ICS 65.020.20 CCS B05 43 湖南省地方 标准 DB 43/T 3075—2024 大花绣球组织培养快繁育苗技术规程 Code of practice for tissue culture and rapid propagation of Hydrangea macrophylla 2024 - 08 - 30发布 2024 - 11 - 30实施 湖南省市场监督管理局 发布 DB 43/T 3075— 2024 I 目次 前言 ................................................................................. II 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 组培室条件 ......................................................................... 1 5 培养基制备 ......................................................................... 1 培养基母液及配制 ............................................................... 1 培养基配方 ..................................................................... 1 培养基灭菌 ..................................................................... 1 培养条件 ....................................................................... 2 6 外植体选择与消毒 ................................................................... 2 外植体选择 ..................................................................... 2 外植体消毒 ..................................................................... 2 外植体处理 ..................................................................... 2 7 无菌苗生产 ......................................................................... 2 初代培养 ....................................................................... 2 继代培养 ....................................................................... 2 8 移栽与生根 ......................................................................... 2 移栽基质 ....................................................................... 2 炼苗 ........................................................................... 2 移栽 ........................................................................... 2 生根 ........................................................................... 3 移栽后管理 ..................................................................... 3 9 出圃 ............................................................................... 3 10 档案管理 .......................................................................... 3 附录A（资料性） MS培养基成分表 ...................................................... 4 附录B（资料性） 大花绣球组织培养的培养基配方表 ....................................... 5 附录C（资料性） 1/2 MS培养基成分表 .................................................. 6 附录D（资料性） 大花绣球组织培养生产档案 ............................................. 7 DB 43/T 3075— 2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省林业局提出。 本文件由湖南省林业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南农业大学、湖南景然园林发展有限公司。 本文件主要起草人：陈海霞、蒋辉、王练文、李玉帆、彭尽晖。DB 43/T 3075— 2024 1 大花绣球组织培养快繁育苗技术规程 1 范围 本文件确立了大花绣球（ Hydrangea macrophylla）组织培养快繁育苗技术的组培室条件、培养基制 备、外植体选择与处理、无菌苗生产、移栽与生根、出圃、档案管理等技术要求。 本文件适用于大花绣球组织培养快繁育苗。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T 2289 林木种苗生产经营档案 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 大花绣球 Hydrangea macrophylla 为绣球花科（ Hydrangeaceae）绣球属（Hydrangea ）灌木，又名八仙花。 4 组培室条件 植物组织培养室应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室和驯化室。 组培所需设备应包括冰箱、天平、酸度计、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器、超净工作台、 灭菌接种仪、接种器械、全自动光照培养箱、培养架等。 5 培养基制备 培养基母液及配制 按照附录 A的MS培养基成分表依次称取药品，制备成 20倍大量元素母液， 200倍的微量元素母 液、铁盐母液和有机成分母液。培养基的配制按照 NY/T2306 执行。 培养基配方 采用MS培养基为基本培养基，添加不同的激素、 30 g/L食用白砂糖和 7 g/L琼脂，分别配制初代 培养基和继代培养基，培养基用 0.1 mol/L 盐酸或0.1 mol/L 氢氧化钠调整 pH为5.8。不同品种的培 养基配方详见附录 B。 培养基灭菌 DB 43/T 3075— 2024 2 培养基封口后放入高压灭菌锅内，121 ℃灭菌15 min～20 min，灭菌完成冷却后取出，放置 3 d～ 5 d后使用。 培养条件 温度25℃±1℃，光照强度 2500 lx，每天光照时间 10 h～12 h。 6 外植体选择与消毒 外植体选择 应选择当年生、生长健壮、芽体饱满、无病虫害的枝条。 外植体消毒 将长5 cm～10 cm的大花绣球枝条去除叶片，用洗涤剂清洗表面污垢，流水冲洗 1 h～2 h后用纱 布吸干表面水分。在超净工作台上用 75% 酒精浸泡震荡 30 s，再用3%～5%次氯酸钠溶液浸泡 15 min， 最后用无菌水洗 3 次～5