ICS 11.020 C 59 WS 中华人民共和国 卫生行业标准 WS 295—2019 代替WS 295—2008 流行性脑脊髓膜炎诊断 Diagnosis for meningococcal meningitis 2019 - 01 - 02发布 2019 - 07 - 01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS 295—2019 II 前 言 本标准的5.1、5.2、5.3为强制性条款，其余为推荐性条款。 本标准按照 GB/T 1.1 —2009 给出的规则起草。 本标准代替 WS 295—2008《流行性脑脊髓膜炎 诊断标准 》。 本标准与 WS 295—2008相比，主要技术变化如下： ——增加了缩略语（见第 2章）； ——修改了流行病学史（见 3.1，2008年版的2.1）； ——修改了临床表现（见 3.2,2008 年版的2.2）； ——修改了“末梢血象”为“血常规”（见 3.3.1，2008年版的2.3.1）； ——增加了脑脊液检查的结果 （见3.3.2）； ——增加了“ 瘀点（斑）组织液 ”（见3.3.3.2和3.3.3.3）； ——修改了诊断原则 （见4，2008年版的3）； ——修改了“血清学”为“免疫学”（见 3.3.4，2008年版的2.3.4）； ——修改了疑似病例（见 5.1，2008年版的4.2）； ——修改了临床诊断病例（见 5.2，2008年版的4.3）； ——修改了确诊病例（见 5.3，2008年版的4.4）； ——增加了“其他脑膜炎球菌性疾病”（见 7.2）； ——增加了“鉴别诊断”（见附录B的B.4）； ——修改了脑膜炎奈瑟菌实验室检测方法（见附录 A）； ——根据流行性脑脊髓膜炎流行病学特征的变化，在附录 B中，对流行性脑脊髓膜炎的病原 学、流行病学和临床表现中的有关描述予以订正（见附录 B）。 本标准起草单位： 中国疾病预防控制中心 、首都医科大学附属北京 地坛医院、山东省疾病预防控 制 中心、甘肃省疾病预防控制中心、山东大学齐鲁儿童医院、 首都医科大学附属 北京儿童医院、 中国医 学科学院 北京协和医院 。 本标准主要起草人： 李艺星、 崔富强、 邵祝军、李军宏、李兴旺、徐爱强、蒋荣猛、朱兵清、李慧、 盖中涛、申昆玲、 吴丹、范洪伟 。 本标准所替代标准的历次版本发布情况为： ——WS 295—2008。 WS 295—2019 1 流行性脑脊髓膜炎诊断 1 范围 本标准规定了 流行性脑脊髓膜炎 的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断 。 本标准适用于 全国各级各类医疗 卫生机构及其医务 人员对流行性脑脊髓膜炎 的诊断。 2 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CFU/mL ：每毫升菌落形成单位（ colony-forming unit/mL） DIC：弥散性血管内凝血（ disseminated or diffuse intravascular coagulation ） DNA：脱氧核糖核酸（ deoxyribonucleic acid ） ELISA：酶联免疫吸附试验（ enzyme-linked immunosorbent assay ） IgG：免疫球蛋白 G (immunoglobulin G) OD：光密度（ optical density ） PBS：磷酸盐缓冲液（ phosphate buffer saline ） Real-time PCR ：实时荧光聚合酶链式反应 (real-time polymerase chain reaction) SBA：血清杀菌力试验 (serum bactericidal assays) TTC：氯化三苯基四氮唑 (triphenyl tetrazolium chloride) rpm：每分钟转数（revolutions per minute） WHO：世界卫生组织 (world health organization ) 3 诊断依据 3.1 流行病学史 当地有本病发生或流行，或发病前 10 d内有流行性脑脊髓膜炎流行地区居住或旅行史。 3.2 临床表现 3.2.1 潜伏期 数小时至 10 d，一般为 2 d～3 d。 3.2.2 主要临床症状和体征 3.2.2.1 发热、头痛、呕吐，和（或）有脑膜刺激征，婴幼儿可见前囟隆起。