ICS65.160 X87 备案号：33246—2011 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T405.1-2011 代替YC/T182—2004，YC/T183—2004，YC/T219—2007 烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定 第1部分：高效液相色谱-串联质谱法 Tobacco and tobaccoproducts- Determination ofmulti-pesticideresidues- Part 1:High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method 2011-08-02发布 2011-09-01实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T405.1—2011 前言 YC/T405《烟草及烟草制品多种农药残留量的测定》共分以下五部分： 第1部分：高效液相色谱-串联质谱法； 第2部分：有机氯和拟除虫菊酯农药残留量的测定 气相色谱法； 第3部分：气相色谱质谱联用和气相色谱法： 第4部分：二硫代氨基甲酸酯农药残留量的测定 气相色谱质谱联用法； 第5部分：马来酰肼农药残留量的测定高效液相色谱法。 本部分为YC/T405的第1部分。 本部分按照GB/T1.1—2009和GB/T20001.4—2001给出的规则起草。 本部分代替YC/T182一2004《烟草及烟草制品吡虫农药残留量的测定 高效液相色谱法》、 YC/T183—2004《烟草及烟草制品沸灭威农药残留量的测定气相色谱法》、YC/T219—2007《烟草 及烟草制品灭多威农药残留量的测定气相色谱法》。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家烟草专卖局提出。 本部分由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SAC/TC144/SC1）归口。 本部分起草单位：中国烟草总公司郑州烟草研究院、国家烟草质量监督检验中心、中国烟草标准化 研究中心、红塔烟草（集团）有限责任公司、湖北中烟工业有限责任公司。 本部分主要起草人：胡斌、刘惠民、王洪波、郭军伟、唐纲岭、边照阳、李栋、陆舍铭、柯炜昌。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： YC/T182—2004; YC/T183—2004; -YC/T219—2007。 I YC/T405.1—2011 烟草及烟草制品多种农药残留量的测定 第1部分：高效液相色谱-串联质谱法 1范围 YC/T405的本部分规定了烟草及烟草制品中附录A中表A.1所列73种农药残留量的高效液相 色谱-串联质谱测定方法。 本部分适用于附录A中表A.1所列73种农药残留量的测定。本方法检出限和定量限见附录B中 表B.1。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定 烘箱法 3原理 向粉碎的样品中添加适量水，充分浸润后使用乙腈振荡提取，盐析离心分层，取上层清液经吸附剂 净化后，用高效液相色谱-串联质谱仪检测，内标法定量。 4试剂与材料 所有试剂应适用于农药残留量分析，并应采用与样品测定（萃取和高效液相色谱-串联质谱法测定） 相同的方法做空白试验以检查其纯度，空白溶剂色谱图的基线上应没有影响残留农药测定的峰出现。 水应达到GB/T6682中一级水的要求。 4.1乙腈，农残级。 4.2甲醇，农残级。 4.3无水硫酸镁，分析纯。用前应在650灼烧4h，贮存于干燥器中备用。 4.4 氯化钠，分析纯。 4.5柠檬酸钠，分析纯。 4.6 柠檬酸氢二钠，分析纯。 4.7N-丙基乙二胺键合固相吸附剂，即PSA吸附剂（primarysecondaryamine）。 4.8标准物质：附录A中表A.1所列物质的有证标准物质，纯度95%（质量分数）。 4.9 9丙草丹，用作内标物质，纯度95%（质量分数）。 注：丙草丹是中文通用名称，其化学名称为N,N-二丙基硫代氨基甲酸-S-乙基酯，IUPAC命名为S-ethyldipropyl （thiocarbamate)，英文通用名EPTC 4.10标准溶液（农药标准溶液应避光贮存于0℃4℃条件下，可至少稳定6个月）。 4.10.1单一标准储备液（1000μg/mL） 1 YC/T405.1—2011 分别称取0.01g每种农药标准物质（4.8），精确至0.0001g，至不同的10mL容量瓶中，用甲醇 (4.2)稀释定容至刻度。 4.10.2混合标准储备液（10μg/mL） 移取各农药单一标准储备液1mL（4.10.1）于100mL容量瓶中，用甲醇（4.2）稀释定容至刻度。 