书 书 书犐犆犛 １１ ． ０２０ 犆 ５０ 　 中华人民共和国卫生行业标准 犠犛 ／ 犜 ４８９ — ２０１６ 尿路感染临床微生物实验室诊断 犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔犱犻犪犵狀狅狊犻狊狅犳狌狉犻狀犪狉狔狋狉犪犮狋犻狀犳犲犮狋犻狅狀狊 ２０１６  ０７  ０７ 发布 ２０１６  １２  １５ 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准起草单位 ： 中国医学科学院北京协和医院 、 中国人民解放军总医院第一附属医院 、 北京医院 、 上海交通大学附属瑞金医院 、 天津市公安医院 、 复旦大学附属中山医院 、 华中科技大学同济医学院附属同济医院 、 北京电力医院 、 香港玛丽医院 。 本标准主要起草人 ： 徐英春 、 窦红涛 、 张丽 、 陈雨 、 范欣 、 蒋伟 、 胡云建 、 倪语星 、 王金良 、 胡必杰 、 孙自镛 、 赵锐 、 梁浩钧 。 Ⅰ 犠犛 ／ 犜 ４８９ — ２０１６尿路感染临床微生物实验室诊断 １ 　 范围 本标准规定了尿液标本临床微生物检验的技术要求 。 本标准适用于开展尿液标本细菌培养 、 鉴定和药物敏感性试验的微生物实验室 。 ２ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ２ ． １ 尿路感染 　 狌狉犻狀犪狉狔狋狉犪犮狋犻狀犳犲犮狋犻狅狀 由各种病原体入侵泌尿系统引起的疾病 。 根据感染部位可分为上尿路感染 （ 肾盂肾炎 、 输尿管炎 ） 和下尿路感染 （ 膀胱炎 、 尿道炎 ）； 根据有无尿路异常 （ 如梗阻 、 结石 、 畸形 、 膀胱输尿管反流等 ） 分为复杂性和非复杂性尿路感染 。 ２ ． ２ 白细胞尿 　 犾犲狌犽狅犮狔狋狌狉犻犪 脓尿 　 ｐｙｕｒｉａ 新鲜尿液离心后 ， 每个高倍镜视野白细胞超过 ５ 个 。 ３ 　 标本采集 ３ ． １ 　 总则 宜采集晨尿 ， 嘱患者睡前少喝水或不喝水 ， 尿液在膀胱内潴留至少 ４ｈ 以上 ， 可降低假阴性率 。 无症状的患者应连续采集 ３ 天晨尿送检 。 尿液标本质量的影响因素较多 ， 即使采用侵入性的尿液采集法仍可能被皮肤 、 会阴或尿道等处正常菌群污染 ， 因此减少污染是保证尿液标本质量的关键 。 ３ ． ２ 　 清洁中段尿采集 清晨起床后用肥皂水清洗会阴部 ， 女性应分开大阴唇 ， 男性应上翻包皮 ， 仔细清洗 ， 再用清水冲洗尿道口周围 。 将前段的尿液丢弃 ， 留取中段尿液约 １０ｍＬ 直接排入无菌容器中 ， 立即送检 ， 采集后于 ０．５ｈ 内进行接种 。 尿流不畅 、 包皮过长或卫生条件不好的患者易造成尿液标本污染 。 清洁中段尿是临床最易获得的尿液标本 。 ３ ． ３ 　 耻骨上膀胱穿刺采集 评估膀胱内细菌感染的 “ 金标准 ”。 消毒脐部至尿道皮肤 ， 对穿刺部位皮肤进行局麻 ； 在耻骨联合和脐部中线部位将针头插入充盈的膀胱 ， 从膀胱吸取约 ２０ｍＬ 尿液 ； 无菌操作将尿液注入无菌螺口杯 ， 送至实验室 。 这一方法可用于诊断尿道厌氧菌感染 ， 也是儿科患者 、 脊柱损伤患者和没有获得明确培养结果的患者最常用的方法 。 ３ ． ４ 　 留置导尿管采集 采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液 。 先消毒导尿管采样口 ， 按无菌操作方法用注射器穿刺 １ 犠犛 ／ 犜 ４８９ — ２０１６导尿管吸取尿液 ； 如果需要 ， 将导管夹闭在管中采集尿标本 ， 但夹闭时间不能超过 ０．５ｈ 。 尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集 。 长期留置导管的患者进行常规尿培养意义不大 ， 这些患者通常会培养出大量定植菌 。 ３ ． ５ 　 膀胱导尿采集 局部消毒后 ， 采用导尿管经尿道插入膀胱收集尿液 ， 严格采用无菌技术插入导管 ， 避免带入细菌 ， 弃去最开始导出的 １５ｍＬ ～ ３０ｍＬ 尿液后再收集培养的尿液 。 注意避免将下尿道细菌经导管引入膀胱 ， 导致继发性感染 。 ３ ． ６ 　 婴幼儿尿液采集袋采集 由于婴幼儿不能自主控制膀胱收缩 ， 需要用采集袋 。 此法很难避免会阴部正常菌群的污染 ， 易出现假阳性 ， 因此该方法尿液培养结果阴性更有意义 。 如培养结果阳性 ， 必要时可用膀胱导尿或耻骨上膀胱穿刺法采集尿液标本进一步确证有无尿道感染 。 ３ ． ７ 　 其他采集方法 其他不常用的尿液采集方法还包括回肠导管导尿采集 、 间歇性导尿管采集 、 肾盂造瘘术 、 输尿管造口术 、 膀胱镜检查术采集等 。 ４ 　 标本标识 应注明患者的基本信息 、 采集方法 、 采集时间 、 临床初步诊断 （ 需注明有无尿路感染的临床表现 ）、 患者是否摄入过量的水以及抗菌药物使用情况等 。 ５ 　 标本运送 尿液标本应尽快送到实验室 ， 若不能及时送达 ， 应 ４℃ 冷藏或添加防腐剂 （ 含 ０．５ｍＬ 的硼酸  甘油或硼酸  甲酸钠 ）， 但均不能超过 ２４ｈ 。 加入防腐剂的尿液标本 ， 至少采集 ３ｍＬ 尿液量 ， 以避免高浓度的防腐剂对致病微生物产生抑制或稀释作用 。 ６ 　 标本接收 收集尿液容器为广口的无菌防漏容器 ， 收到尿液标本后应立即接种 。 冷藏的标本不能用于淋病奈瑟菌培养 。 ７ 　 标本拒收 ７ ． １ 　 不合格标本处理 收到不合格标本 ， 应与临床医师联系 ， 注明拒收的原因并退回 ， 可要求重新留取标本 ， 并做记录 。 若不合格不能重新留取尿液而需培养时 ， 应在报告中注明 ， 并强调此培养结果仅供参考 。 ７ ． ２ 　 标本拒收的情况 标本拒收的情况包括 ： ａ ） 　 标本标识与申请单不符 ， 标识错误或没有标识 ； ２ 犠犛 ／ 犜 ４８９ — ２０１６ｂ ） 未提供采集时间及采集方法 ； ｃ ） 标本采集时间超过 ２ｈ 而未 ４℃ 冷藏或添加防腐剂 ； ｄ ） 标本 ４℃ 冷藏或添加防腐剂但已超过 ２４ｈ ； ｅ ） 连续收集 ２４ｈ 的尿液标本 ； ｆ ） 导尿管尖端培养 ； ｇ ） 标本取自导尿患者尿袋 ； ｈ ） 标本送检时容器有渗漏 ； ｉ ） 除耻骨上膀胱穿刺法外 ， 采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养 。 ８ 　 实验室检查 ８ ． １ 　 尿常规 （ 与尿路感染相关指标 ） ８ ． １ ． １ 　 白细胞酯酶 正常值为阴性 ， 尿路感染时为阳性 。 ８ ． １ ． ２ 　 亚硝酸盐 正常值为阴性 。 阳性常见于大肠埃希菌等革兰阴性杆菌引起的尿路感染 ， 阳性反应程度与尿液中细菌的数量成正比 。 ８ ． １ ． ３ 　 尿蛋白 正常定性为阴性 ， 定量 ＜ １００ｍｇ ／ ２４ｈ 。 尿路感染可有蛋白尿 。 ８ ． ２ 　 尿沉渣检查 （ 与尿路感染相关指标 ） ８ ． ２ ． １ 　 人工检查 取 １０ｍＬ 尿液 ＲＣＦ４００× 犵 离心 ５ｍｉｎ ， 弃上清 ， 留 ０．２ｍＬ 混匀后 ， 计数 １ μ Ｌ 中的有形成分 。 白细胞计数大于正常参考区间 ， 同时伴有上皮细胞增多提示尿路感染 。 吞噬细胞出现提示泌尿系统急性炎症 ， 其数量常与严重程度密切相关 。 ８ ． ２ ． ２ 　 仪器检查 尿液分析仪主要有 ２ 大类 ： 影像式尿液有形成分分析仪 ， 流式细胞术和电阻抗检测相结合的全自动尿有形成分分析仪 。 白细胞计数大于仪器正常参考区间 ， 同时伴有上皮细胞增多提示尿路感染 。 但应人工检查排除干扰因素 。 ８ ． ３ 　 革兰染色镜检 观察有无细菌 、 多形核白细胞和扁平上皮细胞 。 女性尿液标本中如果存在许多扁平上皮细胞 ， 提示标本很可能受到阴道分泌物污染 ， 应重新送检 。 该方法适用于筛查有较高的菌落计数患者 、 大部分无症状患者以及患有肾盂肾炎的患者 。 为了提高在 １０ ４ ＣＦＵ ／ ｍＬ 水平的敏感度 ， 推荐细胞离心涂片后再革兰染色镜检 。 当革兰染色阳性时 ， 与菌尿症相关 ， 并且可以根据细菌形态和染色特性 ， 帮助临床经验治疗选择抗菌药物 。 ８ ． ４ 　 尿培养 ８ ． ４ ． １ 　 培养类型选择 ： 如何接种培养尿液标本 ， 取决于标本的采集方法 、 患者的症状和临床指征 。 尿液 ３ 犠犛 ／ 犜 ４８９ — ２０１６标本接种要求实验室收集必要的信息 ， 包括尿液采集方法 、 患者的类型 （ 例如 ： 泌尿科或老年病科 ）、 临床症状 、 尿液常规镜检分析结果以及既往培养结果 ， 以选择相应的培养类型 ， 见表 １ 。 表 １ 　 尿液培养类型与结果的解释 培养 类型适用人群 采集方法 培养方法生长情况 ＣＦＵ ／ ｍＬ 后续试验 常规 ａ ） 　 门诊患者 ｂ ） 　 大部分非复 杂性尿道感 染患者清洁中段尿 １ μ Ｌ 或 １０ μ Ｌ 接种至 血琼脂平板 ， 麦康凯 或中国蓝琼脂平板 。 ５％ＣＯ ２ 培养 １８ｈ ～ ２４ｈ 。 若无菌生长 ， 应延长培养至 ４８ｈ１ 种革兰阴性或阳性 菌 ≥ １０ ５ 鉴定 ＋ 药敏 １ 或 ２ 种革兰阴性杆 菌 ≥ １０ ５ ， 其他菌 ≤ １０ ４ 鉴定 ＋ 革兰阴性杆 菌进行药敏试验 其他任何种类的细 菌 ≥ １０ ４ 初步鉴定 监测 ａ ） 　 神经性膀胱功 能障碍患者 ｂ ） 　 留置导尿管 患者 ｃ ） 　 老年患者清洁中段尿 １ μ Ｌ 或 １０ μ Ｌ 接种 至血琼脂平板 ， 麦康 凯或中国蓝琼脂平 板 。 ５％ＣＯ ２ 培养 ４８ｈ１ 种革兰阴性或阳性 菌 ≥ １０ ４ 鉴定 ＋ 药敏 １ 革兰阴性杆菌 ≥ １０ ５ ， 其他菌 ≤ １０ ４ 鉴定 ＋ 革兰阴性杆 菌进行药敏试验 其他