ICS 11.020 CCS C59 团体 标准 T/SZAS 96 —2025 基于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒 1 型基因型耐药检测技术规范 Technical specification for testing of human immunodeficiency virus type 1 genotypic drug resistance based on polymerase gene sequence 2025-08-15发布 2025-09-01实施 深圳市标准化协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/SZAS 96 —2025 I 目次 前 言 ................................ ................................ ................. Ⅱ 引 言 ................................ ................................ ................. Ⅲ 1 范围 ................................ ................................ ................. 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ .......1 3 术语和定义 ................................ ................................ ........... 1 4 缩略语 ................................ ................................ ............... 3 5 样本要求 ................................ ................................ ............. 3 6 核酸提取 ................................ ................................ ............. 3 7 基因扩增 ................................ ................................ ............. 4 8 序列测定 ................................ ................................ ............. 4 9 耐药性分析 ................................ ................................ ........... 5 10 结果解释 ................................ ................................ ............ 5 11 质量控制 ................................ ................................ ............ 5 12 生物安全 ................................ ................................ ............ 6 附录A（资料性） HIV pol基因区常用扩增引物 ................................ ............. 7 附录B（资料性） Sanger序列拼接和编辑方法 ................................ ............. 10 附录C（资料性） 高通量测序数据分析方法 ................................ ................ 11 附录D（资料性） HIV耐药分析数据库 ................................ .................... 12 附录E（资料性） 室内质控品的制备和使用 ................................ ................ 13 参考文献 ................................ ................................ .............. 14 全国团体标准信息平台 T/SZAS 96 —2025 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心提出。 本文件由粤港澳大湾区标准创新联盟归口。 本文件授权粤港澳大湾区标准创新联盟组织伙伴和所有成员单位使用，联盟组织伙伴 需等同采用转 化为自身团体标准，并在全国团体标准信息平台上公开标准基本信息。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件起草单位：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心、 中国人民解放军 军事科学院军 事医学研究院、 中国科学院微生物研究所、中国医科大学附属第一医院、浙江省疾病预防控制中心、北 京市疾病预防控制中心、四川省疾病预防控制中心、上海市疾病预防控制中心、广西壮族自治区疾病预 防控制中心、江苏省疾病预防控制中心、湖南省疾病预防控制中心、广州医科大学附属市八医院、香港 大学艾滋病研究所、澳门仁伯爵综合医院、澳门卫生局公共卫生化验所、深圳华大智造科技股份有限公 司。 本文件主要起草人：邢辉、廖玲洁、李敬云、李林、吴林寰、曹丕、韩晓旭、赵彬、柴程良、张佳 峰、辛若雷、梁姝、袁丹、林怡、王绪琴、梁淑家、庞贤武、徐晓琴、贺健梅、邹潇 白、兰芸、周润宏、 刘利、官建泳、黄江虹、王逸丛、毛宛司、阮玉华、冯毅、郝静静。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SZAS 96 —2025 III 引言 随着抗逆转录病毒治疗 (Antiretroviral Therapy, ART) 的推广，接受 ART治疗的人免疫缺陷病毒 1 型（Human Immunodeficiency Virus type 1, HIV -1）感染者人数不断增加。 HIV-1具有高度的变异性， 在药物压力下易产生耐药基因突变而出现耐药毒株，长期服药难以保持良好的依从性，增加了耐药毒株 产生的风险。 耐药毒株不仅威胁个体治疗， 还可能通过传播削弱公共卫生防控的效果。 因此， 建立准确、 规范的耐药检测技术，是优化治疗方案、遏制耐药毒株扩散的核心环节。基于聚合酶基因序列的基因型 耐药检测是目前主要使用的 HIV耐药检测方法，检测流程包括样本采集及处理、核酸提取纯化、聚合酶基 因片段扩增、测序、序列编辑、耐药突变判读及耐药程度分析 等，操作复杂、影响因素多。为了得到 准 确的检测结果，检测方法、步骤和流程均应规范化和标准化，并采取覆盖检测全过程的质量保证和质量 控制措施。本文件旨在规范基于聚合酶基因序列的 HIV基因型耐药检测及质 量控制方法，以指导相关实 验室获得准确的检测结果，为保障 ART的效果、药物研发及公共卫生政策制定提供可靠依据，助力实现我 国艾滋病预防控制目标 。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/SZAS 96 —2025 1 基于聚合酶基因序列的人免疫缺陷病毒 1型 基因型耐药检测技术规范 1 范围 本文件规定了基于聚合酶基因序列的 HIV-1基因型耐药检测的技术要求，包括样本采集及处理、核 酸提取纯化、聚合酶基因片段扩增、测序、序列编辑、耐药突变判读及耐药程度分析、质量控制以及生 物安全的要求。 本文件适用于全国各级各类开展基于聚合酶基因序列的 HIV-1基因型耐药检测的实验室。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 34265 Sanger 法测序技术指南 GB/T 30989 高通量基因测序技术规程 WS 293 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 人免疫缺陷病毒 human immunodeficiency virus ，HIV 导致艾滋病的病原体 。 [来源：WS 293-2019，2.1] HIV耐药 HIV drug resistance 是HIV对抗病毒药物的敏感性降低或消失，导致药物疗效明显下降或失效的现象。 HIV耐药基因突变 HIV dr