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ICS 67.050 CCS X 62 团 体 标 准 T/ NAIA 0201—2023 葡萄酒中甘油的测定 高效液相色谱法 Determination of Glycerin in wine by HPLC 2023-04-10 发布 2023-04-17 实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0201—2023 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 :宁夏回族自治区食品检测研究院(国家市场监管重点实验室(枸杞和葡萄酒 质量安全) )、宁夏工商职业技术学院、宁夏回族自治区食品质量监督检验二站、宁夏化学分析测 试协会。 本文件主要起草人:汤丽华、辛世华、马桂娟、王皛蕾、龚慧、王泽岚、赵瑞、王琛、赵娟 、 陈盼盼、张小飞。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0201—2023 葡萄酒中甘油的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了葡萄酒中甘油的液相色谱检测方法。 本文件适用于葡萄酒中甘油的定性和定量测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ,仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 5009.8食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 GB/T 15038葡萄酒、果酒通用分析方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 试样中的甘油经超声提取后 ,用高效液相色谱仪测定和确证 ,利用反相色谱柱分离 ,示差折光 检测器检测,以保留时间定性,外标法定量。 5 试剂和材料 本方法所用的试剂,除另有规定外,均为分析纯, 水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1 乙腈:色谱纯。 5.1.4 乙腈溶液 (90+10,体积比):量取10mL水加入90mL乙腈中混匀,微孔滤膜过滤。 5.2 标准品 5.2.1标准品:甘油( Glycerol,CAS号56-81-5,C3H8O3),纯度 ≥99%。 5.2.2标准储备液( 80.0mg/mL ):准确称取 2.0g的标准品, 用水溶解并定容至 25mL,4℃保存。 5.2.3标准工作液 :分别吸取 标准储备液 0.5mL,1.0mL,1.5mL,2.0mL,2.5mL,5.0m L用水定容 至10.0mL,制成最终浓度为 :4.0mg/mL 、8.0mg/mL 、12.0mg/mL 、16.0mg/mL 、20.0mg/mL 、40.0mg/m L 标准系列工作溶液,临用现配。 6 仪器和设备 6.1 高效液相色谱仪 (HPLC):带示差折光检测器。 6.2 分析天平: 感量 0.1mg。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0201—2023 6.3 高速离心机:转速 ≥4000r/min 。 6.4 超声波清洗器。 6.5 水相型微孔滤膜: 孔径 0.45m。 7 分析步骤 7.1试样制备 取代表性样品摇匀分装,密闭常温或冷藏保存。 7.2试样的提取 吸取试样 10.0mL置于 50mL容量瓶中, 加水 30mL超声 10min,用水定容至刻度,充分摇匀 , 4000r/min 离心 5min,上清液经 0.45m微孔滤膜过滤后,上机待测。 7.3仪器参考条件 7.3.1 色谱柱:氨基色谱柱, 4.6*250mm ,5m,或具有同等性能的色谱柱。 7.3.2 流动相:乙腈 +水=90+10(体积比)。 7.3.3 流速: 1.0mL/min 。 7.3.4 示差折光检测器条件: 40℃。 7.3.5 进样量: 20L。 7.3.6 柱温: 40℃。 7.4校准曲线的制作 将标准工作液 按浓度由低到高的顺序各取 20L分别注入液相色谱仪,测定相应的峰面积,以 标准工作液的质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制校准曲线。 7.5试样溶液的测定 将试样溶液注入液相色谱仪中 ,以保留时间定性 ,得到峰面积 ,根据校准曲线得到待测液中甘 油的质量浓度。在上述条件下,甘油 的色谱图参见附录 A。 8 分析结果的表述 试样中甘油含量按式( 1)进行计算: 式中: X ──样本中甘油含量,单位为克每升( g/L); C ──测定溶液浓度,单位为克每升( g/L); V ──试样定容体积,单位为毫升( mL); m ──试样体积,单位为毫升( mL)。 注:测定结果用平行测定的算数平均值表示,保留三位有效数字。 9 精密度 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。 )( 1 mV CX 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0201—2023 10 定量限 当取样量为 10.0mL时,甘油的定量限为 0.2g/L。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0201—2023 附录 A (资料性附录 ) 甘油的色谱图 图A.1 甘油的色谱图 全国团体标准信息平台
T-NAIA 0201—2023 葡萄酒中甘油的测定 高效液相色谱法
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