ICS65.120 B46 中华人民共和国国家标准 GB/T25174—2010 饲 料添加剂 4′,7-二羟基异黄酮 Feedadditive—4′,7-dihydroxyisoflavone 2010-09-26发布 2011-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位:南京农业大学、中牧实业股份有限公司。 本标准主要起草人:倪迎冬、杨晓静、赵茹茜、陈杰、付光武、王珍芹、王丽娜。 ⅠGB/T25174—2010 饲料添加剂 4′,7-二羟基异黄酮 1 范围 本标准规定了饲料添加剂4′,7-二羟基异黄酮的要求、试验方法、检验规则以及标签、包装、运输和 贮存的要求。 本标准适用于以间苯二酚、对羟基苯乙酸和原甲酸三乙酯为主要原料经化学合成的饲料添加剂 4′,7-二羟基异黄酮。 化学名称:4′,7-二羟基异黄酮 英文名称:4′,7-dihydroxyisoflavone(daidzein) 分子式:C15H10O4 相对分子质量:254.24(2005年国际相对原子质量) 化学结构式: 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T191 包装储运图示标志 GB/T6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB10648 饲料标签 GB/T13079 饲料中总砷的测定 GB/T13080 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法 GB/T14699.1 饲料 采样 3 要求 3.1 性状 本品为白色或类白色粉末,无臭、无味。熔点:315℃~323℃。易溶于二甲基甲酰胺,微溶于乙 醇,不溶于水。 3.2 技术指标 技术指标应符合表1规定。 1GB/T25174—2010 表1 技术指标 项 目 指 标 4′,7-二羟基异黄酮/% ≥97.5 水分/% ≤1.0 炽灼残渣/% ≤0.1 总砷/(mg/kg) ≤1 铅/(mg/kg) ≤2 4 试验方法 4.1 抽样 按GB/T14699.1进行。 4.2 主要仪器和设备 4.2.1 高效液相色谱仪,带紫外检测器。 4.2.2 超声波振荡器。 4.2.3 分析天平,感量0.01mg。 4.2.4 马福炉。 4.3 试剂和溶液 除非另有规定,仅使用分析纯试剂,水为去离子水,符合GB/T6682中规定的二级水。 4.3.1 三氯化铁。 4.3.2 铁氰化钾。 4.3.3 乙醇:色谱纯。 4.3.4 甲醇:色谱纯。 4.3.5 85%乙醇溶液(乙醇和水的体积比为85∶15)。 4.3.6 55%甲醇溶液(甲醇和水的体积比为55∶45)。 4.3.7 标准样品:4′,7-二羟基异黄酮(含量≥98.0%)。 4.3.8 标样工作液:精密称取标准品0.02g~0.04g(精确至0.01mg),置于100mL的容量瓶中,加 入85%乙醇溶液适量,超声波振荡5min使试样溶解。用85%乙醇溶液定容至刻度,摇匀,于4℃下保 存备用,有效期一周。 4.4 鉴别 4.4.1 称取试样0.2mg,置小试管中,加乙醇溶液0.2mL,在水浴锅上加热65℃±5℃使溶解,加入 0.5%三氯化铁试液10滴,混匀,再加入0.5%铁氰化钾试液10滴,立即出现兰绿色。 4.4.2 在含量测定项下记录的高效液相色谱中,样品主峰的保留时间与标准品峰的保留时间一致。 4.5 4′,7-二羟基异黄酮含量的测定 4.5.1 方法提要 试样用85%乙醇溶液溶解,注入高效液相色谱仪反相色谱仪中进行分离,紫外检测器检测,外标法 定量。 4.5.2 液相色谱操作条件 液相色谱操作条件如下: ———色谱柱:C18柱:内径4.6mm,长250mm,粒度5μm; ———检测波长:249nm; ———流动相:55%甲醇,等浓度洗脱; ———流速:1.0mL/min; 2GB/T25174—2010 ———进样体积:10μL。 4.5.3 测定步骤 4.5.3.1 试样溶液的制备 精密称取试样0.02g~0.04g(精确至0.01mg),置于100mL容量瓶中,加入85%乙醇溶液适 量,超声波振荡5min使试样溶解。用85%乙醇溶液定容至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜。 4.5.3.2 测定 按高效液相色谱仪说明书调整色谱的工作参数,向液相色谱柱中依次注入标样工作液(4.3.8)和试 样溶液(4.5.3.1),得到色谱峰面积的响应值,用外标法定量。 4.5.4 计算与结果表示 试样中4′,7-二羟基异黄酮w1以质量分数表示,数值以%表示,按式(1)计算: w1=A2·m1·w2 A1·m2…………………………(1) 式中: A2———试样溶液中4′,7-二羟基异黄酮峰面积; m1———标样的质量,单位为克(g); w2———标样中4′,7-二羟基异黄酮的含量,%; A1———标样溶液中4′,7-二羟基异黄酮峰面积; m2———试样的质量,单位为克(g)。 4.5.5 允许差 同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差应不大于5%。 4.6 水分测定 按GB/T6435执行。 4.7 炽灼残渣测定 4.7.1 测定步骤 称取1.0g试样(精确至0.01g),置于已在750℃±50℃炽灼至恒重的瓷坩埚内,展平。先用小火 缓缓加热至完全炭化,放冷后,加浓硫酸0.5mL~1.0mL,使其湿润,低温加热至硫酸蒸汽除尽后移入 马福炉中,在750℃±50℃中炽灼至恒重。 4.7.2 计算 炽灼残渣w3以质量分数表示,数值以%表示,按式(2)计算: w3=m3-m4 m5×100 …………………………(2) 式中: m3———坩埚与残渣总质量,单位为克(g); m4———坩埚质量,单位为克(g); m5———样品质量,单位为克(g)。 4.8 总砷测定 按GB/T13079执行。 4.9 铅含量测定 按GB/T13080执行。 5 检验规则 5.1 出厂检验 5.1.1 出厂检验项目 性状、4′,7-二羟基异黄酮含量。GB/T25174—2010 GB/T25174—2010 5.1.2 判定规则 检验结果如有一项指标不符合本标准要求,应重新自两倍量的包装中采样进行复验,复验结果即使 有一项指标不符合本标准的要求时,则整批产品判为不合格。以同班、同原料、同配方的产品为一批,每 批产品进行出厂检验。 5.2 型式检验 5.2.1 有下列情况之一时,应进行型式检验: a) 改变配方或生产工艺; b) 正常生产每半年或停产半年后生产; c) 国家技术监督部门提出要求时。 5.2.2 型式检查项目为第3章的全部项目。 5.2.3 判定规则:检验结果如有一项指标不符合本标准要求,应重新自两倍量的包装中采样进行复验, 复验结果即使有一项指标不符合本标准的要求时,则整批产品判为不合格。 6 标签、包装、运输和贮存 6.1 标签 应符合GB10648的规定和要求。 6.2 包装 应采用纸塑复合袋密封包装。 6.3 运输 6.3.1 运输过程中应防止雨淋和受潮。 6.3.2 应按GB/T191的规定清晰标明“怕雨”标志。 6.3.3 不应与有毒物品混运。 6.4 贮存 应贮存在阴凉、干燥、清洁的环境中,避免阳光直射、雨淋和受潮,不应与有毒物品混存。 6.5 保质期 在规定的贮存条件下,保质期为12个月。 0102—47152T/BG