ICS65.020.20 CCSB23DB50 重庆市地方标准 DB50/T142—2023 代替DB50/T142-2003 马铃薯脱毒种薯繁育技术规程 2023-03-20发布 2023-06-20实施 重庆市市场监督管理局发布 DB50/T142—2023 I前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替DB50/T142－2003。与DB50/T142－2003相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技 术变化如下： a)修改了规范性引用文件； b)重新定义了部分术语和定义； c)增加了脱毒试管苗生产条件条款，对脱毒试管苗、原原种、原种、生产用种的生产、水肥和病 虫害管理等过程中的部分内容进行细化完善，使之更具操作性； d)对各等级种薯生产的必备项作出了明确要求。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由重庆市农业农村委员会提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：重庆市农业技术推广总站。 本文件主要起草人员：欧建龙、黄振霖、赵雨佳、何佳洋、李义江、李明聪、梁峰铭、刘芳、胡斯 刚、佘兴蓉、王开周、胡黎华。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： —2003年9月18日首次发布为DB50/T142-2003； —本次为第一次修订。 DB50/T142—2023 1马铃薯脱毒种薯繁育技术规程 1范围 本文件规定了病毒脱除、原原种生产、原种繁育、生产种繁殖等操作规程。 本文件适用于马铃薯脱毒试管苗、原原种、原种、生产用种的繁育和生产。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB18133马铃薯种薯 GB/T29375马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程 GB/T29376马铃薯脱毒原原种繁育技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 脱毒试管苗in-virtovirusfreeplantlet 经检测确认不带马铃薯X病毒(PotatovirusX,PVX)、马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)、马铃薯S 病毒(PotatovirusS,PVS)、马铃薯卷叶病毒(Potatoleafrollvirus,PLRV)、马铃薯M病毒（PotatovirusM, PVM）、马铃薯A病毒（PotatovirusA,PVA）和马铃薯纺锤块茎类病毒(Potatospindletuberdisease,PSTVd) 的再生试管苗。 3.2 原原种pre-elite 用脱毒试管苗在温室和防虫网室等隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯。 3.3 原种elite 用原原种作种薯，在隔离蚜虫和病害的良好条件下生产出的符合质量标准的种薯。 3.4 生产用种certifiedseedpotato 用原种作种薯，在隔离蚜虫和病害的良好条件下生产出的符合质量标准的种薯。 4病毒脱除 4.1生产条件 4.1.1车间条件 DB50/T142—2023 2生产车间应遵循方便消毒、减少污染的原则，并满足以下条件： a）周围环境无污染源，与大田生产隔离； b）具有相互隔离的更衣室、清洗室、配药室、灭菌室、接种室、培养室等； c）组培室应具有充足的自然光或人工光源； d）生产环境清洁、干燥。 4.1.2消毒处理 消毒处理操作应符合GB/T29375的要求。 a）接种室、组培室每周定期消毒一次，按照每立方米空间用量，将40%的甲醛溶液10mL迅 速倒入5g高锰酸钾容器内进行熏蒸，密闭1d后，进行通风； b）接种前，超净工作台用紫外灯灭菌20min，超净工作台台面及内壁用75%酒精擦拭消毒； c）操作所用镊子、解剖刀等工具接触植物材料前应灼烧或高温消毒，冷却后使用； d）操作人员需穿消毒工作服，用肥皂洗净双手，带工作手套，操作过程中，手和工作台面要经常 用75%酒精消毒；培养室发现污染及时清除。 4.2脱毒试管苗的培育 4.2.1材料选择 应选用田间具备品种典型性状的健康植株的顶芽或腋芽，作茎尖脱毒材料。 4.2.2培养基制备 茎尖分化培养基：MS+GA30.2mg/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+白糖3%+琼脂0.6%；扩繁 培养基：MS+白糖3%+琼脂0.6%。 