2 0 2 5 1 2 0 9 发 布 － － 2 0 2 6 0 5 0 1 － － 实 施 水 产 品 中 土 腥 味 物 质 的 测 定 气 相 色 谱 质 谱 法 2 0 中 华 人 民 共 和 国 水 产 行 业 标 准 备 案 号 ： X X X X - X X X X Ｉ Ｃ Ｓ 6 7 . 0 5 0 C C S X 3 0 6 7 — 2 0 2 5 D e t e r m i n a t i o n o f e a r t h y o d o r s u b s t a n c e s i n a q u a t i c p r o d u c t s — G a s c h r o m a t o g r a p h y - m a s s s p e c t r o m e t r y S C ／ Ｔ 中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部 发 布SC/T３０６７—２０２５ 前　　言 本文件按照GB/T１􀆰１—２０２０«标准化工作导则　第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部渔业渔政管理局提出. 本文件由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会(SAC/TC１５６/SC３)归口. 本文件起草单位:中国水产科学研究院长江水产研究所、中国水产科学研究院、湛江市食品药品检验 所、中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国水产科学研究院东海水产研究所、中国科学院水生生物研 究所、中国水产科学研究院南海水产研究所、上海海洋大学. 本文件主要起草人:何力、喻亚丽、程波、高平、彭婕、郭全友、刘婷、甘金华、毛涛、张浪、黄冬梅、吴俊杰、 林娜、孙伟红、刘昊昆、杨珍燕、潘创、魏涯、李慷、刘利平. ⅠSC/T３０６７—２０２５ 水产品中土腥味物质的测定　气相色谱质谱法 １　范围 本文件描述了用气相色谱质谱法测定水产品中土腥味物质土臭素(Geosmin,简称GSM)和２Ｇ甲基异 莰醇(２Ｇmethylisoborneol,简称２ＧMIB)的原理、试剂与材料、仪器设备、样品制备与保存、测定步骤、数据 处理以及方法灵敏度、准确度和精密度. 本文件适用于水产品中土臭素和２Ｇ甲基异莰醇含量的测定. ２　规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件. GB/T６６８２　分析实验室用水规格和试验方法. ３　术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. ４　原理 在密封容器内,试样中的土腥味物质土臭素和２Ｇ甲基异莰醇经加热扩散,固相微萃取纤维吸附、顶空 富集后,采用气相色谱质谱法测定,内标法定量. ５　试剂与材料 试验用水应符合GB/T６６８２一级水的规定. ５􀆰１　试剂 ５􀆰１􀆰１　甲醇(CH３OH):色谱纯. ５􀆰１􀆰２　氯化钠(NaCl):优级纯. ５􀆰２　溶液配制 饱和氯化钠溶液:称取３５􀆰９g氯化钠(５􀆰１􀆰２),加入１００mL水振摇或超声溶解,静置. ５􀆰３　标准品 ５􀆰３􀆰１　土臭素(C１２H２２O,CAS号:１６４２３Ｇ１９Ｇ１),纯度≥９８％. ５􀆰３􀆰２　２Ｇ甲基异莰醇(C１１H２０O,CAS号:２３７１Ｇ４２Ｇ８),纯度≥９８％. ５􀆰３􀆰３　土臭素ＧD５(C１２H１７D５O,CAS号:２１６１６６Ｇ８３Ｇ５),纯度≥９８％. ５􀆰３􀆰４　２Ｇ异丁基Ｇ３Ｇ甲氧基吡嗪(C９H１４N２O,CAS号:２４６８３Ｇ００Ｇ９),纯度≥９９％. ５􀆰４　标准溶液配制 ５􀆰４􀆰１　标准储备液:准确称取土臭素(５􀆰３􀆰１)、２Ｇ甲基异莰醇(５􀆰３􀆰２)标准品各１０mg(精确至０􀆰０１mg), 分别用甲醇(５􀆰１􀆰１)溶解并定容至１００mL容量瓶中,混匀,配制成浓度为１００μg/mL的标准储备液. －１８℃以下避光保存,有效期６个月. ５􀆰４􀆰２　内标储备液:准确称取土臭素ＧD５(５􀆰３􀆰３)、２Ｇ异丁基Ｇ３Ｇ甲氧基吡嗪(５􀆰３􀆰４)各１０mg(精确至 ０􀆰０１mg),分别用甲醇(５􀆰１􀆰１)溶解并定容至１００mL容量瓶中,混匀,配制成浓度为１００μg/mL的内标 储备液.－１８℃以下避光保存,有效期６个月. ５􀆰４􀆰３　混合标准中间液:准确移取标准储备液(５􀆰４􀆰１)各１mL,用甲醇(５􀆰１􀆰１)稀释并定容至１００mL容 １SC/T３０６７—２０２５ 量瓶中,混匀,配制成浓度均为１μg/mL混合标准中间液.