ICS 67.040 QB 分类号：X60 备案号：31101-2011 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T 4158-2010 营养强化剂5’-尿苷酸二钠 Food additive--Disodium 5' -Uridylate 2010-12-29发布 2011-04-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T 4158-2010 前 本标准由中国轻工联合会提出。 本标准由全国乳制品标准化技术委员会提出并归口。 本标准由南通秋之友生物科技有限公司、黑龙江省乳品工业技术开发中心负责起草。 本标准主要起草人：邱蔚然、曹静、孙常雁、王芸。 QB/T4158-2010 营养强化剂5-尿苷酸二钠 1范围 本标准规定了营养强化剂5-尿苷酸二钠的要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮 存、保质期。 本标准适用于以酵母核糖核酸（RNA）为原料，经5'-磷酸二酯酶降解而制得的5'-尿苷酸二钠。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T603化学试剂实验方法中所用制剂及制品的制备 GB/T4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定 GB/T4789.3 食品卫生微生物学检验大肠菌群测定 GB/T4789.4 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验 GB/T4789.5 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验 GB/T4789.10 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB/T4789.15 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数 GB/T 5009.3 食品中水分的测定 GB/T 5009.74 食品添加剂中重金属限量试验 GB/T5009.76 食品添加剂中砷的测定方法 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1632.1奶粉中阪崎肠杆菌检验方法第1部分：分离与计数方法 GB/T6040一2002红外光谱分析方法通则 卫生部[2002]第26号令《食品添加剂卫生管理办法》 3化学名称、英文缩写、结构式、分子式、分子量 化学名称：5'-尿苷酸二钠（5-UMP,Na2） 结构式： 0 0 NaO- ONa HO HO QB/T4158-2010 分子式：C,HN2O,PNa2xH20 相对分子质量（无水）：368.15（按1997年国际相对原子质量） 要求 4.1 原料要求 应符合相应国家标准或行业标准的规定。 4.2 感官指标 产品为白色结晶或结晶性粉末，无特殊气味，易溶于水，微溶于乙醇。 理化卫生指标 4.3 理化卫生指标应符合表1规定。 表1理化卫生指标 项 目 指 标 鉴别 与标准品红外光谱一致 含量（CHNzO,PNa2，以干基计）/% 98.0 T燥失重/% 25.0 7 透光率（5%水溶液）/% 95.0 pH（5%水溶液） 7.0~8.5 A250/A260 0.71~0.77 紫外吸光度比值 A280/A260 0.36~0.42 砷（以As计）/（mg/kg） 2 重金属（以Pb计）／（mg/kg） ≤ 10 4.4 微生物指标 微生物指标应符合表2的规定。 表2 微生物指标 项 月 指 标 菌落总数/（cfu/g） 1000 大肠菌群/（MPN/100g） 30 霉菌和酵母菌/（cfu/g） 50 致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠 不得检出 杆菌） 试验方法 5 本试验方法中所用的水，应符合GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法三级以.上的水。 本试验方法中所用的试剂，均指分析纯（AR）。若有特殊要求须另作明确规定。 本试验所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。 5.1感官指标 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽，嗅其味。 5.2 鉴别 2 QB/T4158-2010 按GB/T6040一2002规定的方法进行。 5.3含量 5.3.1仪器 5.3.1.1高效液相色谱仪（配有紫外检测器和柱恒温系统，检测波长254nm）。 5.3.1.2流动相真空抽滤脱气装置及0.2um、0.45um微孔膜。 5.3.1.3色谱柱：HypersilODS25um（4.6×250mm）或同等分析效果的色谱柱。 5.3.1.4分析天平：感量为0.1mg。 5.3.1.5微量进样器：50uL。 