ICS11.120.01 CCSC00 14 山西省地方标准 DB14/T3468—2025 制药企业质量控制微生物实验室消毒灭菌 技术要求 2025-07-10发布 2025-10-10实施 山西省市场监督管理局  发布DB14/T3468—2025 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4基本要求............................................................................1 5消毒................................................................................2 6灭菌................................................................................2 7含菌溢撒物处理......................................................................3 8记录................................................................................3 附录A（资料性）微生物实验室常用消毒剂................................................4 附录B（资料性）微生物实验室常用消毒灭菌方法..........................................5 参考文献...............................................................................7DB14/T3468—2025 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由山西省药品监督管理局提出、组织实施和监督实施。 山西省市场监督管理局对本文件的组织实施情况进行监督检查。 本文件由山西省药品质量管理标准化技术委员会（SXS/TC32）归口。 本文件起草单位：山西省检验检测中心（山西省标准计量技术研究院）、山西锦烁生物医药科技有 限公司。 本文件主要起草人：曲萍、张倩、刘建军、崔小芳、张璇、甘雨鑫、成晓英、李鹏飞、田小鹏、雷 岚芬、武瑞杰、邓自新、罗晋萍、王春芳。 DB14/T3468—2025 1制药企业质量控制微生物实验室消毒灭菌技术要求 1范围 本文件规定了制药企业微生物实验室的环境、仪器设备、实验器皿、培养基、个人防护用品及污染 废弃物等的消毒灭菌要求。 本文件适用于制药企业微生物实验室的消毒灭菌。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 中华人民共和国药典 药品生产质量管理规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 消毒 用物理或化学方法杀灭或清除物体表面或空气中的微生物。 3.2 消毒剂 应用在物体表面或空气中杀灭或清除微生物的化学试剂。 3.3 灭菌 用物理或化学方法将物品中活的微生物杀灭或除去，使其残存活微生物的概率下降至预期的无菌保 证水平。 3.4 灭菌剂 杀灭或除去物品中活的微生物使其达到无菌要求的化学试剂。 4基本要求 4.1微生物检验应在符合《中华人民共和国药典》要求的环境中进行。微生物实验室的布局应充分考 虑实验设备安装、良好微生物实验室操作规范和实验室安全的要求。 4.2微生物实验室应包括洁净区和生物安全控制区，生物安全控制区应配备满足要求的生物安全柜。 洁净区按照《中华人民共和国药典》要求进行日常监测和定期监测。洁净区的空气过滤系统应定期维护 和更换，紫外线灯应根据紫外线强度检测结果或其使用寿命参数及时更换灯管，做好相关记录。 DB14/T3468—2025 24.3微生物实验室应对消毒灭菌程序进行验证并制定标准操作规程，常用消毒剂和消毒灭菌方法见附 录A和附录B。微生物实验室应定期监测消毒灭菌效果。 4.4微生物实验室配置的仪器设备应能满足微生物检验工作的需要。关键仪器设备应定期进行检定校 准；高压蒸汽灭菌器按国家有关规定管理并定期检验，阳性高压蒸汽灭菌器应独立配备；仪器设备脱离 实验室或检修后，恢复使用前应重新确认其性能符合要求。 