ICS 67.050 CCS X 62 团 体 标 准 T/ NAIA 0199—2023 葡萄酒软木塞中愈创木酚、 2,4,6-三氯 苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的测定 气相色谱 /质谱法 Optimization of Headspace Solid-Phase Microextraction Coupled to GC/MS for the Determination of guaiacol,2,4,6-trichloroanisole and 2,4,6-tribromoanisole in Wine Corks 2023-04-10发布 2023-04-17实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0199—2023 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定 编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位 ：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监管重点实验室（枸杞和葡萄酒 质量安全） ）、宁夏工商职业技术学院、宁夏回族自治区食品质量监督检验二站、宁夏计量质量检 验检测研究院、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人 ：汤丽华、李谦、刘继辉、章伟、岳娜、马桂娟、高琳、辛世华、赵瑞、王 琛、陈盼盼、王泽岚、张小飞。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0199—2023 葡萄酒软木塞中愈创木酚、 2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯 甲醚的测定 气相色谱 /质谱法 1 范围 本文件规定了葡萄酒软木塞中愈创木酚 、2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的气相色谱质 谱检测方法。 本文件适用葡萄酒软木塞中愈创木酚 、2,4,6-三氯苯甲醚和 2,4,6-三溴苯甲醚的定性和定量测 定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法 SN/T 3940食品接触材料 木质材料 软木中三氯苯甲醚和三溴苯甲醚的测定 气相色谱 -质谱法 SN/T 4675.13出口葡萄酒中 2,4,6-三氯苯甲醚残留量的测定 气相色谱 -质谱法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 试样经乙醇溶液超声提取 ，经高温萃取后顶空固相微萃取进行富集 ，色谱柱分离 ，用气相色谱 -质谱仪测定，特征离子定性，内标法 /外标法定量。 5 试剂和材料 本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯， 水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1 乙醇：色谱纯。 5.1.2 甲醇：色谱纯。 5.1.3 氯化钠：分析纯。 5.1.4 乙醇溶液（ 6+44，体积比）： 准确量取 60mL无水乙醇， 加入 440mL水，混匀。 5.2 标准品 5.2.1标准品：愈创木酚（guaiacol，CAS号90-05-1，C7H8O2）、2,4,6-三氯苯甲醚 （2,4,6-trichloroanisole ， CAS号87-40-1，C7H5Cl3O）、 2,4,6-三溴苯甲醚（ 2,4,6-tribromoanisole ，CAS号607-99-8 ， C7H5Br3O）、 2,4,6-三氯苯甲醚 -D5(2,4,6-trichloroanisole-D 5，CAS号352439-08-8 ，C7Cl3O-D 5)，纯 度均 ≥99%。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0199—2023 5.2.2混合标准储备液 ：准确称取适量的标准品 ，用甲醇配制成浓度为 1000. 0mg/L的标准储备溶液 ，-18 ℃保存。 5.2.3 混合标准工作液：根据需要，用乙醇溶液（ 5.1.4）配制适当浓度的标准工作液，临用现配。 6 仪器和设备 6.1 气相色谱 -质谱联用仪 (GC/MS) 。 6.2 分析天平： 感量 0.1mg和0.01g。 6.3 固相微萃取头： 100μ m聚二甲基硅氧烷。 6.4 固相微萃取瓶： 15mL。 6.5 数显恒温磁力搅拌器：可温控。 6.6 超声波清洗器。 6.7 磁力搅拌子： 1.5cm。 7 分析步骤 7.1 试样制备 取代表性样品 50g，将其制成粒径约为 10mm的颗粒，混匀。 7.2 试液的提取 称取试样 2.0 g（精确到 0.01g）置于锥形瓶中，加入乙醇溶液（ 5.1.4）30mL使其浸没在液面以 下，超声提取 30min，浸泡 24小时，提取液待测。 取10mL软木塞提取液置于萃取瓶中 ，加入 10μg/mL的内标使用液 50μL和3g氯化钠，放入磁 力搅拌子后拧紧瓶盖在涡旋混合器上混匀 （内标上机浓度为 50ng/L），置于 40℃的数显恒温磁力搅 拌器中， 保持 5min后用固相微萃取手柄的保护针管刺穿瓶盖橡胶垫，插入萃取瓶内顶空中，推出 萃取头置于溶液上方 。控制萃取温度为 40℃，萃取 40min后收回萃取头拔出保护针管 ，插入气相色 谱仪进样口解吸 5min，按仪器工作条件进行测定，愈创木酚采用外标法定量， 2,4,6-三氯苯甲醚、 2,4,6-三溴苯甲醚采用内标法定量。 7.3仪器参考条件 7.3.1 气相色谱参考条件 7.3.1.1 色谱柱： HP-5MS，柱长： 30 m；内径： 0.25 mm；膜厚： 0.25μ m或性能相当。 7.3.1.2 进样口温度： 280℃。 7.3.1.3 程序升温： 初始柱温 50℃，保持 2 min；以9℃/min升温至 130℃，保持 1min；再以 4℃/min 升温至 150℃,保持 0min；最后以 20℃/min升温至 260℃，保持 10min。 7.3.1.4 进样方式：不分流进样。 7.3.1.5 进样量： 1μL。 7.3.2 质谱参考条件 7.3.2.1 电离方式：电子轰击电离源 (EI)。 7.3.2.2 传输线温度： 250℃。 7.3.2.3 离子源温度： 230℃。 7.3.2.4 电子能量： 70eV。 全国团体标准信息平台 T/NAIA 0199—2023 7.3.2.5 监测方式：选择离子扫描 (SIM)。监测离子参见附录 A。 7.4 定量测定 根据试液中被测物含量情况 ，选定浓度相近的混合标准工作液 ，混合标准工作液和待测试液中 被测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。 混合标准工作液和待测试液均按 7.2和7.3规定条 件进行测定 ，如果试液中与混合标准工作液在相同的保留时间有峰出现 ，则对其进行确证 ，愈创木 酚、2,4,6-三氯苯甲醚 、2,4,6-三溴苯甲醚 的参考保留时间见表 1。愈创木酚 、2,4,6-三氯苯甲醚 、 2,4,6-三溴苯甲醚 标准品的总离子流图参见附录 B，内标法 /外标法定量。 表1参考保留时间 被测物名称 保留时间 /（min） 愈创木酚 7.854 2,4,6-三氯苯甲醚 12.529 2,4,6-三溴苯甲醚 18.487 7.5 定性测定 经确证分析被测物色谱峰保留时间与标准物质相一致 ，并且在扣除背景后的样品谱图中 ，所选 择的离子均出现 。同时所选择离子的丰度比与标准样物质相关离子的相对丰度一致 ，相似度在允许 偏差之内， 见表 2，则可判定样品中存在对应的被测物。 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ＞50％ ＞20％至 50％ ＞10％至 20％ ≤