ICS65.120 B46 中华人民共和国国家标准 GB/T25735—2010 饲 料添加剂 L-色氨酸 Feedadditive—L-Tryptophan 2010-12-23发布 2011-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。 本标准起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)]。 本标准主要起草人:王彤、樊霞、贾铮、闫惠文、赵小阳、李兰、董延、高立云、李守申、胡明云。 ⅠGB/T25735—2010 饲料添加剂 L-色氨酸 1 范围 本标准规定了饲料添加剂L-色氨酸产品的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输和贮存。 本标准适用于以微生物发酵生产的饲料添加剂L-色氨酸。 分子式:C11H12N2O2 相对分子质量:204.23(按2007年国际相对原子质量) 结构式: 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 GB/T603 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 GB/T6438 饲料中粗灰分的测定 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB10648 饲料标签 GB/T13080 饲料中铅的测定 原子吸收光谱法 GB/T13081 饲料中汞的测定 GB/T13082 饲料中镉的测定方法 GB/T13091 饲料中沙门氏菌的检测方法 GB/T14699.1 饲料 采样 GB/T18246 饲料中氨基酸的测定 《中华人民共和国药典》(2005年版二部) 3 要求 3.1 性状 白色至微黄色结晶或结晶性粉末,无嗅或略有气味,略溶于水,溶于热乙醇和氢氧化钠溶液。 3.2 鉴别 3.2.1 氨基酸定性鉴别 试样的水溶液与茚三酮溶液反应,溶液呈红紫色。 3.2.2 色氨酸定性鉴别 按GB/T18246测定,要求试样溶液色氨酸色谱峰保留时间与标准溶液相同,且测定含量在98%± 1GB/T25735—2010 2%~98%±3%之内。 3.2.3 比旋光度法 试样的水溶液经旋光仪测定,其测定值在-29.0°~-32.8°之间。 3.3 技术指标 技术指标应符合表1规定。 表1 技术指标 项 目 指 标 含量(以C11H12N2O2计)(干基)/% ≥98.0 干燥失重/% ≤0.5 粗灰分/% ≤0.5 比旋光度[a]t D -29.0°~-32.8° pH(1%水溶液) 5.0~7.0 砷/(mg/kg) ≤2 铅/(mg/kg) ≤5 镉/(mg/kg) ≤2 汞/(mg/kg) ≤0.1 沙门氏菌(25g样品中) 不得检出 4 试验方法 除特殊说明外,所用试剂均为分析纯,实验用水符合GB/T6682中三级用水规定,试剂和溶液的制 备应符合GB/T601、GB/T602和GB/T603的规定。 4.1 试剂和溶液 4.1.1 茚三酮溶液:1g/L水溶液。 4.1.2 色氨酸标准品:色氨酸含量≥99.0%。 4.1.3 色氨酸标准溶液(100nmol/mL):称取色氨酸标准品0.0510g(精确至0.0001g),加水溶解 (加1滴10%氢氧化钠溶液)并定容至50mL,取该溶液1mL,用水定容至50mL。 4.1.4 甲酸。 4.1.5 冰乙酸。 4.1.6 高氯酸标准溶液:c(HClO4)=0.1mol/L。 4.1.7 α-萘酚苯基甲醇指示剂:2g/L冰乙酸溶液。 4.2 仪器和设备 除实验室常用设备以外,还需要以下仪器和设备: 4.2.1 氨基酸分析仪。 4.2.2 电位滴定仪。 4.2.3 电极:饱和甘汞电极及玻璃电极。 4.2.4 酸度计。 4.3 鉴别试验 4.3.1 性状 在自然光条件下,通过目测,产品为白色至微黄色结晶或结晶性粉末;打开产品包装,部分产品在嗅 觉上感觉无味道,部分产品略有气味;取少量试样,分别溶于水、热乙醇和氢氧化钠溶液中,结果显示试 2GB/T25735—2010 样略溶于水,能完全溶解于热乙醇和氢氧化钠溶液。 4.3.2 氨基酸定性鉴别 称取试样0.1g,溶于100mL水中,取该溶液5mL,加1mL茚三酮溶液(4.1.1),置沸水浴反应 3min,溶液呈红紫色。 4.3.3 色氨酸定性鉴别 称取试样0.0510g(精确至0.0001g),加水溶解(加1滴10%氢氧化钠溶液)并定容至50mL,取 该溶液1mL,用水定容至50mL。 