以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5764 —2025 动物病原核酸标准样品制备技术规范 Protocol of the preparation for reference material of animal pathogen nucleic acid 2025 -07-25发布 2026 -02-01 实施ICS 11.220 CCS B 41 中华人民共和国海关总署 发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准 SN/T 5764—2025I前 言 本文件按照 GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中国海关科学技术研究中心、中华人民共和国北京海关。本文件主要起草人：乔彩霞、高志强、蒲静、刘巍、韩晶、韩玥、刘艳华、张伟。以正式出版文本为准以正式出版文本为准III SN/T 5764—2025引 言 目前，在动物疫病检测中，核酸检测方法得到了广泛应用，国内外制定了一系列动物病原核酸 检测方法的标准，并相继研制了配套使用的实物标准样品，以实现核酸检测方法的标准化应用。根据 制备方法的不同，核酸检测用标准样品主要分为 3 大类，包括病原全基因组 DNA 或 RNA、质粒 DNA或体外转录 RNA、内含特定基因的重组 DNA 病毒或装甲 RNA 标准样品。但由于国内缺少动物病原核酸检测用标准样品研制的技术规范，实际工作中缺乏标准化方法及研制流程的指导，亟需制定相应的技术指南。 本文件参照 GB/T 15000.7《标准样品工作导则 第 7 部分：标准样品生产者能力的通用要求》 、 CNAS-CL04《标准物质 / 标准样品生产者能力认可准则》和 CNAS-RL07《标准物质 / 标准样品生产 者认可规则》 ，并结合我国生物安全的要求，以及动物检疫定性检测的实际需要起草制定，以指导和规范动物病原核酸检测用标准样品的研制，明确其制备的技术流程和要求。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 5764—2025动物病原核酸标准样品制备技术规范 1 范围 本文件规定了动物病原核酸标准样品生产者能力总体要求、标准样品的制备、均匀性检验、稳 定性检验、定值、包装与运输、保存和管理要求。 本文件适用于标准样品生产者制备动物病原（包括病毒、细菌和寄生虫等病原微生物）核酸标准样品。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T 15000.2 标准样品工作导则 第 2 部分：常用术语及定义 GB/T 15000.3 标准样品工作导则 第 3 部分：标准样品 定值和均匀性与稳定性评估 GB/T 15000.4 标准样品工作导则 第 4 部分：证书、标签和附带文件的内容 GB/T 15000.7 标准样品工作导则 第 7 部分：标准样品生产者能力的通用要求 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 JJF 1343 标准物质的定值及均匀性、稳定性评估 3 术语和定义 GB/T 15000.2 界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 标准样品 reference material 具有一种或多种规定特性足够均匀且稳定的材料，已被确定其符合测量过程的预期用途。 ［来源：GB/T 15000.2— 2019，2.1.1］ 3.2 候选标准样品 candidate reference material 拟作为标准样品生产的材料。 ［来源：GB/T 15000.2— 2019，2.1.3］ 3.3 动物病原核酸标准样品 nucleic acid reference material for animal pathogen 可用于动物病原核酸检测质量控制的核酸样品，包括动物病原基因组 DNA 标准样品、动物病原 基因质粒 DNA 标准样品、动物病原基因重组 DNA 病毒标准样品、动物病原基因组 RNA 标准样品、动物病原基因体外转录 RNA 标准样品、动物病原基因装甲 RNA 标准样品。以正式出版文本为准2 SN/T 5764—20253.4 运输稳定性 transportation stability 在规定运输条件下标准样品送达用户时间内特性的稳定性。 注：运输稳定性通常被称为“短期稳定性” 。 ［来源：GB/T 15000.2— 2019，2.1.16 有修改］ 3.5 长期稳定性 long-term stability 在规定贮存条件下长时间内标准样品特性的稳定性。 ［来源：GB/T 15000.2— 2019，2.1.17 有修改］ 4 总体要求 4.1 标准样品生产者应符合 GB/T 15000.7 规定的标准样品生产者能力的通用要求，应具有明确的法 律地位，建立完备的质量管理体系。 4.2 标准样品生产者应具备核酸标准样品生产所必需的工作场所、仪器设备、专业人员及管理等 条件。4.3 从事动物病原核酸标准样品生产的场所，应符合 GB 19489 的规定，应依据病原微生物的危害级 别进行安全控制，防止病原微生物扩散，避免在样品制备过程中对环境造成影响。 5 标准样品的制备 5.1 制备原则 5.1.1 应根据标准样品的预期用途和病原体的特点，选择合适的原材料、制备方法和工艺程序。 5.1.2 对目标特性量不易均匀的候选标准样品，在制备过程中应采取必要的均匀措施，并进行均匀 性检验。 5.1.3 对目标特性量存在不稳定因素的候选标准样品，在制备过程中应采取必要的稳定性措施，并 进行稳定性检验。5.1.4 生产和存储核酸标准样品的器具应确保不存在影响特性量值的因子，如吸附性、渗透性、水 溶性等。5.1.5 核酸标准样品的分装，应在特定条件下进行，避免生物、化学和物理方面的污染，同一批次 所有分装单元应在同一时间完成。 5.2 动物病原基因组 DNA 标准样品制备 5.2.1 工艺流程 动物病原基因组 DNA 标准样品制备工艺流程见图 1。 5.2.2 动物病原的选择和鉴定 动物病原可从权威实验室获得，也可由标准样品生产者从临床样品中分离获得，并选用有效的 方法进行鉴定确认，必要时可由多家权威实验室进行联合验证；标准样品生产者可通过扩繁或继代培 养增殖病原体，满足标准样品批量生产的需要，但应重新验证其目标特性值。增殖培养后获得的病原体纯化后用于基因组的提取。