SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4261—2015 出口中药材中苯并（a）花残留量的测定 Determination of benzo(a)pyrene residue in Chinese herbal medicine for export 行业标准信息服务平台 2015-05-26发布 2016-01-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4261—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国陕西出人境检验检疫局。 本标准起草人：何强、孔祥虹、李建华、李高华、吴双民、张莹、邹阳、张璐、李莹、付骋宇。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4261—2015 出口中药材中苯并（a）花残留量的测定 1范围 本标准规定了中药材中苯并（α）芪残留量的气相色谱-串联质谱测定方法及高效液相色谱测定 方法。 本标准第一法和第二法均适用于熟地黄、人参、黄芪、甘草、半夏、番泻叶、菊花、枸杞、苦杏仁、绞股 蓝、茯苓、僵蚕、蜂胶等中药材中苯并（a）芪残留量的测定，第一法可以对苯并（a）芪进行确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 第一法气相色谱-串联质谱法 3方法提要 试样用水浸泡后，用正已烷萃取，硅胶固相萃取柱和聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱净化 用气相色谱-串联质谱仪进行测定和确证，内标法定量。 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1 正已烷：HPLC级 4.2 2二氯甲烷：HPLC级。 4.3 正已烷-二氯甲烷（3十1，体积比）：量取300mL正已烷与100mL二氯甲烷混合均勾。 4.4苯并（a）芪标准物质（Benzo(a）pyrene，C2oH12.CAS号：50-32-8）：纯度大于等于99%。 4.5Di2-苯并芘内标物（Benzo（a）pyrene-Di2，C2oD12CAS号：63466-71-7）：纯度大于等于98%。 4.6苯并（a）芪标准储备溶液：准确称取适量的苯并（a）芪标准物质，用二氯甲烷配制成1000μg/mL 的标准储备溶液，0℃～4℃保存 4.7D12-苯并芪内标物储备溶液：准确称取适量的Di2-苯并标准物质，用正已烷配制成100μg/mL 的标准储备溶液，或市购D12-苯并标准溶液，0℃4℃保存。 4.8Di2-苯并芪内标物工作溶液：将Di2-苯并芪内标物储备溶液用正已烷逐级稀释，配制成0.05uμg/mL 的标准工作溶液，0℃～4℃保存。 4.9系列标准工作溶液：取一定量的苯升（a）芪标准溶液和D12-苯并内标物溶液混合，用正已烷定 容，配制成苯并（a）浓度为2ng/mL~100ng/mL，Di2-苯并芘均为10ng/mL的系列标准溶液， 0℃~4℃保存。 4.10硅胶固相萃取柱：1g/6mL。 1 SN/T 4261—2015 4.11 聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱：500mg/6mL。 4.12 玻璃纤维滤纸：孔径1.5μm。 5仪器和设备 5.1 气相色谱-串联质谱仪：配有EI电离源、串联四级杆质量分析器 5.2分析天平：感量为0.01mg和0.01g。 5.3 3高速粉碎机。 5.4超声波提取仪。 5.5 5离心机：4500r/min。 5.6 6固相萃取装置。 5.7具塞离心管：50mL。 5.8 减压旋转蒸发器。 5.9 浓缩瓶：50mL、100mL。 6试样制备与保存 人参、黄芪、甘草、半夏、番泻叶、菊花、苦杏仁、绞股蓝、茯苓、僵蚕等样品取不少于200g，用高速粉 碎机粉碎，过孔径约0.3mm的筛，取通过筛网的药材粉末装入洁净的容器内，密闭并标明标记，于 0℃～4℃保存。熟地黄、枸杞、蜂胶等样品先切成小块，装人洁净样品袋中在18℃冷冻2h以上，取出 后迅速进行高速粉碎，粉碎后的样品再装入洁净容器内，密闭并标明标记，于18℃保存。 7测定步骤 7.1提取 称取2g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入200uL的D12-苯并花内标溶液（4.8），再加 人20mL水，超声浸泡30min，加人15mL正已烷，振荡提取10min，4000r/min离心3min，取上层 正已烷溶液于100mL浓缩瓶中，用15mL正已烷再重复萃取2次，合并正已烷萃取液，于40℃减压浓 缩至约5mL，待净化。 蜂胶样品浓缩后需要用玻璃纤维滤纸过滤并用约5mL正已烷淋洗玻璃纤维滤纸。 7.2净化 将硅胶固相萃取柱串接在聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取柱上方，依次用5mL二氯甲烷、 10mL正已烷活化，取样品溶液上样，并用约5mL正已烷洗涤样品浓缩瓶，洗涤液合并上样，再用 15mL正已烷淋洗，弃去硅胶固相萃取柱，用5mL正己烷淋洗聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物固相萃取 柱，最后用5mL正已烷-二氯甲烷溶液（4.3）洗脱，整个净化过程保持流速2mL/min~3mL/min，收集 7.3测定 7.3.1气相色谱-串联质谱参考条件 气相色谱-串联质谱参考条件如下： a) 色谱柱：DB-5MS弹性石英毛细管柱，30m×0.25mm（内径），膜厚0.25μm，或相当者； 2