QB ICS67.080.10 分类号：X50 备案号：52205-2015 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T4853—2015 葡萄酒中水的稳定氧同位素比值（180/10） 同位素平衡交换法 测定方法 Determination of the oxygen isotoperatio (18o/l°o)ofwaterinwines -Methodusing isotopicequilibriumexchangereaction 2015-10-10发布 2016-03-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T4853-2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国食品发酵标准化中心归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、中国食品有限公司、中华人民共和国黄埔出入境检验 检疫局、北京龙徽酿酒有限公司。 本标准主要起草人：钟其顶、武竹英、孙建平、田玲、梁学军。 本标准为首次发布。 QB/T4853-2015 葡萄酒中水的稳定氧同位素比值（180/1%0）测定方法 同位素平衡交换法 1范围 本标准规定了应用同位素平衡交换法测定葡萄酒中水的稳定氧同位素比值（180/l%）的方法。 本标准适用于葡萄酒中水的稳定氧同位素比值（180/1%）的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性 与再现性的基本方法 3符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 3.1180/%：稳定氧同位素比值，是稳定氧同位素180与1%的原子丰度之比。 3.2sl8O：样品的稳定氧同位素比值相对于参考物质的稳定氧同位素比值的千分差。 3.3VSMOW：Vienna-StandardMeanOceanWater，维也纳-标准平均海洋水，是稳定氧同位素比值的 国际基准物质。 3.4SLAP：StandardLightAntarcticPrecipitation，标准南极轻降水，是与VSMOW共同构建稳定氧同 位素比值测定尺度的参考物质。 3.5IRMS：IsotopeRatioMassSpectrometry，稳定同位素比值质谱仪。 4原理 C1602+H2180C1%0180+H21%0 葡萄酒中的水和二氧化碳进行上述反应，待反应达到平衡状态后，用IRMS测定平衡后二氧化碳中 的稳定氧同位素比值，再通过公式计算得出样品的水中810。 5在线平衡交换联用稳定同位素比值质谱法（第1法） 5.1·试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯 5.1.1参考物质：可选择国际原子能机构或全国标准物质管理委员会认可的，或其他获得认可的同类 参考物质，参见附录A。 5.1.2电解铜丝。 5.1.3炭黑。 5.1.4无水乙醇。 5.1.5氢气（He）：纯度不应小于99.999%。 5.1.6 二氧化碳气体（CO2）：纯度不应小于99.99%。 5.1.7 二氧化碳-氢气混合气：二氧化碳体积分数为0.3% 5.2仪器和设备 5.2.1 稳定同位素比值质谱仪：分析内精度优于0.05%0，配套连续流进样接口。 QB/T4853-2015 5.2.23 全自动水 氧化碳平 行装置：配套全自动进样器和进 样针。 5.2.3 微量移液枪： OμL。 5.2.4硼硅玻璃样品瓶 12mL。 5.2.5 电子未平：感量0.01 5.3分析步骤 5.3.1试样的制备 分别吸取500μL参考物质（5.1.1）和500μL样品置于两个 个相互独立的硼硅玻璃样品瓶（5.2.4）中， 再分别加入01 1mg~0.2mg电解铜丝和1.0mg~1.5 5mg炭黑： 拧紧瓶盖后向瓶中充入二氧 化碳-氨气混 合气（5.1.7） 充气时间保持5 min以置换瓶中空气 将硼石 圭玻璃样品瓶置于全 自动水- 工氧化碳平衡 装置（5.2.2） 中进行氧同位素平衡 交换：反应时间应为24h 50h，得到平衡后的 氧化碳 气体，待测。 5.3.2测定 5. 3. 2.1 IRMS调整到正常 将 作状态， 利用全自动水 化碳平衡装置（5.2.2）将5.8.1中由参考 物质参与反应制备的二 氧化碳气 本导入IRMMS中测定， 行8次10次测定 连续 取后 次的算术平 均值为测定结果[(180/16 ORMl 5.3.2.2 利用全自动水 氧化碳平衡装置（5 将5.3.1中由样品参与反 应制备的二氧 气化碳气体导 入IRMS中测定，连续进 结果（1%/l%sA]。 