ICS59.140.30 分类号：Y46 备案号：32267-2011 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4200—2011 皮革和毛皮化学试验戊二醛含量的测定 Leatherandfur--Chemicaltests -Determinationoffreeglutaraldehydecontent 2011-06-15发布 2011-10-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T42002011 前言 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）归口。 本标准起草单位：国家皮革质量监督检验中心（浙江）、武汉市天马解放化工有限公司、海宁市和 平化工有限公司、桐乡市鑫诺皮草有限公司。 本标准主要起草人：马贺伟、陈望年、张慧敏、范朝云、董荣华。 QB/T4200-2011 皮革和毛皮 化学试验戊二醛含量的测定 1范围 本标准规定了皮革、毛皮中游离水解的戊二醛含量的测定方法。 本标准适用于各种皮革、毛皮。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和实验方法（GB/T66822008，ISO3696:1987，MOD） QB/T1266 毛皮成品物理性能测试用试片的空气调节 QB/T1267 毛皮成品样块部位和标志 QB/T1272 毛皮成品化学分析试样的制备及化学分析通则 QB/T2706 皮革 化学、物理、机械和色牢度试验取样部位（QB/T2706一2005，ISO2418:2002， MOD) QB/T2707 皮革 物理和机械试验试样的准备和调节（QB/T2707-2005，ISO2419:2002，MOD） QB/T2716 皮革 化学试验样品的准备（QB/T2716-2005，ISO4044:1977，MOD） 3原理 在40℃下，利用十二烷基磺酸钠萃取试样，萃取液同二硝基苯肼混合后，醛、酮与二硝基苯肼反应 产生各种腺，通过液相色谱将反应物分开，并对萃取液中的戊二醛进行定量测定。 4试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的三级水。 4.1戊二醛原液，配制和标定过程见附录A。 4.2磷酸，85%。 4.3二硝基苯肼（DNPH）溶液，0.3%，由0.3g的DNPH溶于50mL磷酸（4.2）中配制（DNPH从 25%的乙睛水溶液中重结晶）。 4.4十二烷基磺酸钠溶液，0.1%，由1.0g十二烷基磺酸钠溶于1000mL水中配制（配制时，应加热煮 沸至溶液透明，冷却至室温待用）。 4.5乙腈，色谱纯。 5仪器和设备 5.1 带有玻璃纤维的过滤器，GF8（或玻璃过滤器G3，直径70mm～100mm）。 5.2水浴振荡器，能控制温度在（40士0.5）℃。 5.3液相色谱系统（HPLC)，具有紫外检测器（UV），360nm。 5.4聚酰胺滤膜，0.45μm。 5.5分析天平，精确到0.1mg。 QB/T4200-2011 6程序 6.1取样 6.1.1标准部位取样 a）皮革：按QB/T2706的规定取样。 b）毛皮：按QB/T1267的规定取样。 6.1.2非标准部位取样 如果不能从标准部位取样（如直接从鞋、服装上取样），应在可利用面积内的任意部位取样，样品 应具有代表性，并在试验报告中详细记录取样情况。 6.2试样的制备 6.2.1皮革：按QB/T2716的规定制备试样。 6.2.2毛皮：按QB/T1272的规定制备试样，取样过程应避免毛被损失，保持毛被完好。 6.2.3剪碎的试样先进行空气调节，皮革按QB/T2707规定执行，毛皮按QB/T1266规定执行，再进 行称重。 6.3萃取 称取试样2g（精确至0.1mg），装入100mL锥形瓶中，加入50mL已预热到40℃的十二烷基磺酸钠溶 液（4.4），盖紧塞子，在（40土0.5）℃的水浴（5.2）中轻轻振荡处理（60土2）min。温热的萃取液立 即通过真空玻璃纤维过滤器（5.1）过滤到锥形瓶中，将锥形瓶密闭，滤液冷却至室温（18℃～25℃）。 试样/溶液的比例不能改变，萃取和分析应在当日完成。 6.4与二硝基苯肼（DNPH）反应 取5.0mL过滤后的萃取液、4.0mL乙睛（4.5）、0.5mL的DNPH（4.3）移入到10mL的容量瓶中，用 蒸馏水稀释到刻度，充分摇匀，室温下（18℃～25℃）放置90min后用滤膜（5.4）过滤，然后用液相色 谱测定。如果样液浓度超标，应调整试样的称量质量。 注：反应物随时间的延长而变化，室温下反应物放置时间以60min～180min为宜。 6.5色谱（HPLC）条件（推荐） 流速 1.0mL/min 流动相 DikmaCi85mmX250mmX4.6mm 紫外检测波长 360nm 柱温／ 25℃ 进样体积 10μL 戊二醛的液相色谱图行为表现为两个吸收峰，以峰强较高的吸收峰作为计算依据（见附录B）。 