ICS 67.080.10 QB 分类号：X50 备案号：52204-2015 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4852-2015 起泡葡萄酒中二氧化碳的稳定碳同位素 比值（13℃/12℃）测定方法 稳定同位素比值质谱法 Determination of the carbon isotope ratio (13C/2C) of CO2 in sparkling wines-Method using isotope ratio mass spectrometry 2015-10-10发布 2016-03-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4852-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国食品发酵标准化中心归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、中国食品有限公司、中华人民共和国黄埔出入境检验 检疫局、北京龙徽酿酒有限公司。 本标准主要起草人：钟其顶、武竹英、于庆泉、田玲、梁学军。 本准备为首次发布。 QB/T4852-2015 起泡葡萄酒中二氧化碳的稳定碳同位素比值（3C/2C）测定方法 稳定同位素比值质谱法 1范围 本标准规定了应用稳定同位素比值质谱法测定起泡葡萄酒中二氧化碳的稳定碳同位素比值 （13c//2c）的方法。 本标准适用于测定起泡葡萄酒、葡萄汽酒和香槟中二氧化碳的稳定碳同位素比值（13c/12C）。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性 与再现性的基本方法 3符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 3.113c/12C：稳定碳同位素比值，是稳定碳同位素13c与12c的原子丰度之比。 3.2sl3C：样品的稳定碳同位素比值相对于参考物质的稳定碳同位素比值的千分差。 3.3PDB：Pee-DeeBelemnite，美国南卡罗来纳州白垩纪皮狄组层位中的拟箭石化石，是稳定碳同位 素比值的国际基准物质。 3.4IRMS：IsotopeRatioMassSpectrometry，稳定同位素比值质谱仪， 4原理 二氧化碳（CO2）在一定的压力和温度下溶于酒中，测定时先将CO2与酒液分离以得到纯净的CO2 气体，然后用IRMS测定其稳定碳同位素比值，再通过公式计算得出样品中CO2的3"3CpDB。 5离线纯化联用双路进样-稳定同位素比率质谱法（第1法） 5.1试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯。 5.1.1液氮。 5.1.2无水乙醇。 5.1.3二氧化碳标准气：纯度不小于99.99%，其s13CpDB用国际碳酸盐参考物质或国家碳酸盐参考物 质标定。 5.2仪器和设备 5.2.1双路进样系统。 5.2.2IRMS：分析内精度优于0.05%0。 5.2.3离线纯化装置（参见附录A）。 5.2.4气样收集管（自带阀门）。 5.2.5顶空进样瓶：20mL。 5.3分析步骤 5.3.1试样的制备 QB/T4852-2015 5.3.1.1将未开封的酒样冷却至 C后，量取12ml 15mL酒样置于顶空进样瓶（5.2.5）中， 盖上瓶盖并压紧 5.3.1.2将除水冷阱浸 80℃~-70℃乙醇冷液 （在无水乙醇中缓慢加入液氮，并不断搅拌，使乙 醇冻结至近似凝固状态 将顶空进样瓶（5.2.5） 和气样收集管（5.44）连接到离线纯化装置（离线 纯化装置示意图参见图 A.D上 抽去离线纯化装置 和气样收 集管内的空气，使真空度小 于2.0Pa；关 闭气样收集管的阀门， 将气样收集管浸入液氮中：关闭机械泵 阀门，打开连接顶空进样瓶的 的真空截门， 打开气样收集管的阀门， 5min后 关闭真空截门并打开机械泵阀门，待真空度小于2.0Pa时关闭气样收 集管的阀门， 取下气样收集管。 5.3.2测定 将IRMS调整到正常工作状态，将二氧化碳标准 气（5.1.3）经双路进样系统 （5.2.1） 早入IRMS中 测定其稳定碳同位素比值，再将制备的样品的CO2气体（5.3.1 .2）经双路进样系统导入IRM MS中测定其 稳定碳同位素比值。该过程重复进 行4次以上，分别得到二氧 化碳标准气的稳定碳同位素比 比值测定结果 的算术平均值[(13c12C)s]和样品 的CO,气体稳定碳同位素比 12C)sAl. 