SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4532.5—2017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法五 Commercial kit test method-Beta-lactams---Test method V 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4532.5—2017 前言 本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类》的第5部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检 疫局、中国检验检疫科学研究院、北京博欧实德生物技术有限公司。 本部分主要起草人：聂丹丹、罗雁非、刘金华、郑晶、刘阳、曲辉、彭勃、王宁、芦春梅、邹明强、牟峻。 SN/T4532.5—2017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法五 1范围 SN/T4532的本部分规定了牛奶中β-内酰胺类和四环素类药物残留的胶体金免疫层析检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对牛奶中β-内酰胺类和四环素类药物残留的定性检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 该方法基于胶体金免疫技术，试纸条结合垫包被有检测物抗体胶体金复合物，检测线包被有检测物 抗原，当样品中含有检测物时，会与检测线包被抗原竞争结合金标复合物，通过检测线与控制线颜色深 浅比较，来实现对样品中待测物含量的定性判断。 4试剂与材料 4.1β-内酰胺类/四环素类四联检测试剂盒"：参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒 评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。 4.2商品化试纸条、反应杯及反应试剂在0℃～7℃、干燥、避光条件下保存。 4.3试剂盒组成如下： a）检测条； b) 阳性质控； 阴性质控。 5仪器设备 5.1 温育器：56℃±1℃。 5.2读数仪。 5.3移液器：可调量程至300μl。 1）北京博欧实德生物技术有限公司产品，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。 如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 1 SN/T4532.5—2017 6样品制备 检测前样品需充分混匀。 7分析步骤 7.1将温育器恒温至56℃土1℃。 7.2将检测条放置在温育器的槽中，在检测条上标记样品编号。撕开检测条上的封膜至指示线处。 7.3用移液器取300μL牛奶样品，竖直缓慢滴加至检测条两侧任意一侧的凹槽中，再将封膜盖回。 7.4盖上温育器盖，温育器自动开始8min倒计时，温育结束后，蜂鸣器响起，打开塑料盖，取出检 测条。 7.5目视或通过读数仪判读结果。 8结果判定 8.1 目视判定 目测对比质控线（C）和检测线（BL/TE）的色差。 阳性：两条检测线中有一条或者两条颜色均浅于质控线，或检测线未出现。 阴性：检测线颜色与质控线相当或深于质控线。 无效：质控线未出现或模糊不均匀，说明结果不可用，需要重新进行检测。 8.2读数仪结果读取及分析 将检测条插入仪器的读数室，按回车键读数，约8s后，显示结果：出现“NEGTIVE”字样为阴性结 果，出现“POSITIVE”字样为阳性结果。 9方法性能指标 9.1检出限 阿莫西林：4μg/kg；氨芋西林：4ug/kg；头孢乙腈：12uμg/kg；头孢氨芋：30μg/kg；头孢洛宁： 5μg/kg；头孢唑林：8ug/kg；头孢哌酮：4μg/kg；头孢：20μg/kg；头孢噻呋：10μg/kg；头孢呋： 5μg/kg；头孢匹林：4μg/kg；邻氯青霉素：30μg/kg；双氟青霉素：30μg/kg；青霉素G：2μg/kg；金霉 素：50μg/kg；土霉素：75μg/kg；四环素：10μg/kg。 9.2特异性 当浓度≤100ug/kg时，氟苯尼考、林可霉素、阿维菌素、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、氯霉素、克伦特 >100μg/kg时伊维菌素、林可霉素、丹诺沙星、嗯啉-2-羧酸、2卤2甲吡啶酚、去甲基金霉素、甲烯土 霉素、强力霉素出现交叉反应。 2 SN/T4532.5-2017 附录A （资料性附录） 牛乳中β-内酰胺类和四环素类快速检测试纸条评价结果2》 A.1 检出限 检出限见表A.1。 表A.1检出限 药物名称 检测限范围/（μg/kg） 验证浓度水平/（μg/kg） 阿莫西林（Amoxicillin） 2.5~4.0 4 氨苄西林（Ampicillin） 2.5~4.0 4 头孢乙腈（Cefacetrile） 6~12 12 头孢氨苄（Cefalexin） 15~30 30 头孢洛宁（Cefalonium） 3~5 5 头孢唑啉（Cefazolin） 8~16 8 头孢眼酮(Cefoperazone) 4~8 4 头孢喹（Cefquinome） 15~20 20 头孢噻呋（Ceftiofur） 10~20 10 头孢呋（Cefuroxime) 2~5 5 头孢匹林（Cephapirin） 4~8 4 邻氯青霉素（Cloxacillin） 25~35 30 双氣青霉素（Dicloxacillin) 20~30 30 青霉素（GpenicillinG) 2~3 2 金霉素(Chlortetracycline) 50~100 50 土霉素(Oxytetracycline) 50~100 75 四环素（Tetracycline） 10~30 10 A.2 特异性 当浓度≤100ug/kg时，氟苯尼考、林可霉索、阿维菌索、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、氮霉素、克伦特 罗、喹嗯啉-2-羧酸、二氮二甲吡啶酚、去甲基金霉素、甲烯土霍素、强力霉素均无交叉反应。当浓度> 100μg/kg时伊维菌素、林可霉素、丹诺沙星、喹嗯咻-2-羧酸、2卤2甲吡啶酚、去甲基金霍素、甲烯土霉 素、强力素出现交叉反应。 条-牛奶。