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ICS65.020.20 CCSB61 21 辽宁省地方标准 DB21/T4453—2026 辽东楤木组培繁殖技术规程 TechnicalregulationfortissuecultureofAraliaelata 2026-05-30发布 2026-06-30实施 辽宁省市场监督管理局  发布DB21/T4453—2026 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由辽宁省林业和草原局提出并归口。 本文件起草单位:辽宁省森林经营研究所。 本文件主要起草人:林晓坤、姜冬、常婧、张群野、宋诗雨、王品、马晓雨、高源、温福欣、苏蕾、 杨双赫、罗彦昕、金鑫、尚福强、潘丕克、李沫蕊、任万福、任如月、张妍、于璐、邵立郡、刘晴、张 丽艳、李成成、张利萍。 本文件发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈, 我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址:辽宁省林业和草原局(沈阳市和平区太原北街2号),联系电话: 024-23448927。 标准起草单位通讯地址:辽宁省森林经营研究所(丹东市元宝区金山镇新建街600号),联系电话: 0415-4157090。DB21/T4453—2026 1辽东楤木组培繁殖技术规程 1范围 本文件规定了辽东楤木(Araliaelata)组培繁殖技术的术语和定义、培养基制备、外植体采集及 处理、诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽、苗木出圃和档案管理等技术与要求。 本文件适用于辽东楤木组培繁殖育苗。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T42478农产品生产档案记载规范 LY/T1882林木组织培养育苗技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 辽东楤木Araliaelata 辽东楤木(Araliaelata),又名刺龙牙、刺嫩芽、刺老芽等,属五加科楤木属,落叶灌木或小乔 木。形态特征和生物学特性参见附录A。 3.2 丛芽苗multipleshoots 培养材料在培养基上分化的多个基部相连的带芽小苗。 3.3 诱导培养inductionculture 外植体接种到诱导培养基上,在适宜温湿度和光照条件下分化产生不定芽的过程。 3.4 继代培养subculture 诱导培养产生的不定芽切分成单株,转接到增殖培养基上继续培养扩增的过程。 3.5DB21/T4453—2026 2生根培养rootingculture 继代培养获得的无根芽苗转接到生根培养基上产生根的过程。 4培养基制备 4.1培养基配方 4.1.1基本培养基 采用MS培养基,具体成分按照附录B执行。 4.1.2诱导培养基 MS+0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8~6.2。 4.1.3增殖培养基 MS+1.5mg/L6-BA+0.6mg/LIAA+0.2mg/LGA3+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8~6.2。 4.1.4生根培养基 1/2MS+0.2mg/LIAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,pH5.8~6.2。 4.2培养基配制 培养基配制方法按照LY/T1882相关要求执行。 4.3培养基灭菌 将培养基放入高压蒸汽灭菌器内,在压力0.105MPa下、温度121℃时,灭菌20min。增殖培养基 高压灭菌后放置在已灭菌的超净工作台中,冷却至50℃~60℃,加入通过0.22μm滤膜过滤除菌的GA3。 4.4培养基保存及使用 灭菌后的培养基应保存于洁净环境中,注意避光和防尘。培养基常温条件下7d内使用,2℃~4℃ 条件下14d内使用。 5外植体采集及处理 5.1外植体采集 春季芽开始萌发时采集。选择无病虫害、生长健壮的优良无性系或优良单株,剪取萌发长度1cm~ 2cm的嫩芽作为外植体,带回组培室,用流水冲洗干净。 5.2外植体消毒 外植体在超净工作台先用75%乙醇溶液浸泡消毒15s,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒10min, 期间不断摇晃,用无菌水冲洗4次~5次,最后用无菌滤纸吸干水分,置于无菌不锈钢小盘上。 6诱导培养DB21/T4453—2026 36.1外植体接种 在超净工作台上,用已灭菌的镊子和解剖刀剥去外植体鳞片和大部分幼叶,接种于诱导培养基中, 数量为3个~4个/瓶。将瓶口封好,备注材料名称、编号、接种日期等。 6.2培养条件 温度:25±2℃,光照强度:1500lux~2000lux,光照时间:12h/d~14h/d。 6.3芽诱导 将接种在诱导培养基的外植体置于培养室培养30d~35d,萌发产生不定芽。 7继代培养 7.1继代接种 将外植体诱导出的芽或继代培养产生的丛芽苗连带愈伤组织进行切分,每块愈伤组织1个~2个芽, 转接至增殖培养基,一般3块~4块/瓶。 7.2继代周期 每隔30d~35d将继代苗转接至增殖培养基,继代培养控制在8代内,培养条件见6.2。 8生根培养 将生长健壮、高度2cm~3cm的丛芽苗切分成单株,切除全部愈伤组织,转接至生根培养基,接种 数量10株/瓶,培养25d~30d,培养条件见6.2。 9炼苗及移栽 9.1炼苗 选择苗高3cm~4cm、具3片~5片绿叶、根数≥5条、根长2cm以上、生长健壮的组培苗进行炼苗。 炼苗在温室内进行,遮光70%~80%,温度控制在18℃~28℃,湿度80%~90%,去除培养瓶的封口材料, 开瓶锻炼1d~3d。 9.2移栽 9.2.1移栽时间 组培苗移至温室栽培可全年进行。 9.2.2移栽容器及基质 移栽容器为上口径3.4cm,底部1.5cm,深度4.0cm的穴盘。移栽基质为草炭、蛭石与珠岩,按照 3∶1∶1的比例混匀,装满穴孔,浇透水。 9.2.3洗苗 将组培苗从培养瓶取出,用18℃~20℃清水洗净根部培养基,保湿备用。DB21/T4453—2026 49.2.4穴盘移栽 用直径0.5cm木棍在穴盘基质上插孔,镊子轻夹幼苗根部轻置于孔底,让根系尽量舒展,摆正小苗, 用基质覆盖至组培苗基部,稍微压实。 9.3移栽管理 9.3.1穴盘苗管理 将穴盘组培苗摆放在温室拱棚中,遮阴50%,每天喷雾,保证拱棚内空气湿度90%以上,白天温度控 制在23℃~30℃,夜间温度不低于15℃。移栽10d~14d即缓苗期过后逐渐揭膜通风,减少喷雾次 数,20d后可撤掉拱棚薄膜。移栽30d后,喷施0.2%的尿素和磷酸二氢钾1次。 9.3.2营养钵苗管理 组培苗在穴盘中生长30d~40d后,可移栽至营养钵中。移栽时要求基质不散落,埋土至根基,压 实浇透水。移栽后遮阴35%~40%,1个月后撤掉遮阴网。 10苗木出圃 10.1苗木等级划分 对生长健壮,地径、苗高和根系达到一定标准的苗木进行等级划分,详见附录C。 10.2苗木出圃 营养钵苗生长达到苗木等级Ⅰ、Ⅱ级,即可成苗、出圃。 11档案管理 建立育苗管理档案,具体按GB/T42478执行。

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