ICS65.020.30 CCSA0311 NAASS 宁夏回族自治区农学会团体标准 T/NAASS056—2023 规模化肉牛场牛支原体病诊断与防治技术 规程 Technicalregulationsfordiagnosis,preventionandtreatmentofMycoplasmosis bovisinlarge-scalebeefcattlefarms 2022-03-22发布 2023-04-25实施 宁夏回族自治区农学会  发布 全国团体标准信息平台 T/NAASS056—2023 I前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 专利免责声明：本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由宁夏回族自治区科学技术厅提出。 本文件由宁夏回族自治区农学会归口。 本文件起草单位：宁夏农林科学院动物科学研究所、宁夏大学、宁夏回族自治区畜牧工作站、宁夏 回族自治区动物疾病预防控制中心、宁夏回族自治区兽药饲料监察所。 本文件起草人：郭亚男、何生虎、王建东、李知新、梁小军、李昕、杨萌萌、闫背背、李继东、曹 晓真、黎玉琼、邵倩、白涛涛、李勇、祁燕蓉、张慧宁、谢建亮、刘维华、毛磊、施安、周海宁、陈秀 红、康晓冬、高海慧、张久盘、封元、蒋秋斐、历龙。 全国团体标准信息平台 T/NAASS056—2023 2规模化肉牛场牛支原体病诊断与防治技术规程 1范围 本文件规定了规模化肉牛场牛支原体病诊断与防治技术的术语和定义、诊断、预防和治疗。 本文件适用于规模肉牛场牛支原体病的防治。其他肉牛场参照执行。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 NY/T3234牛支原体PCR检测方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 牛支原体病Mycoplasmosisbovis 是指由牛支原体引发牛的一种呈现多种临床表现的传染病。 3.2 胸膜肺炎样微生物培养基pleuropnenmonia-likeorganismmediumPPLO 即支原体培养基，主要用于多种支原体的分离和培养。 4诊断 4.1流行病学 牛支原体主要感染肉牛和奶牛。长途运输、饲养环境变化、气候变化等因素可诱发牛支原体病的发 生。感染牛作为传染源可通过呼吸道、乳汁传播病原。 4.2临床症状 肺炎型：体温升高、咳嗽、呼吸困难、口鼻有浆液性或脓性分泌物。 关节炎型：膝关节肿大、跛行。 乳腺炎型，乳房充血、肿大、凝乳。 结膜炎型：羞明流泪、结膜发红、角膜和结膜外凸、失明。 4.3病理变化 胸腔和心包积液增多，肺脏黏连，实质性肉变和灰白色干酪样或化脓性坏死灶。关节腔内有淡黄色 或浓稠积液。 4.4样本采集 肺炎型：按照NY/T3234执行。乳腺炎、关节炎和结膜炎型分别采集乳汁、关节液、眼部分泌物至 无菌试管中，冷藏保存。如果24h内不能送达实验室，-20℃保存。样品解冻时，置于38℃～40℃水 浴解冻。 4.5分离培养 全国团体标准信息平台 T/NAASS056—2023 3牛支原体液体培养基配制见附录A.1，牛支原体固体培养基配制见附录A.2，实验用水应符合GB/T 6682规定。 肺组织表面消毒后，取一小块病变和正常组织交界处深层肺组织，鼻拭子、乳汁、关节液样品经0.45 μm滤膜过滤后，接种牛支原体固体培养基，置于37℃、5%CO2恒温培养箱中培养1d～2d后，可观 察到“煎蛋样”菌落，见附录B.1。该菌落接种牛支原体液体培养基中，置于恒温摇床中37℃，220r/min 培养1d～2d，培养液由红色变成黄色。 4.6电镜观察 扫描电镜下呈现微小针尖状形态,见附录B.2。透射电镜下呈球形、椭圆形及不规则多边形，菌株胞 浆中可见大量的核糖体，菌株表面可见完整清晰的细胞膜，无细胞壁，见附录B中图B.3。 4.7PCR鉴别诊断 按照NY/T3234执行。 4.8结果判定 符合4.1、4.2和4.3的特征判断为疑似病例。 同时符合4.4、4.5、4.6或4.7的特征判断为确诊病例。 5预防和治疗 5.1预防 加强饲养及环境卫生管理，定期消毒，定期监测。不从疫区或发病区引进牛。牛群引进后应隔离观 察并采取应激预防措施，确保无病后方可混群。育肥牛群采用全进全出制度，在空栏期要对牛舍进行彻 底消毒。 5.2治疗 5.2.1单一药物治疗 泰拉霉素注射液或加米霉素注射液，使用剂量参照说明书。 5.2.2西药组合药物治疗 酒石酸泰乐菌素注射液或盐酸多西环素注射液，联合硫酸卡那霉素注射液或氟苯尼考注射液，使用 剂量参照说明书。 5.2.3中西药联合用药治疗 可使用5.2.1配合麻杏石干散饮水或拌料，使用剂量参照说明书。 全国团体标准信息平台 T/NAASS056—2023 4附录A （规范性附录） 支原体培养基配制 A.1牛支原体液体培养基 PPLO肉汤粉21g，酵母粉2.5g，丙酮酸钠1g，葡萄糖0.2g溶于800mL双蒸水中，121℃高压 灭菌20min后，添加马血清200mL，8万单位青霉素0.1g，0.05%酚红1mL，4℃保存。 A.2牛支原体固体培养基 PPLO琼脂粉30g，酵母粉2.5g，丙酮酸钠1g，葡萄糖0.2g溶于800mL双蒸水中，121℃高压 灭菌20min后，添加马血清200mL，8万单位青霉素0.1g，0.05%酚红1mL，4℃保存。 全国团体标准信息平台 T/NAASS056—2023 5附录B （规范性附录） 牛支原体形态特征 B.1牛支原体菌落形态 图B.1牛支原体菌落形态 B.2牛支原体扫描电镜菌体形态 图B.2牛支原体扫描电镜菌体形态 B.3牛支原体透射电镜菌体形态 图B.3牛支原体透射电镜菌体形态 全国团体标准信息平台