4.5关键仪器设备的使用和日常监控应有记录。应对培养箱、冰箱、超低温冰箱、高压蒸汽灭菌器的 关键参数(如温度、压力）进行连续观测和记录；应定期对超净工作台、生物安全柜进行监测。 4.6应定期对仪器设备进行维护和性能验证，并记录。容易污染微生物的仪器设备应定期清洁和消毒； 超净工作台单次使用最高时长应经过验证；灭菌设备应定期使用生物指示剂检查灭菌效果，指示剂放在 不易达到灭菌的部位。 4.7从事微生物检验工作的人员（以下统称检验人员）应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 检验人员应经过相关培训，培训内容包括实验技术、仪器操作、质量管理、生物安全和卫生等。 4.8非简单压力容器操作人员应持有特种设备作业人员证书。 4.9应对检验人员进行健康管理，并建立健康档案。检验人员上岗前应进行健康检查且以后每年至少 进行一次健康检查。 4.10微生物实验室仅限经批准的人员进入。任何进入洁净区的人员均应按照规定更衣，无菌衣的选材、 式样及穿戴方式应符合《药品生产质量管理规范》的要求。进入洁净区时不应化妆和佩带饰物。 5消毒 5.1超净工作台 5.1.1实验开始前，开启超净工作台紫外线灯和风机进行自净。 5.1.2实验结束后，用适宜消毒剂擦拭台面及可能污染的死角，紫外线照射。 5.2洁净区 5.2.1实验开始前，开启空气净化系统进行自净。 5.2.2实验结束后，用适宜消毒剂擦拭台面及地面，保持空气净化系统继续运行进行自净。 5.2.3洁净区应定期进行全面消毒。 5.2.4如果洁净区被污染或浮游菌、沉降菌、表面微生物的监测结果超标，应立即进行全面消毒。 5.3培养箱 5.3.1应定期对培养箱进行消毒，消毒周期视使用频率而定。 5.3.2应选用对培养箱内壁无腐蚀且易挥发无残留的消毒剂。 5.3.3使用适宜消毒剂全面擦拭培养箱内壁，通风使消毒剂挥散。 5.3.4配有紫外线灯或具有高温消毒功能的培养箱，可定期进行紫外线消毒或高温消毒。 5.4样品 用适宜消毒剂对直接接触样品的包装表面进行消毒。 6灭菌DB14/T3468—2025 36.1无菌检查用隔离系统 6.1.1无菌检查用隔离系统（以下统称隔离系统）采用汽相灭菌法对内部环境进行灭菌。 6.1.2隔离系统每次实验前后应进行清洁。清洁剂应具有良好清洁效果，不腐蚀材质，残留对无菌检 查无不利影响。清洁工具采用无尘材料。清洁程度以达到肉眼可见的干净、干燥为宜。 6.1.3灭菌程序开始前，应对进入隔离系统舱内的样品及其他物品表面进行预清洁。 6.1.4灭菌剂通过有效过滤后进入隔离系统内，灭菌结束后对灭菌剂进行排空，监测舱内灭菌剂的浓 度，其残留量不应影响无菌检查的结果。 6.2实验物品 6.2.1实验物品常用的灭菌方法为湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法和过滤除菌法，已灭菌物品 应有明显的灭菌标识。 6.2.2培养基、试剂、试液等均应采用经验证的配制和灭菌程序灭菌。热不稳定组分应过滤除菌后加 入已灭菌的培养基中，液体培养基冷却至室温后加入，固体培养基冷却至45℃～50℃时加入，边加边 振摇使混合均匀。 6.2.3培养基配制后应及时灭菌。培养基体积不宜超过容器容积的2/3。培养基灭菌完成后及时移出灭 菌器，凉至室温后在已验证的条件下贮藏，遵循先入先出原则。 6.2.4反复使用的无菌衣、口罩、帽子等应定期清洗、灭菌并烘干。 6.2.5玻璃器皿、陶瓷器皿可采用湿热灭菌法或干热灭菌法，湿热灭菌后应烘干。带有胶塞的玻璃器 皿采用湿热灭菌法。 6.2.6金属接种环（针）灼烧灭菌后应先冷却再接种。在生物安全柜内应使用专用灭菌设备（如红外 线接种环灭菌器）对金属接种环（针）进行灭菌，或使用市售已灭菌的一次性接种环（针）。 6.2.7菌种及带有工作菌液的物品均应进行高压蒸汽灭菌（121℃，30min）。 7含菌溢撒物处理 7.1含菌液体溢撒时，应立即覆盖含适宜消毒剂的纱布（或纸巾等），作用经验证的时间后，小心将 其收集到专用消毒袋（如一次性医疗废物包装袋）中，破碎的玻璃或锐器夹至耐扎容器中，用含消毒剂 的新纱布（或纸巾等）将溢撒区域擦净，最后将收集物高压蒸汽灭菌（121℃，30min）处理。 7.2工作衣帽等受到菌液污染时，应马上脱去，放入专用消毒袋中系紧