ICS 65.020.20 CCS B 61 14 山西省 地方 标准 DB 14/T 3123—2024 黑果腺肋花楸组培快繁技术规程 2024 - 09 - 20发布 2024 - 12 - 20实施 山西省市场监督管理局 发布 DB 14/T 3123 —2024 I 目次 前 言 ................................ ................................ ........... II 1 范围 ................................ ................................ ................ 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ...... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ .......... 1 4 外植体准备 ................................ ................................ .......... 1 5 初代培养 ................................ ................................ ............ 1 6 继代培养 ................................ ................................ ............ 2 7 生根培养 ................................ ................................ ............ 2 8 炼苗与移 栽 ................................ ................................ .......... 2 9 苗木管理 ................................ ................................ ............ 3 10 档案管理 ................................ ................................ ........... 3 附录 A （规范性） MS培养基配方 ................................ ................... 4 DB 14/T 3123 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由山西省林业和草原局提出、组织实施和监督检查。 山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。 本文件由山西省林业和草原标准化技术委员会 （SXS/TC09）归口。 本文件起草单位：山西省林业生态实验基地。 本文件主要起草人：马倩、李志刚、成允海、郭晓霄、郭晓雯、金俊龙、高炎君、张寄英、崔纪平、 刘璐、李泽宇。 DB 14/T 3123 —2024 1 黑果腺肋花楸组培快繁技术规程 1 范围 本文件规定了黑果腺肋花楸 （Aronia melanocarpa Elliott）组培快 繁的外植体准备、初代培养、 继代培养、生根培养、炼苗与移栽、苗木管理和档案管理等要求。 本文件适用于黑果腺肋花楸组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 LY/T 2289 林木种苗生产经营档案 3 术语和定义 LY/T 1882 界定的术语和定义适用于本文件。 4 外植体准备 采集 在晴天选择生长健壮、无病虫害的植株，剪取当年生带腋芽的幼嫩茎段。 处理 4.2.1 清洗 先将外植体枝条剪去叶片，切成 3 cm～5 cm茎段，茎段两端距芽不少于 1 cm，用肥皂水浸泡 5 min～ 10 min，再用自来水流动冲洗 1 h，备用。 4.2.2 消毒 在超净工作台上，将清洗后的茎段放入浓度为 75%的酒精中浸泡 15 s～18 s，无菌水冲洗 3次，再在 0.1% HgCl 2溶液中浸泡 5 min～6 min，无菌水冲洗 5次，无菌滤纸吸干表面水分，用消毒刀片切去两端 灭菌失活的部分。 5 初代培养 培养基配制 MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + 琼脂7 g/L + 蔗糖30 g/L，PH 5.8～6.0。MS培养基配方 按照附录 A的规定执行。 DB 14/T 3123 —2024 2 接种 将镊子和手术剪刀消毒后，将备好的茎段进行修剪并插入初代培养基中。 培养条件 培养室温度 23 ℃～25 ℃，相对空气湿度 20%～30%， 光照强度 2000 lx～2200 lx，光照时间 12 h/d。 6 继代培养 培养基配制 MS + 6-BA 0.5 mg/L + IBA 0.2 mg/L + 琼脂7 g/L + 蔗糖30 g/L，PH 5.8～6.0。MS培养基配方 按照附录 A的规定执行。 转接 将初代培养萌发的不定芽分开后接入培养基中，每瓶平均接种 4株～5株。培养 30 d～40 d后继续转 接扩大培养。 培养条件 同5.3。 7 生根培养 培养基配制 1/2MS + NAA 0.1 mg/L + IBA 0.3 mg/L + 琼脂7 g/L + 蔗糖30 g/L，PH 5.8～6.0。MS培养基配 方按照附录 A的规定执行。 转接 选择长度≥ 2.0 cm的健壮茎段，切取并移入培养基中，每瓶 4株～6株。 培养条件 同5.3。 8 炼苗与移栽 炼苗 当苗高≥ 3.0 cm，根数≥ 3条，平均根长≥ 1.0 cm时，将瓶苗放置在温度 20 ℃～30 ℃、空气湿度 60%～80%、自然光的温室中 1 d～3 d，逐步打开瓶盖放置 2 d～3 d。 移栽 在温度20 ℃～30 ℃、空气湿度 80%～90%的温室中，用镊子 取出生根苗，将根部培养基清洗干净， 用1%多菌灵溶液 进行蘸根，移植到消毒后的 蛭石、泥炭 土等混合的基质中。 DB 14/T 3123 —2024 3 9 苗木管理 水肥管理 视基质墒情适时浇水。移植 30 d后，每两周喷洒 1次叶面肥，连续喷施 3次。 病虫害防治 可用1%～1.25%浓度的百菌清或多菌灵等进行预防。 10 档案管理 按照LY/T 2289 的规定执行。 DB 14/T 3123 —2024 4 A A 附录 A （规范性） MS培养基配方 表A.1给出了MS培养基配方。 表A.1 MS培养基配方 母液种类 成分 规定量mg 扩大倍数 称取量mg 母液体积 ml 配1L培养基 应移取量 ml 编号 种类 1 大量元素 NH4NO3 1650 10 16500 1000 100 KNO3 1900 19000 CaCl 2 • 2H2O 440 4400 MgSO 4・7H20 370 3700 KH2PO4 170 1700 2 微量元素 MnSO 4・H2O 22.3 100 2230 1000 10 CoCI 2・6H2O 0.025 2.5 CuSO 4・5H2O 0.025 2.5 H3BO3 6.2 620 Na2MoO4 ・2H2O 0.25 25 KI 0.83 83 3 铁盐 FeSO 4・7H2O 27.8 100 2780 1000 10 Na2-EDTA・2H2O 37.3 3730 4 有机元素 烟酸 0.5 50 25 500 10 盐酸吡哆醇 0.5 25 盐酸硫胺素 0.1 5 肌醇 100 5000 甘氨酸 2 100