SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4532.32017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法三 Commercialkit testmethod-Beta-lactams-Test method II 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 刮涂层查真伪 SN/T 4532.32017 前言 本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法 去β-内酰胺类》的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检 疫局、中国检验检疫科学研究院、北京勤邦生物技术有限公司。 本部分主要起草人：刘金华、聂丹丹、张勋、吴连鹏、罗雁非、郑晶、马文晨、孙舒、曲辉、彭勃、牟峻、 邹明强。 1 SN/T4532.3—2017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法三 1范围 SN/T4532的本部分规定了牛奶样品中β-内酰胺类药物的胶体金免疫层析检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对牛奶中β-内酰胺类药物的定性检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T2775 商品化食品检测试剂盒评价方法 3 原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中的β-内酰胺类药物与检测线上的β-内酰胺类抗原 共同竞争胶体金标记的特异性单克隆抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量 定性判定。 4试剂与材料 员会进行了评价，评价结果参见附录A。 4.2商品化试纸条、微孔反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。 4.3 3试剂盒组成如下： a）β-内酰胺类检测试纸条； b） 微孔试剂（主要成分为肢体金标记的β-内酰胺类抗体）。 5仪器设备 移液器：200μL。 6 样品制备 检测前样品需充分混匀。 ）北京勤邦生物技术有限公司产品，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果 1) 其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 1 SN/T4532.3—2017 7分析步骤 7.1 将所需数目的试纸条和待检牛奶样品恢复至室温，并在60min内尽快使用。 7.2用微量移液器吸取200μL牛奶样本于微孔中，使其充分与微孔中试剂混匀后，开始计时。 7.3室温（20℃～25℃）孵育5min后，将标记好的试纸条插人微孔中-印有“MAX”线端朝下，使之充 分浸入溶液中。 7.4再次室温（20℃～25℃）孵育5min后，取出试纸条并根据示意图判断结果。 8结果判定 通过对比控制线和检测线的颜色深浅来进行结果判定。 目视结果判定依据： a） 无效：未出现控制线（C线），表示操作不正确或试纸条已失效。 b）阴性：控制线（C线）显色，检测线（T线）显色，无论颜色深浅，均表示牛奶样本中β-内酰胺类 抗生素浓度低于检测限。 阳性：控制线（C线）显色，检测线（T线）不显色，表示牛奶样品中β-内酰胺类抗生素浓度等于 或高于检测限。 9方法性能指标 9.1检出限 青霉素G：4ug/kg;氨芊青霉素：4μg/kg；阿莫西林：5.ug/kg；苯甲异嗯唑青霉素：8μg/kg；邻氯青 霉素：8μg/kg；双氯青霉素：8μg/kg.萘夫西林30μg/kg；头孢哌酮：50μg/kg；头孢曲松：100μg/kg； 头孢洛宁：10μg/kg；头孢喹20μg/kg；头孢噻呋：100μg/kg。 9.2特异性 检测浓度≤40μg/kg的金霉素、盐酸土霉素、四环素、达氟沙星、氯霉素、强力霉素、沙拉沙星、螺旋 霉素、林可霉素盐酸盐、双氟沙星、头孢唑啉、头孢氨芊、头孢匹林钠、头孢呋均无交叉反应。 2 SN/T 4532.3—2017 附录A （资料性附录） 牛奶中β-内酰胺类快速检测试纸条评价结果2) A.1 灵敏度 灵敏度见表A.1。 表A.1 灵敏度 药物名称 检测限范围/（μg/kg） 验证浓度水平/（μg/kg） 青霉索G(penicillinG) 2~4 4 氨芋青霉素（Ampicillin） 3~4 4 阿莫西林（Amoxicillin） 4~5 5 苯甲异嗯唑青霉素（Oxacillin) 6~8 8 邻氣青爺素（Cloxacillin) 6~8 8 6~8 双氣青霉素（Dicloxacillin) 8 蔡夫西林（Nafcillin） 20~30 30 头孢哌酮（Cefoperazone) 40~50 50 头孢曲松（Ceftriaxone） 100 100 头孢洛宁（Cefalonium） 10 10 头孢喹（Cefquinome） 20 20 头孢噻呋（Ceftiofur） 100 100 A.2 特异性 检测浓度≤40ug/kg的金霉素、盐酸土霉素、四环素、达氟沙星、氯霉素、强力霉素、沙拉沙星、螺旋 霉素、林可霉素盐酸盐、双氟沙星、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢匹林钠、头孢均无交叉反应。 2） 本试剂盒评价结果仪适用于北京勤邦生物技术有限公司的3-内酰胺类快速检测试纸条