6.6戊二醛标准曲线制作 取1.0mL已准确标定的戊二醛原液（4.1），移入装有100mL蒸馏水的500mL容量瓶中，振荡摇匀， 用蒸馏水稀释至刻度（浓度接近于10μg/mL），该溶液为戊二醛标准溶液。 取6个10mL容量瓶，各加入4mL乙睛（4.5），然后分别加入0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、 5.0mL的戊二醛标准溶液，立即加入0.5mL的DNPH溶液（4.3），摇匀，用蒸馏水稀释至刻度，放置90min， 用滤膜（5.4）过滤后进行色谱测定，根据戊二醛的峰面积与浓度的对应关系，绘制标准曲线。 6.7回收率的测定 分别取2.5mL过滤后的萃取液，移入到两个10mL容量瓶中，其中一个容量瓶中加入适量的戊二醛标 准溶液，使加入的戊三醛量与样品中的戊二醛含量接近。每个容量瓶中加入4.0mL乙腈（4.5）、0.5mL 的DNPH（4.3），用蒸馅水稀释至刻度，充分摇匀，室温下（18℃～25℃）放置90min后用滤膜（5.4） 过滤，然后用液相色谱测定。 2 QB/T4200-2011 添加了戊二醛标准溶液的样液中戊二醛含量记作cs2，未添加戊二醛标准溶液的样液中的戊二醛含 量记作cs。 7结果的表述 7.1 戊二醛含量的计算 按式（1）计算样品中的戊二醛含量cF： 1x5=5 (1) Mw 式中： 样品中游离水解的戊二醛含量，单位为毫克每千克（mg/kg）： 从标准曲线中查得的戊二醛含量，单位为微克每毫升（μg/mL）： Cs 一萃取液体积，单位为毫升（mL）： - Mw—试样质量，单位为克（g)。 7.2 回收率的计算 按式（2）计算回收率： _ (cs2 -cs)×100 RR= (2) 式中！ RR- 回收率，%； Cs2~ 添加了戊二醛标准溶液的样液中的戊二醛含量，单位为微克每毫升（ug/mL）： 未添加戊二醛标准溶液的样液中的戊二醛含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； Cs 添加的标准溶液中戊二醛含量，单位为微克每毫升（μug/mL）。 CFAI 7.3结果表示 样品中游离水解的戊二醛含量以mg/kg表示，精确至0.1mg/kg 两次平行试验结果的差值与平均值之比应不大于10%，以两次平行试验结果的算术平均值作为结 果。 8试验报告 试验报告应包含以下内容： a）本标准编号： b）样品名称、编号、类型、厂家或商标： c）试验样品的说明和包装方法； d）应用的分析方法； e）从样品中萃取出的游离水解的戊二醛含量（mg/kg）： f）试验中出现的异常现象； g）实测方法与本标准的不同之处： h）试验人员、日期。 3 QB/T4200-2011 附录A （规范性附录） 戊二醛原液的配制和标定 A.1试剂 除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的三级水。 A.1.1戊二醛溶液，浓度约25%。 A.1.2亚硫酸氢钠溶液，0.2mol/L。 A.1.3碘。 A.1.4碘化钾。 A.1.5硫代硫酸钠标准溶液，0.1mol/L。 A.1.61%淀粉溶液。 A.1.7 碘标准溶液（12），0.1mol/L。称取13g碘（A.1.3）及35g碘化钾（A.1.4），溶于100mL水中，移 入1000mL容量瓶中，以水稀释至刻度、混匀，用硫代硫酸钠标准溶液（A.1.5）进行标定后，保存于棕 色具塞瓶中。 A.2 戊二醛原液的制备 A.2.1移取5.0mL戊二醛溶液（A.1.1）到装有10mL蒸馏水的100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度， 该溶液为戊二醛原液。 A.2.2从戊二醛原液中移取1mL溶液到碘量瓶中，准确加入10mL亚硫酸氢钠溶液（A.1.2），在18℃～2 6℃的环境中放置10min，然后加入2mL淀粉溶液（A.1.6），用碘标准溶液（A.1.7）滴定，至出现蓝色为 终点。平行测定三次。 用同样的方式对空白溶液进行滴定。 A.3戊二醛原液浓度的计算 按式（A.1）计算戊二醛原液的浓度： =VD (A.1) 2V 式中： 戊二醛原液的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； CGA Vo——用于滴定空白溶液的碘标准溶液体积，单位为毫升（mL)； 一用于滴定样品溶液的碘标准溶液体积，单位为毫升（mL）； MGA" 一戊二醛相对分子质量，100.1g/mol； 碘标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）： 15 滴定时消耗的戊二醛原液体积，单位为毫升（mL）。 V QB/T4200-2011 附录B （资料性附录） 戊二醛-DNPH衍生物的HPLC图谱特征 B.1