－１８℃以下避光保存,有效期１个月. ５􀆰４􀆰４　混合内标中间液:准确移取内标储备液(５􀆰４􀆰２)各１mL,用甲醇(５􀆰１􀆰１)稀释并定容至１００mL容 量瓶中,混匀,配制成浓度均为１μg/mL混合内标中间液.－１８℃以下避光保存,有效期１个月. ５􀆰４􀆰５　混合标准使用液:准确移取适量的混合标准中间液(５􀆰４􀆰３),用甲醇(５􀆰１􀆰１)稀释成浓度分别为 ０􀆰５ng/mL、１􀆰０ng/mL、２􀆰５ng/mL、５􀆰０ng/mL、１０ng/mL、２５ng/mL、４０ng/mL的混合标准使用液. 现配现用. ５􀆰４􀆰６　混合内标使用液:准确移取适量的混合内标中间液(５􀆰４􀆰４),用甲醇(５􀆰１􀆰１)稀释成浓度为 １􀆰０ng/mL的混合内标使用液.现配现用. ５􀆰５　材料 ５􀆰５􀆰１　固相微萃取(SPME)纤维:二乙烯基苯/羧基/聚二甲基硅氧烷(DVB/CAR/PDMS)SPME纤维组 件,涂层厚度５０/３０μm,或性能相当者.使用前,应先将其置于气相色谱进样口老化.老化温度宜为 ２７０℃,老化时间宜为３０min,或参考厂商建议的老化温度与时间. ５􀆰５􀆰２　磁性聚四氟磁力搅拌子:１０mm(长)×５mm(外径),或性能相当者. ５􀆰５􀆰３　２０mL顶空瓶:配聚四氟乙烯(PTFE)/硅胶隔垫. ５􀆰５􀆰４　分样筛:孔径０􀆰４２５mm(４０目). ５􀆰５􀆰５　固相微萃取专用衬管. ５􀆰５􀆰６　液氮:纯度９９􀆰９９％. ６　仪器设备 ６􀆰１　气相色谱串联质谱仪:配电子轰击电离源(EI). ６􀆰２　电子天平:感量为０􀆰０１g、０􀆰００００１g和０􀆰００１g. ６􀆰３　组织匀浆机. ６􀆰４　涡旋振荡器. ６􀆰５　加热磁力搅拌器:控温精度±１℃,且转速不低于１２００r/min. ６􀆰６　固相微萃取装置:配SPME手柄. ７　样品制备与保存 ７􀆰１　样品制备 取水产品肌肉,切成不大于０􀆰５cm×０􀆰５cm×０􀆰５cm的小块于液氮(５􀆰５􀆰６)中冷冻２min,迅速取出 后用组织匀浆机快速进行均质处理.使用外力将肌肉过分样筛处理后,装入洁净容器中备用. ７􀆰２　样品保存 －１８℃以下保存. ８　测定步骤 ８􀆰１　萃取 ８􀆰１􀆰１　称取试样０􀆰５g(准确至±０􀆰００１g),置于２０mL顶空瓶底部,依次加入０􀆰１５g氯化钠(５􀆰１􀆰２)、 ５０μL混合内标使用液(５􀆰４􀆰６)、９５０μL饱和氯化钠溶液(５􀆰２),再放入１颗磁力搅拌子,立即密封.将顶 空瓶置于涡旋振荡器上,涡旋振荡２min. ８􀆰１􀆰２　将上述装有样品的顶空瓶置于加热磁力搅拌器上,于７０℃水浴加热,以１２００r/min搅拌混匀 ３０s后,将SPME手柄插进顶空瓶,压出SPME纤维至顶空瓶上部空间进行吸附萃取. ８􀆰１􀆰３　萃取３０min后,推回SPME纤维,取出萃取针,擦干吸附于萃取针针头表面的水分. ８􀆰２　解析 将萃取针插入气相色谱进样口,推出SPME纤维,２５０℃解析５min. ２SC/T３０６７—２０２５ ８􀆰３　测定 ８􀆰３􀆰１　气相色谱参考条件 气相色谱参考条件如下: a)　色谱柱:固定相为５％Ｇ苯基甲基聚硅氧烷石英毛细管柱,３０m×０􀆰２５mm×０􀆰２５μm,或性能相 当者. b)载气:高纯氦,纯度≥９９􀆰９９９％. c)流速:１􀆰０mL/min. d)进样口温度:２５０℃. e)进样方式:不分流进样. f)程序升温:起始温度６０℃,保持２min;以１０℃/min的速率升温至１２０℃;以３℃/min的速 率升温至１５０℃,保持１min;以２０℃/min升温到２６０℃,保持１min. ８􀆰３􀆰２　质谱参考条件 质谱参考条件如下: a)离子源:电子轰击电离源(EI); b)电离能量:７０eV; c)离子源温度:２３０℃; d)传输线温度:２８０℃; e)溶剂延迟:５min; f)测定方式:多反应监测模式(MRM),定性离子对、定量离子对、碰撞能量和保留时间参考值见 表１. 表１　定性离子对、定量离子对、碰撞能量和保留时间参考值 化合物保留时间 min定性离子对 m/z碰撞能量 eV定量离子对 m/z碰撞能量 eV ２Ｇ甲基异莰醇 ９􀆰８８９５􀆰１＞５５􀆰１ ９５􀆰１＞６７􀆰１１６ １０１０８􀆰１＞９３􀆰１ ８ ２Ｇ异丁基Ｇ３Ｇ 甲氧基吡嗪９􀆰４５９４􀆰１＞７９􀆰０ １５１􀆰１＞１２３􀆰０１０ ６１２４􀆰０＞９４􀆰１ １０ 土臭素 １５􀆰３２１１２􀆰１＞８３􀆰０ １２５􀆰１＞１０７􀆰１８ １０１１２􀆰１＞９７􀆰１ ８ 土臭素ＧD５ １５􀆰２２１１５􀆰１＞８６􀆰１ １２９􀆰１＞１１４􀆰１８ ８１１５􀆰１＞１００􀆰１ ８ ８􀆰３􀆰３　标准工作曲线的绘制 在顶空瓶中依次加入０􀆰１５g氯化钠(５􀆰１􀆰２)、９３０μL饱和氯化钠溶液(５􀆰２)和一颗磁力搅拌子,再分 别准确移取２０μL混合标准使用液(５􀆰４􀆰５)和５０μL混合内标使用液(５􀆰４􀆰６),立即密封顶空瓶.系列标 准工作液中目标物含量分别为１０