精量 ／ ｍＬ ≥ １００ 见 ５．２．３．１ ４ 精子活力 ／ ％ ≥ ７０ 见 ５．２．３．２ ５ 精子密度 ／（ １０ ８ 个 ／ ｍＬ ） ≥ １ 见 ５．２．３．３ ６ 精子畸形率 ／ ％ ≤ ２０ 见 ５．２．３．４ ５ ． ２ ． ３ 　 证实方法 ５ ． ２ ． ３ ． １ 　 采精量 采用称量法计算采精量 ， １ｇ 相当于 １ｍＬ 。 ５ ． ２ ． ３ ． ２ 　 精子活力 取中层精液 １０ μ Ｌ ～ １５ μ Ｌ ， 在 ２００ 倍 ～ ４００ 倍显微镜下检查 。 每份精液取样二次 ， 每个样观察三个 视野 ， 计算平均值 。 使用自动分析仪器应按其检测方法操作 。 ５ ． ２ ． ３ ． ３ 　 精子密度 采用精子密度仪测定 。 应定期用血细胞计数板法校正 。 ５ ． ２ ． ３ ． ４ 　 精子畸形率 采用伊红或姬姆萨染色法检查时 ， 在 ２００ 倍 ～ ４００ 倍显微镜下观察左 、 中 、 右三个视野中不少于 ２００ 个精子 。 也可采用相差显微镜直接观察 。 每二个月抽检一次 。 ５ ． ３ 　 精液稀释 ５ ． ３ ． １ 　 精液采集后应尽快稀释 ， 放置时间不宜超过 １５ｍｉｎ 。 ５ ． ３ ． ２ 　 采用等温稀释 。 精液与稀释液温差不得超过 １℃ ， 根据精液温度调节稀释液温度 ， 不得反向操作 。 ５ ． ３ ． ３ 　 将稀释液沿杯壁缓慢加入精液中 ， 轻轻摇动或沿一个方向搅拌 ， 混合均匀 。 高倍稀释时 ， 先低倍稀释 （ １∶１ ） ～ （ １∶２ ）， ３０ｓ 后再加入余下的稀释液 。 ５ ． ３ ． ４ 　 稀释液总量以体积 犞 计 ， 数值以毫升 （ ｍＬ ） 表示 ， 按式 （ １ ） 计算 ： 犞 ＝ 狏 １ × 犮狊 × 狏 ２ － 狏 １ ……………………（ １ ） 　　 式中 ： 狏 １ ——— 采精量 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）； 犮 ——— 精子密度 ， 单位为 １０ ８ 个每毫升 （ １０ ８ 个 ／ ｍＬ ）； 狊 ——— 每剂量中直线前进运动精子数 ， 单位为 １０ ８ 个 ； 狏 ２ ——— 剂量 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）。 ５ ． ３ ． ５ 　 精液稀释后应静置 ５ｍｉｎ ， 按 ５．２．３．２ 检测精子活力 ， 活力不得低于 ７０％ 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ２５１７２ — ２０２０ ５ ． ４ 　 精液分装 ５ ． ４ ． １ 　 剂量 、 每剂量中直线前进运动精子数应符合 ＧＢ２３２３８ 的规定 。 ５