直测定结果的算术平均值[ 5.4计算 5.4.1 分析结果的表述 样品中o气体的稳定 差表述， 按公式（1） 计算： (13C/12C)sA-(3C/12C)s (13 C/2C)sT 式中： s13c 气体13c/12c测定结果的算术平均值相 13c/2c 测 样品的CO 于二氧化 碳标准气 定维 果算术平均值的千分差； (3c/2C)sA 羊品的CO,气体的Bc/C测定结果的算术平均值 (13c/2C)sT 氧化碳标准气的13c/12c测定结果的算术平均值 结果保留两 小数 5.4.2结果计 定碳同位素组成结果应按公式（2）校准至国际基准PDB值： 所测的稳 PDB×1000 .... (2) 式中： 513Cpl 品的CO2气体的13c//2C相对于PDB的13c/12c 的千分差 313 体13c/12c测定结果的算术平均值相对于二 品的CO 化碳标准气13c/12c测 算术平均值的 sl3CsT-PDB 化碳标准气的C/12C相对于PDB的3c/2C的千分差 结果保留两位 5.5精密度 数据的精密度按照GB/T6379.2的规定确定，重复性和再现性的值以95%的可信度计算。 5.5.1重复性 在重复性条件下，两次独立测试所得结果的绝对差值不应超过重复性限（r）：r=0.58%o。如果差 值超过重复性限（r），应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。 2 QB/T4852-2015 5.5.2再现性 在再现性条件下，两次独立测试所得结果的绝对差值不应超过再现性限（R）：R=1.33%o。 6气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱法（第2法） 6.1试剂和材料 6.1.1氢气（He）：纯度不小于99.999% 6.1.2氧气（02）：纯度不小于99.99%。 6.1.3二氧化碳标准气体：同5.1.3。 6.2仪器和设备 6.2.1气相色谱仪-燃烧接口：配水渗透膜。 6.2.2IRMS：分析内精度优于0.05%0，配套连续流进样接口。 6. 2.3 气密进样针：10μL。 6.2.4 毛细管柱：柱长25m~50m，内径0.2mm~0.5mm。 6.2.5顶空进样瓶：同5.2.5。 6.2.6不锈钢毛细管：外径0.5mm，内径0.2mm。 6.2.7超声振荡仪。 6.3分析步骤 6.3.1试样的制备 将未开启的酒样置于低温环境中冷却至4℃～5℃；取下酒瓶的瓶塞，量取12mL~15mL酒样 倒入顶空进样瓶（6.2.5）中，盖上瓶盖后压紧。在顶空进样瓶的瓶盖上插入不锈钢毛细管（6.2.6），室 温下在超声振荡仪（6.2.7）中超声振荡2min。 6.3.2参考测定条件 设定气相色谱仪-燃烧接口的参数：进样口温度100℃，柱温100℃，载气为氢气，流量1.2mL/min， 分流比30：1，燃烧接口1000℃。 6.3.3测定 6.3.3.1用气密进样针（6.2.3）取4μL二氧化碳标准气（6.1.3）注入气相色谱仪-燃烧接口中，用IRMS 测定二氧化碳的碳同位素比值（13c/12c）。连续进行8次～10次测定，取后6次的算术平均值为测定 结果[(13c/2C)sT]。 6.3.3.2用气密进样针（6.2.3）取4μ6.3.1中由样品制备的二氧化碳气体注入气相色谱仪-燃烧接口 中，用IRMS测定二氧化碳的碳同位素比值（13c/2c）。连续进行8次～10次测定，取后6次的算术 平均值为测定结果[(13c/2C)sA]。 6.4计算 同5.4。 6.5精密度 同5.5。 3 QB/T4852-2015 附录A （资料性附录） 离线纯化装置 离线纯化装置示意图见图A.1。 说明： 机械泵； 机械泵阀门； 真空截门； 顶空进样瓶； 除水冷阱； 真空计； 6 气样收集管。 图A.1 离线纯化装置示意图 AD/TA052-2N15 中华人民共和国 轻工行业标准 起泡葡萄酒中二氧化碳的稳定碳同位素 比值（"℃/²℃）测定方法 稳定同位素比值质谱法 QB/T4852-2015 * 中国轻工业出版社出版发行 地址：北京东长安街6号 邮政编码：100740 发行电话：(010)65241695 网址：http：//www.chlip.com.cn Email:[email protected] 轻工业标准化编辑出版委员会编辑 地址：北京西城区下斜街29号 邮政编码：100053 电话：（010)68049923/24/25 * 版权所有侵权必究 书号：155019·4657 印数：1-200册 定价：18.00元