4.10.3内标储备液 4.10.4内标工作液（1μg/mL） 移取1mL内标储备液（4.10.3）于100mL容量瓶中，用甲醇（4.2）稀释定容至刻度。 4.10.5标准工作溶液 中，每个容量瓶中移人1mL内标工作液（4.10.4），用甲醇（4.2）稀释定容至刻度。 4.10.6基质混合标准工作溶液（每次制定基质混合标准工作曲线时现配现用） 不含有本部分附录A中表A.1所列73种农药残留的同类型样品可视作该类型空白样品。空白样 品按照7.1和7.2进行提取和净化后得到空白样品提取液。 I mL. 4.11萃取剂：移取100μL内标储备液（4.10.3）于100mL容量瓶中，用乙睛（4.1）稀释定容至刻度。 5仪器 常用实验仪器及下述各项： 5.1分析天平，感量为0.0001g。 5.2高速离心机，应能使用50mL及1.5mL的离心管，转速不低于7000r/min。 5.3漩涡混合振荡仪，转速不低于2500r/min。 5.4高效液相色谱-串联质谱仪，配备电喷雾离子源（ESI）。 6试样制备 按YC/T31制备样品，并测定样品水分含量。 7分析步骤 7.1提取 称取约2g样品，精确至0.01g，于50mL具盖离心管中，加入10mL水，振荡至样品被水充分浸 润后静置10min。移取10mL萃取剂（4.11）至离心管中，并置于涡混合振荡仪（5.3）上以2000r/min 速度振荡1min。在离心管中分别加入4g无水硫酸镁（4.3），1g氟化钠（4.4），1g柠檬酸钠（4.5）和 0.5g柠檬酸氢二钠（4.6），立即于漩涡混合振荡仪（5.3）上以2000r/min速度振荡2min，以防止无水 硫酸镁遇水反应造成局部过热并结块，然后以4000r/min离心10min。 7.2净化 移取1mL样品提取液上清液（7.1）于1.5mL离心管中，加人150mg无水硫酸镁（4.3）和25mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂（4.7），于漩涡混合振荡仪（5.3）上以2000r/min速度振荡2min，以 6000r/min离心2min，收集上清液备用。 2 YC/T405.1—2011 7.3稀释 吸取200μL上清液（7.2），用乙睛（4.1）稀释至约1mL，经0.22μm有机相滤膜过滤后得试样萃 取液，待检测分析。 7.4 测定 7.4. 1 测定条件 色谱柱：Cs液相色谱分析柱（柱长150mm，内径2.1mm，固定相粒径3μm）或相当者； 柱温：25℃； 进样量：10μL； 流动相组成、流速及梯度变化，见表1； 扫描方式：正离子扫描； 监测方式：多反应监测； 电喷雾电压：5500V； 雾化气压力：0.414MPa； 离子源温度：500℃； 监测离子对信息见附录C中表C.1。 表1 液相色谱流动相组成、流速及梯度变化 时间 流速 水 乙腈 min μL/min % % 0.00 200 90 10 1. 00 200 50 50 5. 00 200 50 50 16.00 200 40 60 25.00 200 20 80 30.00 200 5 S6 40. 00 200 5 95 40.01 200 90 10 45.00 200 90 10 7.4.2 基质混合标准工作曲线制作 对基质混合标准工作溶液（4.10.6)进行高效液相色谱-串联质谱分析，得到每个农药目标化合物与 内标的峰蜂面积之比以及浓度之比，通过线性拟合检查质谱检测器的响应是否呈线性。当相关系数 R≥0.99，可以采用单一水平的基质混合标准工作曲线。单一水平基质混合标准工作曲线应使用中等 浓度的基质混合标准工作溶液制作。 每次试验均应制作基质混合标准工作曲线，每进样10次后应加人一个中等浓度的基质混合标准工 作溶液，如果测得值与原值相差超过10%，则应重新进行基质混合标准工作曲线的制作。 3 YC/T405.1—2011 7.4.3 样品测定 对试样萃取液（7.3）进行分析，依据内标法由基质混合标准工作曲线（7.4.2)计算得到测定值。平 行进行两次样品测定，以两次平行测定结果的平均值作为最终测定结果。两次平行测定结果的相对平 均偏差应小于10%。标准工作溶液和空白样品色谱图参见附录D。 8结果表述 每个农药的响应系数E，，由式（1)计算： CpstXAist E,= ..(1 ) Apst X Cist 式中： 基质混合标准工作溶液中农药的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； As一基质混合标准工作溶液中内标的峰面积或峰高； Apat 基质混合标准工作溶液中农药的峰面积或峰高； Cat一-基质混合标准工作溶液中内标的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。 以干基计的农药残留量R，，以毫克每千克（mg/kg）表示，由式（2)计算： A,XE,XQitX100X1000 R,