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书 书 书犐犆犛 11 . 220 犅 41 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 / 犜 34738 — 2017 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 犘犆犚 /G2A /G2B /G2C /G2D 犕犲狋犺狅犱狅犳狋犺犲狉犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犺狅狀犲狔犫犲犲狊狊犪犮犫狉狅狅犱犱犻狊犲犪狊犲 2017 11 01 /G2E /G2F 2018 05 01 /G30 /G31 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G2E /G2F书 书 书/G21 /G22 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 GB / T1.1 — 2009 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C 。 /G21 /G22 /G23 /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G27 。 /G21 /G22 /G23 /G2D /G39 /G34 /G3A /G3B /G3C /G3D /G22 /G23 /G3E /G3F /G40 /G41 /G42 /G43 ( SAC / TC181 ) /G44 /G45 。 /G21 /G22 /G23 /G2B /G2C /G46 /G47 : /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G48 /G49 /G27 /G4A /G4B /G4C /G4D /G4C /G4E /G4F 、 /G48 /G49 /G50 /G51 、 /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G52 /G53 /G27 /G4A /G4B /G4C /G4D /G4C /G4E /G4F 。 /G21 /G22 /G23 /G2B /G2C /G30 : /G54 /G55 /G56 、 /G57 /G58 、 /G59 /G5A /G5B 、 /G5C /G5D /G2F 、 /G5E /G5F /G60 、 /G61 /G62 、 /G63 /G64 /G34 、 /G65 /G66 、 /G59 /G67 /G68 、 /G69 /G6A 、 /G6B /G6C /G6D 、 /G63 /G6E /G6F 。 Ⅰ 犌犅 / 犜 34738 — 2017 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B 犘犆犚 /G2C /G2D /G2E /G2F 1 /G30 /G31 /G21 /G22 /G23 /G29 /G70 /G71 /G72 /G73 /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /G79 /G7A PCR /G4C /G7B /G7C /G7D 。 /G21 /G22 /G23 /G7E /G7F /G80 /G72 /G73 /G81 /G82 /G76 /G77 /G2E /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /G28 /G4C /G7B 。 2 /G32 /G30 /G33 /G34 /G35 /G36 /G37 /G83 /G84 /G85 /G86 /G87 /G80 /G21 /G85 /G86 /G28 /G88 /G7F /G89 /G8A /G8B /G8C /G8D /G28 。 /G8E /G89 /G8F /G5A /G90 /G28 /G91 /G7F /G85 /G86 , /G92 /G8F /G5A /G90 /G28 /G93 /G21 /G7E /G7F /G80 /G21 /G85 /G86 。 /G8E /G89 /G8B /G8F /G5A /G90 /G28 /G91 /G7F /G85 /G86 , /G82 /G94 /G58 /G93 /G21 ( /G95 /G96 /G97 /G98 /G28 /G99 /G9A /G46 ) /G7E /G7F /G80 /G21 /G85 /G86 。 GB / T6682 /G9B /G9C /G9D /G4D /G9E /G7F /G9F /G29 /GA0 /G33 /GA1 /G4D /G7C /G7D GB / T18088 /G27 /G4A /G4B /G3A /G3B /G4C /G4E /GA2 /GA3 3 /G38 /G39 /G3A /G3B /G3C /GA4 /GA5 /GA6 /G98 /G29 /G70 , /G92 /GA7 /G7F /G9B /G9C /GA8 /GA1 /GA9 。 /G97 /G98 /GA1 /GA9 /GAA /G7F /GAB RNA /GAC /GAD /GAE /G28 /GAF /GB0 ( /G7F /GB1 /GB2 /GB3 /GB4 /GB5 /GB6 /G9F /GB7 /GB8 /GB9 /GBA /GBB /GBC /GBD ) /G9B /GBE 。 3 . 1 /G9F , GB / T6682 , /GBF /GC0 。 3 . 2 /G72 /G73 /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /GC1 。 3 . 3 /G91 /G3B /G33 /GC2 /GC3 , /GC4 /GC5 /G91 /G3B F1 ( 10pmol / μ L ): 5 ’ AAGTTGGAGGCGCGYATTTG3 ’, /G83 /GC5 /G91 /G3B R1 ( 10pmol / μ L ): 5 ’ CAAATGTCTTCTTACDAGAAGYAAGGATTG3 ’, /GC2 /GC3 P1 ( 5pmol / μ L ): 5 ’ FAMCGGAGTGGAAAGATTAMRA3 ’。 3 . 4 /GC6 /GB3 /GC7 /GC8 /GC9 /GC7 /G9F , /GCA /GCB /G7C /G7D /GCC A.1 。 3 . 5 /GCD RNA /GCE /G38 /GA1 /GA9 。 3 . 6 /GCF /GD0 。 3 . 7 /GD1 /GD2 /GD3 。 3 . 8 75% /GB5 /GD3 。 /G3D : /G7F /G58 /GD4 /GD5 /G28 /GAB /G9F /GB5 /GD3 /G33 /GB1 /GB2 /GB3 /GB4 /GB5 /GB6 /G9F /GCA /GCB 。 3 . 9 /GB1 /GB2 /GB3 /GB4 /GB5 /GB6 /GB7 /GB8 /G28 /G9F 。 3 . 10 /GD6 /GD7 /GD8 /GAC 。 3 . 11 RNA /GAC /GD9 /GCB /GA9 ( 40U / μ L )。 3 . 12 5× /GD6 /GD7 /GD8 /GAC /GC8 /GC9 /GDA 。 3 . 13 10×PCR /GD6 /G88 /GC8 /GC9 /GDA ( /GDB /GDC /GDD /GDE )。 3 . 14 DNA /GDF /GE0 /GAC ( 5U / μ L )。 3 . 15 /GBF /GC6 /GB3 /GE1 /GE2 /GE3 /GE4 /GE3 /GE5 /GB3 ( dNPTs /GE6 /GE7 /GE8 /GE9 /GAA /GEA 10mmol / L )。 4 /G3E /G3B 4 . 1 /G79 /G7A /G70 /GEB PCR /GEC /G5B /GED 。 1 犌犅 / 犜 34738 — 2017 4 . 2 /GEE /GEF /GF0 /GF1 /GBA /GF2 /GDD /GF3 /GF4 ( /GDD /GF3 /GF2 /GE9 12000r / min /GF5 /GC4 )。 4 . 3 /GF6 /GEB /G8C /GF7 /GF8 /GDA /GB0 ( 100 μ L ~ 1000 μ L 、 20 μ L ~ 200 μ L 、 2 μ L ~ 20 μ L 、 0.5 μ L ~ 10 μ L ) /G81 /GCA /GF9 /GFA /GFB /GFC /GFD /GFE 。 4 . 4 /GFF /G21 。 4 . 5 /G22 /G23 /G24 /G25 /GB0 。 4 . 6 /G26 /G27 /G9F /G28 /G29 。 4 . 7 /GDD /GF3 /G2A ( 1.5mL )。 4 . 8 PCR /G2A 。 5 /G3F /G40 /G2C /G41 5 . 1 /G42 /G43 /G44 /G45 /GD4 /G2B , /G38 /G73 /G2C /G2D /G2E , /G27 /G2F /G83 /G84 /G78 /GB8 /G30 /G3E /G31 /G32 /G33
GB-T 34738-2017 蜜蜂囊状幼虫病荧光PCR检测方法
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