按GB/T18246测定,要求试样溶液色氨酸色谱峰保留时间与色氨酸标准溶液(4.1.3)相同,且测 定含量在98%±2%~98%±3%之内。 4.3.4 比旋光度法 试样在105℃干燥至恒重,称取干燥试样0.5g(精确至0.0001g),加入30mL水,稍加热溶解,全 部转入50mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。以下按照《中华人民共和国药典》(2005年版二部) 测定。 4.4 L-色氨酸含量的测定 4.4.1 测定方法 称取0.25g(精确至0.0001g)干燥至恒重的试样于干燥的100mL烧杯或锥形瓶中,加入3mL 甲酸(4.1.4),待试样完全溶解后加入50mL冰乙酸(4.1.5),将电极插入溶液中,调节搅拌速度至溶液 充分涡旋,按仪器说明书调整仪器参数,用高氯酸标准溶液(4.1.6)进行电位滴定,以电位值突变作为滴 定终点。如选择指示剂法,加入10滴α-萘酚苯基甲醇指示剂(4.1.7),用高氯酸标准溶液进行滴定,试 样液由橙黄色变为黄绿色即为滴定终点。 同时做空白试验。 4.4.2 结果计算 L-色氨酸(C11H12N2O2)含量X以质量分数(%)表示,按式(1)计算: X=(V1-V0)×c×204.23 m×1000×100…………………………(1) 式中: V1———试样消耗高氯酸标准溶液体积,单位为毫升(mL); V0———空白试验消耗高氯酸标准溶液体积,单位为毫升(mL); c———高氯酸标准溶液浓度,单位为摩尔每升(mol/L); m———试样质量,单位为克(g); 204.23———L-色氨酸的摩尔质量,单位为克每摩尔(g/mol)。 平行测定结果用算术平均值表示,保留三位有效数字。 4.4.3 重复性 同一分析者对同一试样同时进行两次平行测定的结果相差应不大于0.5%。 4.5 干燥失重的测定 按GB/T6435测定。 4.6 粗灰分的测定 按GB/T6438测定。 4.7 比旋光度的测定 按4.3.4测定。 4.8 pH值的测定 称取试样0.5g(精确至0.01g)加入30mL水,稍加热溶解,定量地转入50mL容量瓶中,待溶液 3GB/T25735—2010 温度降至室温,用水稀释至刻度,摇匀。用酸度计测定,结果精确至0.1。 4.9 砷的测定 称取试样1g(精确至0.001g)于30mL瓷坩埚中,加入5mL150g/L硝酸镁溶液,混匀,于低温 或沸水浴中蒸干,低温炭化至无烟,后转入高温炉于550℃恒温灰化3.5h~4.0h,取出冷却,缓慢加入 10.0mL盐酸溶液,待激烈反应后,煮沸转移到发生器中,补加8.0mL盐酸,加水至40mL左右。 以下按《中华人民共和国药典》(2005年版二部)砷盐检查法第一法(古蔡氏法)测定。 4.10 铅的测定 按GB/T13080测定。 4.11 镉的测定 按GB/T13082测定。 4.12 汞的测定 按GB/T13081测定。 4.13 沙门氏菌的测定 按GB/T13091测定。 5 检验规则 5.1 采样方法 按GB/T14699.1进行。 5.2 出厂检验 5.2.1 批 以同班、同原料产品为一批,每批产品进行出厂检验。 5.2.2 出厂检验项目 外观、L-色氨酸含量、干燥失重、粗灰分、砷、铅、镉、汞、沙门氏菌。 5.2.3 判定方法 以本标准的有关试验方法和要求为依据,对抽取样品按出厂检验项目进行检验。检验结果如有一 项指标不符合本标准要求时,应重新自两倍量的包装单元中取样进行复检,复检结果如仍有任何一项不 符合本标准要求,则判定该批产品为不合格产品,不能出厂。 5.3 型式检验 5.3.1 有下列情况之一,应进行型式检验: a) 改变配方或生产工艺; b) 正常生产每半年或停产半年后恢复生产; c) 国家技术监督部门提出要求时。 5.3.2 型式检验项目:第3章规定的全部项目。 5.3.3 判定方法:以本标准的有关试验方法和要求为依据。检验结果如有一项不符合本标准时,应加 倍抽样复检,复检结果如仍有一项不符合本标准要求时,则判定型式检验不合格。 6 标签、包装、运输和贮存 6.1 标签 饲料添加剂L-色氨酸包装袋上应有牢固清晰的标志,内容按GB10648的规定执行。 6.2 包装 饲料添加剂L-色氨酸采用纸塑复合袋包装或根据客户要求包装,包装应确保避光。 4GB/T25735—2010 6.3 运输 饲料添加剂L-色氨酸在运输过程中应避光、防潮、防高温、防止包装破损,不得与有毒有害物质 混运。 6.4 贮存 饲料添加剂L-色氨酸应贮存在避光、通风、阴凉、干燥处,防止雨淋、受潮,不得与有毒有害物品混 存。在符合本标准包装、运输和贮存的条件下