ICS 67.220.10 B 36 GH 中华人民共和国 供销合作 行业标准 GH/T 1290—2020 花椒及花椒加工产品 花椒酰胺总含量的测 定 紫外分光光度法 Prickly ash and its processed products —Determination of total fagaramide — Ultraviolet spetrophotometry 2020 - 06 - 04发布 2020 - 09 - 01实施 中华全国供销合作总社 发布 GH/T 1290 —2020 I 前 言 本标准按照 GB/T1.1 —2009给出的规则起草。 本标准的附录 A是资料性附录。 本标准由中华全国供销合作总社提出。 本标准由全国辛香料标准化技术委员会（ SAC/TC 408 ）归口。 本标准起草单位： 中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究院 、陕西为康食品科技股份有 限公司、晨光生物科技集团股份有限公司、驻马店市王守义十三香调味品集团有限公司、山东百佳食品 有限公司、青岛利和萃取股份有限公司、中国食品土畜进出口商会调料分会。 本标准主要起草人：刘英杰、刘强、刘登帅、张慧、赵伯涛、刘继华、焦利卫、吴耀军、霍书香、 王银良、王艳改、黄晓德、苏海、李漪、张永昌、孙西丽。 GH/T 1290 —2020 1 花椒及花椒加工产品 花椒酰胺总含量的测定 紫外分光光度法 1 范围 本标准规定了花椒及花椒加工产品中花椒酰胺总含量的紫外分光光度测定方法。 本标准适用于花椒及花椒加 工产品的分析与检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/ T 12729.2 香辛料和调味品取样方法 GB/ T 12729.3 香辛料和调味品分析用粉末试样的制备 3 术语与定义 3.1 花椒加工产品 prickly ash products 花椒经粉碎、萃取等工艺生产的产品。主要包括花椒粉、花椒油树脂、花椒油等以花椒为原料加工 的产品。 3.2 花椒酰胺 fagaramide 花椒呈麻味的主要成分，含有羟基 -α-山椒素、羟基 -β-山椒素、羟基 -γ-山椒素和羟基 -ε-山椒素等多 种酰胺类成分。 4 原理 花椒酰胺主要包含羟基 -α-山椒素、羟基 -β-山椒素、羟基 -γ-山椒素和羟基 -ε-山椒素等酰胺类组分， 试样中的花椒酰胺成分经甲醇提取后， 在 270 nm波长具有最大吸收， 吸光度与提取液中花椒酰胺的含量 存在正相关性，不同类型样品的萃取液在 270 nm的吸收系数不同，通过吸光度折算吸收系数法对样品中 的花椒酰胺总量进行测定。 5 试剂材料与仪器设备 5.1 试剂材料 5.1.1 甲醇：色谱纯。 5.1.2 微孔滤膜：孔径为 0.22 μm有机相滤膜。 5.2 仪器设备 GH/T 1290 —2020 2 5.2.1 紫外可见分光光度计，带 1 cm石英比色皿。 5.2.2 分析天平，感量 0.0001 g。 5.2.3 万能粉碎机，转速 ≥10000 rpm 。 5.2.4 组织捣碎机，转速 ≥300 rpm 。 5.2.5 恒温水浴锅。 5.2.6 超声清洗器，超声功率 240 W。 6 样品处理 6.1 干花椒 取混合均匀的花椒粒 100 g，用万能粉碎机粉碎后过 20目筛，混匀。称取 1g(精确至 0.0001 g）粉碎 混匀后的样品置于烧瓶中，加甲醇 50 mL，超声萃取 0.5 h，冷却至室温， 转移至100 mL容量瓶中， 甲醇 定容，移取上清液 10 mL于50 mL容量瓶定容，经 0.22 μm滤膜过滤，待测。 6.2 鲜花椒 取混合均匀的鲜花椒粒 200 g。经组织捣碎机捣碎后，称取 5 g(精确至 0.000 1 g）粉碎混匀后的样品 置于具塞烧瓶中，加甲醇 50 mL，超声萃取 0.5 h，冷却至室温， 转移至100 mL容量瓶中， 甲醇定容，移 取上清液 10 mL于50 mL容量瓶定容，经 0.22 μm滤膜过滤，待测。 6.3 花椒粉 称取 1 g(精确至 0.000 1 g）混匀后的样品置于具塞烧瓶中，加甲醇 50 mL，超声萃取 0.5 h，冷却至室 温，转移至 100 mL容量瓶中， 甲醇定容，移取上清液 10 mL于50 mL容量瓶定容，经 0.22 μm滤膜过滤， 待测。 6.4 花椒油树脂 取膏状或固体油树脂样品置于 50 ℃水浴锅中溶解，摇匀。精密称 取0.2 g（精确至 0.000 1 g）样品置 于具塞烧杯中，加甲醇 50 mL，超声萃取 0.5 h，冷却至室温，转移至 100 mL容量瓶中，甲醇定容， 经0.22 μm滤膜过滤，待测。 6.5 花椒油 精密称取花椒油 0.2 g（精确至 0.000 1 g ）样品置于具塞烧瓶中，加甲醇 50 mL，超声萃取 0.5 h，冷 却至室温，转移至 100 mL容量瓶中，甲醇定容， 经0.22 μm滤膜过滤，待测。 7 测定 将样品液置于 1 cm比色皿中，以甲醇为参比，测定 270 nm处的吸光度，吸光度超出仪器测定范围的 样品液应用甲醇稀释后测定。 8 结果计算 试样中花椒酰胺含总量以羟基 -α-山椒素计，单位以毫克每克（ mg/g）表示，按式（ 1）计算： GH/T 1290 —2020 3 mEAKV ................................ ................................ ................. (1) 式中： X——样品中花椒酰胺类物质的含量， 单位为毫克每克（ mg/g）； A——样品溶液 270 nm处的吸光度； V——定容体积，单位为毫升（ mL）； K—— 样品溶液测定稀释的倍数； m——样品质量 ，单位为克 （g）； E——吸光系数， 1 mg/mL花椒酰胺溶液在 270nm处的吸光值，其中花椒及花椒粉的系数为 410，花 椒油树脂及花椒油产品的系数为 380。 取重复性条件下绝对差值不大于算术平均值 5%的两次独立测定结果的算术平均值为测定值。计算 结果保留小数点后 2位。 GH/T 1290 —2020 4 A A 附 录 A （资料性附录） 典型紫外吸收图谱 A.1 羟基 -α-山椒素的紫外吸收光谱见图 A.1。 图A.1 羟基-α-山椒素的典型紫外吸收光谱图 A.2 花椒样品的典型紫外吸收光谱见图 A.2。 图A.2 花椒样品的典型紫外吸收光谱图 00.511.5 190 210 230 250 270 290 310 330 350 370 390 Abs 波长（nm） 00.511.5 190 210 230 250 270 290 310 330 350 370 390 ABs 波长（ nm） _________________________________