重症患者可有不同程度 的意识障碍和（或）感染中毒性休克。 3.2.2.2 皮肤、黏膜出现瘀点（斑）。瘀斑可迅速扩大融合成片 。 WS 295—2019 2 3.3 实验室检测 3.3.1 血常规 白细胞总数 、中性粒细胞 计数明显升高。 3.3.2 脑脊液常规 典型改变为压力增高 ，外观呈浑浊米汤样或脓样； 白细胞数明显增高， 并以多 形核白细胞增高为主； 糖及氯化物明显减少，蛋白含量升高。 但在病程初期仅有压力升高，外观清亮，随后出现典型改变，暴 发休克型患者脑脊液 通常清亮，蛋白、细胞数和糖亦无变化。 3.3.3 病原学 3.3.3.1 瘀点（斑） 组织液、 脑脊液涂片检测， 可在多形核白细胞内或细胞外见到革兰阴性肾形双球菌 。 3.3.3.2 脑脊液、 血液、瘀点（斑）组织液培养脑膜炎奈瑟菌阳性。 3.3.3.3脑脊液、 血液、瘀点（斑）组织液脑膜炎奈瑟菌特异性核酸检测阳性。 3.3.4 免疫学 3.3.4.1 急性期脑脊液样品脑膜炎奈瑟菌 特异性多糖抗原 检测阳性。 3.3.4.2 恢复期血清 脑膜炎奈瑟菌 特异性IgG抗体检测，其 效价较急性期呈 4倍或4倍以上升高 。 4 诊断原则 根据流行病学史和临床表现及 血常规和 (或)脑脊液常规检测结果 做出疑似 病例和（或） 临床诊断病 例的诊断。 确诊需要脑膜炎奈瑟菌病原学或免疫学检测结果， 对病原学检测阳性的 病例进一步 做出病原学分群 诊断（见附录 A的A.3）。 5 诊断 5.1 疑似病例 同时符合 3.1和3.2.2.1，并同时符合 3.3.1、3.3.2任一项。 5.2 临床诊断 病例 符合5.1并同时符合 3.2.2.2。 5.3 确诊病例 符合5.1或5.2，并同时符合 3.3.3、3.3.4中任一项。 5.4 临床分型 在临床诊断或确定诊断基础上，进行临床分型诊断（参见附录 B的B.3）。 WS 295—2019 3 6 鉴别诊断 主要和其他细菌所致的脑膜炎、其他原因所致的脓毒症、各种原因引起的紫癜等疾病鉴别。婴幼儿 还应与高热惊厥等疾病鉴别（ 参见附录B的B.4）。 7 其他 7.1 带菌者 无临床症状和体征，咽拭子培养脑膜炎奈瑟菌阳性或脑膜炎奈瑟菌特异性核酸检测阳性。 7.2 其他脑膜炎球菌性疾病 人感染脑膜炎奈瑟菌后，大部分为无症状带菌者。出现症状者，临床疾病谱复杂 多样，除 可引起脑 脊髓膜炎 外，还可 引起脓毒症、肺炎，偶也可引发关节炎、心肌炎、心包炎和眼内炎等 疾病。 WS 295—2019 4 附 录 A （规范性附录） 脑膜炎奈瑟菌实验室检测方法 A.1 样品采集、处理和运送 A.1.1 样品采集和处理 A.1.1.1 脑脊液 无菌操作采集脑脊液至少 2 mL，采集后立即送往微生物学实验室。如有条件，建议床旁接种，将适 量脑脊液（ 0.1 mL～0.5 mL）接种于 5％羊血巧克力平板 (以下简称巧克力平板 )或血平板，三区划线后 送至实验室进行培养。 实验室收到脑脊液样品后， 应在1 h内进行检测。首先 将样品放入无菌试管， 2 000 rpm～3 000 rpm，离心20 min，吸出上清液。上清液可用于脑膜炎奈瑟菌特异抗原检测，亦可将其置于 -20℃，进 行其他检测。沉淀物部分应进行充分振荡混匀，用于培养及镜检。如脑脊液样品不足 1 mL，则不进行 离心，直接进行平板接种培养和革兰染色镜检。 A.1.1.2 血液 如需开展核酸检测（如 Real-time PCR检测）， 在离心之前无菌操作留取脑脊液样品 200 µL，-20℃ 以下保存。 无菌采集患者急性期静脉血液 5 mL～10 mL，立即送往微生物学实验室进行 处理和检测。建 议床旁接种，将适量的血液（ 5 mL～10 mL）立即注入血培养瓶内，或将 0.5 mL血液直接接种于巧克力 平板或血平板。剩余血液样品用于 脑膜炎奈瑟菌特异性核酸检测或 IgG抗体检测。采集患者发病急性期 和恢复期双份血液样品，分离血清，检测 脑膜炎奈瑟菌 特异性IgG抗体。采集血液样品过程中应不使用 抗凝剂。 建议在抗感染治疗之前，同时在 不同部位 各采集1份，共2份血液样品 进行培养。新生儿采集 1份血液样 品。 A.1.1.3 瘀点或瘀斑 选取患者皮肤上的新鲜瘀点或瘀斑，先用碘伏消毒，再用 70％的酒精擦除碘伏 ，待酒精完 全挥发后 用无菌针头挑破，挤出组织液，用消毒后的玻片直接蘸取组织液涂片，革兰染色镜检；随后用无菌棉签 蘸取组织液