ICS 71.100.70 QB 分类号：Y42 备案号：65906-2018 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5294-2018 化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定 高效液相色谱法 Determination of brominated and chlorinated salicylanilide in cosmetics -Highperformance liquid chromatography 2018-10-22发布 2019-04-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T52942018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所（国家香料香精化妆品质 量监督检验中心）。 本标准主要起草人：郭项雨、马强、白桦、孟宪双、李文涛、王超、康薇。 本标准为首次发布。 I QB/T5294—2018 引言 本标准的被测物质3,4,5-三溴水杨酰苯胺、4,5-二溴水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、3',4-二氯水 杨酰苯胺、4,5-二氯水杨酰苯胺是我国《化妆品安全技术规范（2015年版）》规定的禁用物质。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范（2015 年版）》规定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，应进行安全性风险评估，确保在正 常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 II QB/T5294—2018 化妆品中溴代和氯代水杨酰苯胺的测定高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中3,4,5-三溴水杨酰苯胺、4,5-二溴水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、 3',4,5-三氯水杨酰苯胺、3',4'-二氯水杨酰苯胺、4,5-二氯水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的 高效液相色谱测定方法。 本标准适用于膏霜类、水剂类、唇膏类、散粉类和香波类化妆品中3,4,5-三漠水杨酰苯胺、4,5 二溴水杨酰苯胺、3,5-二溴水杨酰苯胺、3',4,5-三氯水杨酰苯胺、3'4'-二氯水杨酰苯胺、4,5-二氯 水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的测定。 本标准的检出限和定量限：6种溴代和氯代水杨酰苯胺的检出限为5mg/kg，定量限为10mg/kg 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样经溶剂超声提取，离心过滤后，以高效液相色谱进行测定，外标法定量，液相色谱-质谱确认。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：色谱纯。 4.2乙睛：色谱纯。 4.3四氢呋喃。 4.4氯化钠。 4.5标准品：3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、CAS号、 分子式、相对分子质量、结构式参见附录A表A.1，纯度不小于97%。 4.6标准储备液：分别称取3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品（4.5）各10mg （精确至0.0001g），分别置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度 为1000mg/L的标准储备液，于4℃保存，可使用3个月。 4.76种卤代水杨酰苯胺混合标准储备液：分别准确移取3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水 杨酰苯胺标准储备液（4.6）各1mL于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1）稀释至刻度，该溶液中3,4,5-三 溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺的浓度均为100mg/L。 5仪器和设备 5.17 高效液相色谱（HPLC）仪：紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.32 分析天平：感量为0.0001g和0.001g。 5.4 离心机：转速不低于5000r/min。 5.5走 超声波清洗器。 5.6具塞塑料离心管：10mL。 QB/T5294-2018 5.7微孔滤膜：0.45μm，材质为聚四氟乙烯。 6分析步骤 6.1样品处理 6.1.1膏霜类样品 称取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，加入2g氯化钠（4.4），加 入10mL甲醇（4.1），摇匀，超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45μm微孔滤 膜（5.7）过滤，滤液供高效液相色谱测定。 6.1.2唇类样品 取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，加入2mL四氢呋喃（4.3）， 加入8mL甲醇（4.1），摇匀，超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45μm微孔滤 膜（5.7）过滤，滤液供高效液相色谱测定。 6.1.3水剂类、散粉类及香波类样品 取1g（精确至0.001g）试样置于10mL具塞塑料离心管（5.6）中，摇匀，加入10mL甲醇（4.1）， 超声提取20min，5000r/min离心15min后，上清液经0.45μm微孔滤膜（5.7）过滤，滤液供高效液 相色谱测定。 6.2测定条件 高效液相色谱参考条件如下： a）色谱柱：EclipseXDBPhenyl，5μm，250mm×4.6mm（内径），或相当者； b) 流量：1.0mL/min； c) 流动相：乙腈+水（0.1%甲酸）=68+32（体积比）； (P 检测波长：220nm； e) 柱温：35℃； f）进样量：10μL。 6.3标准曲线的绘制 的混合标准工作溶液。按6.2测定条件浓度依次由低向高进样测定，以峰面积-浓度作图，绘制标准工 作曲线。 3,4,5-三溴水杨酰苯胺等6种溴代和氯代水杨酰苯胺标准品溶液的高效液相色谱图参见附录B图 B.1，其标准品溶液的紫外吸收光谱图参见附录B图B.2。 6.4测定 按6.2测定条件对待测样品进行测定，如果检出的漠代和氯代水杨酰苯胺的色谱峰的保留时间与 标准品一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致，则可初步认 定样品中存在漠代和氯代水杨酰苯胺，用外标法定量。漠代和氯代水杨酰苯胺含量应该在标准曲线之 内，超出线性范围则应稀释后再进行分析。必要时，阳性样品应用液相色谱-质谱进行确认试验（参见 附录C)。 6.5空白试验 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。 7结果计算 结果按公式（1）计算，计算结果保留两位小数，计算结果应扣除空白值： 2 QB/T5294-2018 (1) 式中： 样品中溴代和氯代水杨酰苯胺的含量， X 单位为毫克每千克 (mg/kg); 从标准工作曲线上查出的试样溶液中漠 代和氯代水杨酰苯胺的浓度，单位为毫克每 C 升（mg/L 样液最终 定容体积，单位为毫升（mL） 试样的质量， 位为克（g）。 m 单 回收率和精密度 8 在添加浓度10mg/kg200mg/kg浓度范围内，测得回收率在89.4%~107.8%，米 相对标准偏差为 2.1%~6.7% 允许差 9 QB/T5294-2018 附录A （资料性附录） 6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式 6种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、 CAS号、分子式相对分子质量、结构式参见 表A.1。 表A.16种溴代和氯代水杨酰苯胺的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、 相对分子质量、结 构式 相对分子 中文名称 英文名称 CAS号 分子式 结构式 质量 3,4,5-三溴 3,4,5-Tribromo 87-10-5 CH,BrN 449.92 水杨酰苯胺 -salicylanilide OH 4,5-二溴水 Br Dibromsalon 87-12-7 CH,BrNO2 371.02 杨酰苯胺 OH 3,5-二溴水 Metabro 577-72-2 CuHBrN2 nsalon 杨酰苯胺 HO. 3',4,5-三氯 3'4,5-Trichloro 642-84-2 C13HgCl,NO2 316.57 水杨酰苯胺 -salicylanilide OH CI 3',4-二氯水 3',4'-Dichlorosalicylanilide 282.12 杨酰苯胺 NH CI HO. C 4,5-二氯水 4',5-Dichlorosalicylanilide CI 1147-98-4 C13H,Cl2NO2 282.12 杨酰苯胺 JE 4