ICS67.050 A019 团体标准 T/SSX007—2023 植物油生育酚及生育三烯酚含量测定 反相高效液相色谱法 Vegetableoils- Determinationoftocopherolandtocotrienolcontents byreversed-phasehighperformanceliquidchromatography 2023-03-24发布 2023-04-24实施 陕西省食品科学技术学会发布 全国团体标准信息平台 T/SSX007—2023 I目次 前  言................................................................................................................................................................II 1范围......................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件..................................................................................................................................................1 3术语定义..............................................................................................................................................................1 4原理......................................................................................................................................................................1 5试剂......................................................................................................................................................................1 6仪器和设备..........................................................................................................................................................2 7取样......................................................................................................................................................................2 8操作步骤..............................................................................................................................................................2 9结果表示..............................................................................................................................................................3 10精密度................................................................................................................................................................3 附录A（资料性）4种生育酚和4种生育三烯酚混合标准物质色谱图.......................................................4 全国团体标准信息平台 T/SSX007—2023 II前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由陕西省食品科学技术学会提出并归口。 本文件负责起草单位：陕西师范大学、西安市粮油质量检验中心。 本文件参与起草单位：陕西省粮油科学研究院、西安市产品质量监督检验院。 本文件主要起草人：李建科、武利梅、吴丽华、孟永宏、张玉环、赵晶晶、龚珊、王峰、赵佳、 蔡静薇、雷亚楠。 本文件由陕西省食品科学技术学会负责解释。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SSX007—2023 1植物油生育酚及生育三烯酚含量测定 反相高效液相色谱法 1范围 本文件规定了用高效液相色谱仪同时测定植物油中α-、β-、γ-、δ-生育酚及α-、β-、γ-、δ-生育三烯 酚含量的方法。 当取样量为0.5g，定容25mL时，α-生育酚的检出限为2.5μg/g，定量限为8.5μg/g；β-、γ-、δ- 生育酚、α-、β-、γ-、δ-生育三烯酚的检出限为1μg/g，定量限为3.5μg/g。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T5524动植物油脂扦样 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T15347化学试剂L(+)-抗坏血酸 GB/T26635动植物油脂生育酚及生育三烯酚含量测定高效液相色谱法 3术语定义 下列术语定义适用于本文件。 3.1 生育酚含量Tocopherolcontents α-、β-、γ-、δ-生育酚含量的总和。 3.2 生育三烯酚含量Tocotrienolcontents α-、β-、γ-、δ-生育三烯酚含量的总和。 4原理 植物油样用正己烷溶解，甲醇水溶液均质萃取后，甲醇水层通过高效液相色谱仪将各生育酚及生 育三烯酚单体分离，依据标准溶液色谱保留时间对目标物质定性，采用外标法定量。 5试剂 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯。实验用水为GB/T6682规定的一级水。 5.1生育酚及生育三烯酚标准物质。 α-生育酚：CAS号：10191-41-0，纯度≥95%； β-生育酚：CAS号：148-03-8，纯度≥95%； 全国团体标准信息平台 T/SSX007—2023 2γ-生育酚：CAS号：54-28-4，纯度≥95%； δ-生育酚：CAS号：119-13-1，纯度≥95%； α-生育三烯酚：CAS号：10191-41-0，纯度≥95%； β-生育三烯酚：CAS号：190-23-3，纯度≥95%； γ-生育三烯酚：CAS号：54-28-4，纯度≥95%； δ-生育三烯酚：CAS号：25612-59-3，纯度≥95%。 5.2甲醇：色谱级，用0.22μm尼龙过滤器过滤后使用。 5.3抗坏血酸：应符合GB/T15347的规定。 5.42,6-二叔丁基对甲酚：简称BHT。 6仪器和设备 6.1高效液相色谱仪：配有荧光检测器。 6.2均质机。 6.3高速冷冻离心机。 6.4紫外分光光度计。 6.5氮吹仪。 7取样 采用GB/T5524扦样。 8操作步骤 8.1标准溶液制备 标准储备液：准确称量4种生育酚和4种生育三烯酚标准品各10.0mg于10mL容量瓶中，用正己烷 溶解并稀释至刻度，转移至棕色试剂瓶中，密封后，在-20℃下避光保存，有效期６个月。 临用前需要进行浓度校正：用带10mm比色皿的紫外分光光度计（6.4），在270nm～310nm之间 选择适当的波长（见表1）测吸光度。测得的吸光度应在0.2~0.8之间。用吸光度除以表1中相应的校正 系数计算浓度（用mg/mL表示）。 标准溶液中间液：用移液管分别吸取4种生育酚和4种生育三烯酚单体储备液0.5mL至棕色试管， 在30℃的条件下，用氮吹仪除去正己烷。用移液管向试管中准确加入10mL流动相振荡溶解残余物， 此溶液中4种生育酚和4种生育三烯酚浓度为50μg/mL。密封后，在-20℃下避光保存，有效期半个月。 标准系列工作溶液：准确吸取生育酚和生育三烯酚混合标准溶液中间液0.0125mL、0.025mL、 0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2mL于10mL棕