5.3.2试剂和溶液 5.3.2.1乙酸铵溶液（0.025mol/L，pH5.5）：称取1.93g乙酸铵溶于1.0L水中，用2mol/L的冰醋酸 调至pH为5.5。 5.3.2.2水：二次蒸馏水或超纯水。 5.3.2.35'-尿苷酸二钠标准溶液：精密称取标准试剂5＇-尿苷酸钠100.0mg，用超纯水溶解并定 容至50mL容量瓶中，混合均匀后，准确吸取1.0mL，用乙酸铵溶液定容到50mL容量瓶中，摇匀，制 成每毫升约含40ug的溶液。 5.3.3分析步骤 5.3.3.1样品溶液的制备 称取样品100.0mg，按5'-尿苷酸二钠标准溶液的配制方法配制。 5.3.3.2样品测定 开机器预热，并装.上色谱柱，调柱温为（25土0.5）℃（柱温箱的精确度为土0.1℃），对色谱柱按要 求进行处理。正式测试前，将所用流动相乙酸铵溶液（5.3.2.1），流速0.8mL/min，输入系统0.5h以上， 待基线稳定后即可进样，进样为20μL。 将尿苷酸二钠标准溶液和制备好的样品分别进样。根据标准品的保留时间，确定样品尿苷酸二钠的 色谱峰。根据样品的峰面积，以外标法计算5'-尿苷酸二钠的百分含量。 5.3.3.3结果计算 样品中的尿苷酸二钠的含量按式（1）计算，数值以%表示。 ×100 (1) A, ×mx(1-r) 式中： Xi 样品中5’-尿苷酸二钠的百分含量（以下物质计），%： 样品中5＇-尿苷酸二钠的峰面积； Ai 标准品5＇-尿苷酸二钠的质量，单位为克（g）： ms 标准品5'-尿苷酸二钠的干燥失重，%； 标准品中5°-尿苷酸二钠的峰面积； As 样品5’-尿苷酸二钠的质量，单位为克（g）； m 样品5'-尿苷酸二钠的干燥失重，%。 ri 5.3.4允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，应不超过算术平均值的1%。 5.4干燥失重 按GB/T5009.3规定方法进行。 5.5透光率 5.5.1仪器 QB/T4158-2010 分光光度计。 5.5.2分析步骤 称取样品1.0g，溶于20mL水中，摇匀。将样品液置于1cm比色血中，以水作空白对照，于430nm 下测定样液的透光率，记录数据。 5.5.3允许误差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，应不超过算术平均值的0.5%。 5.6pH测定 5.6.1仪器 酸度计。 5.6.2分析步骤 称取样品1.0g，加水20mL溶解，用酸度计测定溶液的pH。 5.6.3允许误差 同一样品两次测定值之差应不超过0.2。 5.7紫外吸光度的比值 5.7.1仪器 紫外分光光度计。 5.7.2试剂和溶液 盐酸溶液（0.01mol/L）：按GB/T603配制。 5.7.3分析步骤 按5.3.2.3中（a液）配制方法配制样品溶液，吸取样品溶液1.0mL，用盐酸溶液（5.8.2）定容至 100mL，混匀，然后以盐酸溶液作空白，于紫外分光光度计分别测定250nm、260m、280nm处的吸光 度。 5.7.4计算 5.7.4.1吸光度250mm和260mm处的比值按式（2）计算： X, = A2s0o (2) Az60 式中： -250mm和260mm处紫外吸光度比值； Xi- A250 250nm处样品的紫外吸光度； A260 260nm处样品的紫外吸光度。 5.7.4.2 吸光度280nm和260nm处的比值按式（3）计算： (3) A260 式中： 280mm和260nm处紫外吸光度比值； X2 280nm处样品的紫外吸光度； A280 260nm处样品的紫外吸光度。 A260 5.7.5允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，应不超过算术平均值的2%。 5.8砷 按GB/T5009.76规定方法测定。 5.9重金属 4 QB/T4158-2010 按GB/T5009.74规定方法测定。 5.10菌落总数 按GB/T4789.2规定方法测定。 5.11大肠菌群 按GB/T4789.3规定方法测定。 5.12酵母菌和霉菌 按GB/T4789.15规定方法测定。 5.13致病菌 按GB/T4789.4、GB/T4789.5、GB/T4789.10、SN/T1632.1规定方法测定。 检验规则 6.1 组批 在同一一时间生产、质量均匀的产品为一批。 6.2取样 样本的抽取见表3。 表3抽样表 批量范围/（桶/包） 样本大小/（桶/包） ≤25 3 26~150 8 151~500 13 ≥500 20 将取样钎插入每个样本5～6处，抽取不少于100g样品，每批抽取总样品量不少于1kg。将抽取的 样品迅速混匀，用四分法缩分后，分别装入三个干燥、洁净的容器中，贴上标签。一份进行理化分析， 份进行微生物检验，另一份留样置阴凉、干燥、密封的环境中贮存备查。 6.3出厂检验 6.3.1产品出厂前，按本标准规定逐批进行检验。 6.3.2出厂检验项目：感官指标、含量、干燥失重、透光率、PH、紫外吸光度比值、菌落总数、大肠 菌群、霉菌和酵母菌。 6.4型式检验 6.4.1型式检验项目为本标准4.2、4.3、4.4的全部项目。 6.4.2产品在一般情况下，型式检验每年一次，遇有下列情况之一时亦需检验。 一产品连续