ICS 65.020.20 B 21 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 1316—2016 同色兜兰无菌播种繁育技术规程 Technical regulations for aseptic seeding and breeding of Paphiopedilum concolor 2016 - 05 - 01 发布 2016 - 06 - 01 实施 广西壮族自治区质量技术监督局 发布 DB45/T 1316 — 2016 I 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语与定义 ........................................................................ 1 4 无菌播种繁育技术 .................................................................. 1 5 组培苗移栽 ........................................................................ 2 6 栽培管理 .......................................................................... 3 附录 A（规范性附录） 培养基配方 ...................................................... 4 附录 B（规范性附录） 病虫害防治 ...................................................... 5 DB45/T 1316 — 2016 III 前 言 本标准按照GB/T 1.1 — 2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。 本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院花卉研究所。 本标准主要起草人： 李秀玲、 卜朝阳、 周主贵、 宋倩、 黄凤玲、 黄昌艳、 卢家仕、 邓杰玲、 李春牛、 周锦业、闫海霞。 DB45/T 1316 —2016 1 同色兜兰无菌播种繁育技术规程 1 范围 本标准规定了同色兜兰无菌播种繁育技术的术语与定义、 无菌播种繁育技术、 组培苗移栽、 栽培 管理。 本标准适用于同色兜兰无菌播种繁育技术。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4285 农药安全使用标准 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 原球茎 protocorm 种子萌发过程中的一种形态学结构： 种子的幼胚吸水膨胀， 中部的胚细胞分裂增殖， 突破合点端种 皮形成球形或椭球形。 3.2 诱导培养 induction culture 外植体在无菌条件培养以期产生不定芽、愈伤组织、原球茎，从而建立无菌培养物的培养阶段。 4 无菌播种繁育技术 4.1 母株的选择 选择品种纯正、植物学性状一致、农艺性状优良、生长健壮、无病虫害的植株。 4.2 蒴果的获得及表面灭菌 4.2.1 蒴果采收 人工授粉210 d～240 d，在蒴果八成熟未开裂时采收。 DB45/T 1316 — 2016 2 4.2.2 蒴果灭菌 参照NY/T 2306规定，将蒴果用自来水洗净，中性洗涤剂冲洗，酒精搽拭， 流 水冲洗15 min ，在 超 净工 作台上 用 7 0 % ～ 7 5 % 酒精 消毒 30 s ， 接着 用0.1 %升汞浸泡 15 min ，无菌水冲洗5 次 ， 放置 在 接 种 盘内 。 4.3 培养基配方 各 阶段培养基配方 见 附录A。 4.4 无菌播种与诱导培养 切 开果 荚 ，将种子 均匀撒 在培养基（ 见 附 录A中 的A . 1 ) ，用 灭 菌过的 胶头滴 管 加入 1 滴 ～2 滴 无 菌水， 摇匀 ， 置 于无菌培养 室 中培养。 培养 室温度 ：2 5 (± 2 ) ℃ ， 光 照 强度 2 400 lx ～3 200 lx ， 光 周 期1 0 h ～12 h ，培养 7 0 d～100 d。 4.5 原球茎继代增殖培养 将原球茎和芽 接 种 到 培养基 （ 见 附录A中的A.2 ) 上进行 培养， 培养 室温度 ：2 5 (± 2 ) ℃ ， 光 照 强度 2 400 lx ～3 200 lx ， 光 周期10 h ～12 h ，培养40 d～50 d，增殖 代数 10 代 以 内 。 4.6 生根壮苗培养 将 具 有3 片 ～4 片叶 、 叶 长2.0 cm ～3.0 cm 的 小 苗 转入 培养基（ 见 附录A中的A.3 )上进行 培养。培养 室温度 ：25 (± 2 ) ℃ ， 光 照 强度 2 400 lx ～3 200 lx ，培养周期30 d～40 d。 4.7 炼苗 小 苗 根 长2.5 cm ～3.5 cm ， 叶片数 4 片 ～5 片 ， 叶 长4.0 cm ～6.0 cm 时， 搬至炼 苗 室内炼 苗。 温度 ： 28 (± 2 ) ℃ ， 光 照 强度 5 000 lx ， 炼 苗 天数 10 d～15 d 后 ，移 至大棚 开 盖炼 苗 7 d。 5 组培苗移栽 5.1 环境条件 温度 ：20 ℃ ～28 ℃ ， 空气湿度 ： 7 0 % ～80 % ， 光 照 强度 ：5 000 lx ～8 000 lx 。 5.2 基质 选 取干 净、 透气 性 好 、 保 水 能力强 、 pH 4.5～6.5 的基 质 （兰 石:树 皮 = 2 : 1）。移栽前 12 h ～24 h 用0 . 2 % ～0.3 %高锰酸钾喷洒 。 5.3 容器 塑料穴盆 54 cm× 28 cm ， 每盆 50 穴 ，或用 口径 1.5 寸白 色 塑料杯 。 5.4 清洗 炼 苗 后 ， 取 出 小 苗，用 清 水洗 去粘 附于苗 上 的培养基，用0.1 % 的 高锰酸钾溶液浸泡 5 min ，在 荫棚 下 晾 15 min 。 5.5 移栽 每穴 （ 杯 ）种植1株～2 株，将 小 苗种植在基 质 中， 轻压根 部， 淋透 定 根 水。