4.2.3培养基灭菌 在0.11Mpa/cm2压力下灭菌15min～20min，冷却备用。 4.2.4茎尖剥离接种 将选用的材料放入纱布袋，用自来水冲洗1h后，在无菌条件下用75%酒精中浸30s，再用0.1% 的升汞溶液消毒3min～6min。取出材料后，用无菌水冲洗3次～5次，用灭菌滤纸吸干材料表面 水分。在体视解剖镜下用手术刀剥去幼叶，切取带l个～2个叶原基(0.1mm～0.4mm大小)的生长 点，迅速接入装有茎尖分化培养基的培养瓶中，每瓶接种1个茎尖。做好标注。 4.2.5脱毒试管苗扩繁 对生长到具有7片～8片叶、经检测不带病毒和类病毒的试管苗进行切段扩繁，每个切段至少带 1个叶片。将剪下的切段扦插到扩繁培养基，每瓶放20个切段。培养条件为温度20℃～25℃，光 照时数l2h/d左右，光照强度20001x～30001x。切段长成具有7片～8片叶后，再次切段繁殖。 4.2.6培养条件 温度20℃～25℃，光照时数l2h/d，光照强度20001x～30001x。 4.3病毒检测 DB50/T142—2023 3用酶联免疫吸附测定（ELISA）法进行病毒检测，无病毒的材料送国家法定检验部门复检合格后扩 繁。 4.4品种真实性观察 取出一部分脱毒试管苗移栽到温（网）室内，结出的小薯种植到田间观察是否发生变异，应符合原 品种的典型性状。 5原原种生产 5.1生产条件 应符合GB/T29376要求。 5.2脱毒试管苗扦插 5.2.1基质 宜采用蛭石等作为基质，用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液喷洒消毒。 5.2.2炼苗 将长到7片～8片叶，苗龄20d以上的试管苗炼苗3d～5d。 5.2.3扦插 将炼苗后的脱毒试管苗用镊子轻轻取出，用剪刀切除根部，自来水冲洗干净附着的琼脂，用NAA 溶液50ppm浸泡5min后扦插。 5.3管理 5.3.1水分管理 扦插后在5d～10d内应保持相对湿度90%以上，适当遮阴。在结薯前应适当控水，在结薯期保 证充足的水分，在成熟期减少供水。 5.3.2肥料管理 试管苗生根成活到收获前7d～10d，喷0.2%～0.3%磷酸二氢钾溶液3次～5次。 5.3.3病虫害防治 生产过程中全程进行病虫草害防治。重点防治晚疫病，根据晚疫病预警系统信息，先采用保护剂喷 雾，后采用治疗剂喷雾。保护剂选用75%代森锰锌水分散粒剂，治疗剂选用72%霜脲•锰锌可湿性粉 剂、687.5SC/L氟菌·霜霉威、50%氟啶胺等药剂。生产全程应防治4次～6次，每次间隔7d～10 d，不同治疗剂交替使用，均匀喷雾。 5.4收获 收获前1周应停止营养液和水分的供应，收获时避免损伤和品种混杂。 5.5分级 DB50/T142—2023 4摊晾5d～7d后，严格剔除破损、畸形等非正常薯，按种薯个体重量大小依次分为10g以上、5 g～10g、3g～5g、1g～3g四个等级。 5.6贮藏 按收获期、等级分品种分装，并做好标签。在15℃～20℃的温度下预贮藏5d～7d，然后3℃～ 5℃、相对湿度80%～90%的条件下贮藏。 5.7质量检测 参照GB18133要求对贮藏的原原种质量进行检测。 5.8包装出库 采用清洁透气且具有良好保护的编织袋、网袋或纸箱包装，并贴好标签。 6原种繁育 6.1繁育地条件 选择海拔1200m以上，自然隔离和通风条件好，周围60m无十字花科、茄科植物种植，三年 内未种植茄科作物，土层深厚、结构疏松的沙壤土、交通方便。 6.2播种 6.2.1播前处理 选用通过休眠的原原种做种薯，剔除病薯、烂薯和缺陷薯，播前20d～25d催芽，芽长0.5cm～ 1cm可播种。 6.2.2实时播种 10cm以内土层温度稳定达到8℃以上播种。 6.2.3施肥 重施底肥，每666.7㎡施农家肥1000kg～1500kg，宜用总养分≥40%高钾复合肥 （N:P2O5:K2O=5:2:7）30kg～40kg作底肥；苗高3cm～5cm时，每666.7㎡以清粪水500kg加尿 素5kg～8kg进行追肥；现蕾期每隔7d～10d用0.3%～0.5%磷酸二氢钾进行根外追肥1次～2 次。 6.3田间管理 苗期中耕除草并培土，使垄高达到20cm～25cm。苗期施尿素10kg/667㎡作为齐苗肥；薯块膨 大期追施0.3％～0.5％磷酸二氢钾作为促薯肥。在现蕾期、花期进行除杂，及时拔除病株，杂株及地 下块茎。 6.4病虫害防治 虫害主要防治蚜虫，出苗后10d左右，每7d～10d喷施低毒高效杀虫剂一次，连续3次～4次。 马铃薯晚疫病防治根据晚疫病预警系统信息，先采用保护剂喷雾，后采用治疗剂喷雾。保护剂选用75%