SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4813—2017 进出口食用动物拟除虫菊酯类残留量 测定方法 气相色谱-质谱/质谱法 Determination of synthetic pyrethroids of live animalfor import and export-- GC-MS/MS 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4813—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草， 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：刘韬、张代辉、陈树兵、张勋、付瑶、康明芹、赵慧、石建平。 - SN/T4813—2017 进出口食用动物拟除虫菊酯类残留量 测定方法 气相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口食用动物拟除虫菊酯类残留量的气相色谱-质谱/质谱检测方法。 本标准适用于进出口猪、牛、羊等动物的血液和尿液中联苯菊酯、氟丙菊酯、氟氯氰菊酯、丙烯菊酯、 氯氰菊酯、溴氰菊酯、醚菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、氯菊酯和七氟菊酯12种拟除虫菊酯类 残留量的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中残留的拟除虫菊酯类采用乙腈溶液提取，经无水硫酸镁及氯化钠盐析分层，提取液经无水硫 准曲线外标法定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙腈：色谱级。 4.2 丙酮：色谱级。 4.3甲酸：色谱级。 4.4乙酸：色谱级。 4.5 无水乙酸钠：分析纯。 4.6 5Cl8固相吸附剂：粒径40μm~60μm。 4.7 乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）吸附剂：粒径40μm～60μm。 4.8 3无水硫酸镁：分析纯，550℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 4.90.1%甲酸水溶液（体积分数）。 4.10 拟除虫菊酯类农药标准品：纯度大于或等于97%，见附录A中的表A.1。 4.11拟除虫菊酯类标准储备溶液：分别准确称取按其纯度折算为100%质量的12种拟除虫菊酯各 20.0mg，分别用丙酮溶解并定容至100mL，浓度相当于200mg/L，储备液在－18℃以下储存于棕色 瓶中，可避光保存12个月。 4.12拟除虫菊酯类混合标准工作溶液：根据需要，用丙酮将拟除虫菊酯标准储备溶液配制成 1.0ug/mL的拟除虫菊酯混合标准工作溶液。混合标准工作溶液应使用前配制。 1 SN/T4813—2017 4.13拟除虫菊酯类混合标准工作溶液：吸取适量的上述混合标准溶液0.01、0.02、0.05、0.1和0.2mL， 用丙酮定容至1mL，配制成混合标准工作溶液，现用现配。 4.14有机微孔滤膜：0.22μm。 5 仪器和设备 5.1气相色谱-串联质谱仪，配电喷雾离子源(ESI)。 5.2电子天平：感量（0.01mg和0.01g）。 5.3组织捣碎机。 5.4高速均质器：8000r/min。 5.5离心机：10000r/min。 5.6氮吹仪。 5.7 涡旋混合器。 6 试样制备与保存 6.1 尿液：新鲜澄清尿液可直接取用，若有杂质需离心去除沉淀物，取上清液。长期保存需置于4℃下。 6.2 血液：全血凝固后取上层血清，避免溶血，若有溶血，可离心后取上清液。长期保存需置于4℃下。 6.3 在制样和保存的操作过程中，应防止样品受到污染。 7 测定步骤 提取 7.1 水硫酸镁、0.3g氯化钠，高速均质1min，10000r/min离心5min，取上清液，待净化。 7.2净化 准确吸取2mL提取液于预先加有250mgC18、450mgPSA吸附剂的离心管中，涡旋1min，以 4000r/min离心5min，静置10min，0.22μm滤膜过滤，供GC-MS/MS分析。 7.3测定 7.3.1 气相色谱-质谱/质谱条件 气相色谱-质谱/质谱条件： 色谱柱：HP-5MS石英毛细管色谱柱（30mX0.25mm，0.25μm），或相当者； a) 进样口温度：260℃； 载气为99.999%氨气，恒流模式，流速为1.0mL/min； c) d) 离子源温度：280℃； e) 电离能量：70eV； f) 柱温：70℃； 色谱柱温度：70℃保持1min，然后以20℃/min程序升温至270℃，再以1℃/min升温至 g) 280℃，再以20℃/min升温至300℃，保持5min； h) 接口（传输线）温度：280℃； 2 SN/T 48132017 i) 电子轰击电离源（EI)，选择离子监测模式（SRM)，选择离子监测条件参见附录B表B.1； j) 溶剂延迟时间：5min； k) 进样量：1.0μL； 1) 进样方式：不分流，1.2min后开阀。 7.3.2 气相色谱-质谱/质谱检测 7.3.2.1 定性测定 在相同的实验条件下，样液中被测物的色谱峰保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的样 液谱图中，所选择的离子对均出现，各定性离子对的相对丰度与标准品离子对的相对丰度相比，误差不 超过表1规定的范围内，则可判断样品中存在对应的被测物。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许误差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 定性时相对离子风度最大允许误差/% ± 10 ± 15 ±20 ±50 7.3.2.2定量测定 根据试样中被测物的含量，选取响应值适宜的标准工作溶液进行分析。标准工作液和待测样液中 农药的响应值均应在仪器线性响应范围内。如果含量超过标准曲线范围，应稀释到合适浓度后分析。 在上述仪器条件下，12种拟除虫菊酯类保留时间参见附录B表B.1，标准溶液的多反应监测色谱图参见 附录C中图C.1。 7.3 空白实验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 8结果计算 用色谱数据处理机或按式（1)计算试样中待测农药的残留量，计算结果需扣除空白。 ...(1 ) 0001xu 式中： X一一试样中被测物含量，单位为毫克每千克（mg/kg）： 一一标准工作液中被测物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V样液最终定容体积，单位为毫升（mL)； 一试样质量，单位为克（g）。 9 测定低限 本方法中12种拟除虫菊酯农药的测定低限均为0.01mg/kg。 10回收率及精密度 食用动物尿液和血液中12种拟除虫菊酯类农药的添加水平及回收率数据及精密度参见附录D中 的表D.1。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均数值的20%。 3 SN/T4813—2017 附录A （规范性附录） 标准物质的基本信息 12种拟除虫菊酯农药标准物质的基本信息见表A.1。 表 A.1 12种拟除虫菊酯农药标准物质的基本信息 相对 化合物 子 英文名称 CAS编号 分子式 结构式 分子 名称 质量 七氟 Tefluthrin 7953832-2 Ci H, CIF, Oz 418.73 1 菊酯 HC H,c C CF H;C 丙烯 Allethrin 58479-2 Cig H2e O, 2 302.41 菊酯 HC HC CHs 氟丙 Acrinathrin 10100706-1 Ces Hz Fe NOs 3 541.44 菊酯 FaC 联苯 FC Bifenthrin 82657-04-3 C H22 CIF, O2 422.87 4 菊酯 CN 氟氯氰 Cyfluthrin 6835937-5CaaHμCl,F,NO, 434.29 菊酯 Cypermethrin52315-07-8 C2 His Ch2 NO; 6 416.30 菊酯 溴氰 Deltamethrin52820-00-5 7 C22 Hs Br NOs 505.20 菊酯 SN/T4813-2017 表A.1（续） 相对 化合物 英文名称 CAS编号 分子式 结构式 分子 号 名称 质量 HsC H,C 氯菊酯 Permethrin 52645-53-1 Cz H2e Clz O3 391.29 醚菊酯 Etofenprox 80844-071 C2s H2 O3 376.49 9 甲氰 10 Fenproathrin 64257847 C22 H2s NO: 349.43 菊酯 氰戊 11 FenValerate 51630581 Czs H22 CINO3 419.90 菊酯 氟胺氰 Fluvalinate 102851-06-9|CH2CIF,NzO 502.91 12 菊酯