5.4计算 5.4.1分析结果的表述 样品的稳定氧同位素组成以其对 相应同位素比值的千分差表示，按照公式（1）计算： ×1000% .. (1) 180/160)RM 式中： 样品的180/%测定值相对于参考物质的180/%测定值的分差： vs(O,/O s) 样品中水的/测定值； (180/160)RM 参考物质的180/1%0测定值。 结果保留 位小数 5.4.2结果讠 IOvsMOw/SLAP= .. (2) 式中： 318OvSMOW/SA 以VSMOW和SLAP两种国际参考水样为基准计算出的样品中水的1O值； 0180 样品的180/1%测定值相对于参考物质的180/%0测定值的千分差； lOvsMOW VSMOW的0/l%0相对于参考物质的0/的千分差； S18OsLAP SLAP的180/l%相对于参考物质的180/l%的千分差。 结果保留两位小数。 5.5精密度 按GB/T6379.2的规定进行确定，重复性和再现性的值以95%的可信度计算。 2 QB/T4853-2015 5.5.1重复性限 在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不应超过重复性限（r）：r=0.24%o。如果 差值超过重复性限（r），应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。 5.5.2再现性限 在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限（R）：R=0.50%0。 6离线平衡联用气相色谱-稳定同位素比值质谱法（第2法） 6.1试剂和材料 同5.1。 6.2仪器和设备 6.2.1气相色谱仪。 6.2.2IRMS：分析内精度优于0.05%o，配套连续流进样接口。 6.2.3 气密进样针：10μL。 6.2.4 顶空进样瓶：20mL。 6.2.5毛细管柱：柱长25m~55m，内径0.2mm~0.5mm。 6.2.6恒温振荡水浴锅：土0.5℃。 6.2.7不锈钢或玻璃导气系统：导气系统由减压阀、不锈钢管（3.175mm）或玻璃管（Φ6mm）、 进气歧管、硅胶管和不锈钢毛细管（Φ0.5mm）构成，参见附录B。 6.3分析步骤 6.3.1试样的制备 分别吸取3.0mL~5.0mL样品和3.0mL～5.0mL参考物质（5.1.1）置于两个相互独立的顶空进样 瓶（6.2.4）中，再分别加入0.6mg~1.2mg电解铜丝和6.0mg~12mg炭黑，拧紧瓶盖后用不锈钢或玻 璃导气系统（6.2.7），按图B.2所示的向上排气法，向顶空进样瓶中充入二氧化碳气体（5.1.6）置换其 中的空气，充气过程保持10min。将顶空进样瓶置于25℃～30℃恒温振荡水浴锅（6.2.6）中并保持 温度恒定，使瓶内样品中水与二氧化碳进行氧同位素交换；反应时间应为8h～24h，得到平衡后的二 氧化碳气体，待测。 6.3.2参考测定条件 设定气相色谱仪的参数：进样口100℃，柱温100℃，流量1.2mL/min，分流比30：1。 6.3.3测定 6.3.3.1将IRMS调整到正常工作状态，利用气密进样针（6.2.3）取4μL6.3.1中由参考物质参与反 应制备的二氧化碳气体导入IRMS中测定，连续进行8次10次测定，取后6次的算术平均值为测定 结果[(180/l0)RM]。 6.3.3.2将IRMS调整到正常工作状态，利用气密进样针（6.2.3）取4μL6.3.1中由样品参与反应制 备的二氧化碳气体导入IRMS中测定，连续进行8次10次测定，取后6次的算术平均值为测定结果 [(180/%0)RM]。 6.4计算 同5.4。 6.5精密度 同5.5。 3 QB/T48532015 附录A （资料性附录） 参考物质示例 参考物质示例见表A.1。 表 A. 1 参考物质示例 参考物质 名称 9180vsMOw/%o 机构 VSMOW 维也纳-标准平均海洋水 国际原子能机构 SLAP 标准南极轻降水 55.50 GBW04401 氢氧同位素标准水样 0.32±0.19 GBW04402 氢氧同位素标准水样 8.79±0.14 全国标准物质管理委员会 GBW04403 氢氧同位素标准水样 24.52±0.2 GBW04404 氢氧同位素标准水样 55.16±0.24 QB/T4853-2015 附录B （资料性附录） 不锈钢或玻璃导气系统 不锈钢或玻璃导气示意图和向上排气法示意图分别见图B.1和图B.2。 说明： 1- 二氧化碳钢瓶： 减压阀； 2 3 @3.175mm不锈钢管或Φ6mm玻璃管； 进气歧管； 硅胶管； 5 p0.5mm不锈钢毛细管。 6 图B.1 不锈钢或玻璃导气系统示意图 说明： Φ0.5mm不锈钢毛细管； 2— -20mL顶空进样瓶。 图B.2 向上排气法示意图