ICS 65.020.30 CCS B43 53 云南省 地方标准 DB53/T 1167.1—2023 异种移植医用供体猪 第1部分：遗传质量控制 2023 - 04 - 25发布 2023 - 07 - 25实施 云南省市场监督管理局 发布 DB53/T 1167.1 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是 DB53/T 1167-2023《异种移植医用供体猪》的第 1部分。DB53/T 1167-2023已经发布了以 下部分： —— 第1部分：遗传质量控制； —— 第2部分：微生物学和寄生虫学等级及监测； —— 第3部分：病理学诊断规范； —— 第4部分：环境及设施。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由云南农业大学提出。 本文件由云南省农业标准化技术委员会（ YNTC07）归口。 本文件起草单位：云南农业大学。 本文件主要起草人：魏红江、 王配、赵红业、成文敏、贾宝瑜、徐凯祥、李鸿辉、角德灵。 DB53/T 1167.1 —2023 III 引言 “异种器官移植 ”即将人类以外物种的器官移植到人体内，延续人的生命，被认为是解决人类器官 短缺最为有效的方法之一。异种移植医用供体猪与人类器官结构大小、生理生化、解剖特征接近，生长 周期较短，繁殖能力高，涉及伦理学障碍相对较少，易于利用基因编辑技术克服异种器官移植免疫排斥 反应，可被大规模生产等优点，自上世纪 90年代开始 被认为是 异种器官移植最理想的供体。 为了对异种移植医用供体猪生产进行指导和规范化生产，编制并发布 DB53/T 1167《异种移植医用 供体猪》地方标准，从遗传质量控制、微生物学和寄生虫学等级及监测、病理 学诊断规范、环境 及设施 等环节指导和规范异种移植医用供体猪生产， 可让从事异种移植医用供体猪生产相关人员按标准化和规 范化程序开展异种移植医用供体猪养殖，带动异种移植医用供体猪规范化、标准化和产业化发展，利于 大健康产业创新发展和惠及末期器官衰竭患者。 DB53/T 1167由四个部分构成。 ——第1部分：遗传质量控制。目的在于确立异种移植医用供体猪的命名、繁殖和遗传质量监测。 ——第2部分：微生物学和寄生虫学等级及监测。目的在于确立异种移植医用供体猪微生物学和寄 生虫学的 等级分类、检测规则、检测程序和指标、检测方法 、结果判定和判定结论 等技术要求。 ——第3部分：病理学诊断规范。目的在于确立异种移植医用供体猪的病理学检查的内容和方法， 包括括检查规则、检查程序、临床病理学检查、解剖病理学检查、病理学诊断报告和检查结论 等方面的 技术要求。 ——第4部分：环境及设施。目的在于确立异种移植医用供体猪对设施、环境条件的技术要求，环 境条件及设施设计、施工、工程验收及经常性监督管理，同时规定了对饮水和笼具的要求 。 DB53/T 1167.1 —2023 1 异种移植医用供体猪 第1部分：遗传质量控制 1 范围 本部分规定了异种移植医用供体猪的命名、繁殖和遗传质量监测。 本部分适用于异种移植医用供体猪的遗传质量控制。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 14923 实验动物 遗传质量控制 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 异种移植医用供体猪 Medical grade donor pig for xenotransplantation 选择遗传背景明确的人工培育的实验猪只，利用基因编辑技术，针对异种移植后移植物在受体体内 不同阶段的免疫排斥反应，选择可以引起超急性 /急性免疫排斥，以及参与调节补体系统、凝血功能， 控制感染等的关键基 因（以下简称 “异种移植关键基因 ”）加以修饰，制备适合不同细胞、组织和器官 的异种移植医用供体猪，用于医用异种移植供体、科学研究、教学、生产和质量控制鉴定以及其他科学 实验的基因编辑猪。 4 命名 按照GB 14923中遗传修饰动物命名规则执 行。 5 繁殖 原则 保持异种移植医用供体 猪基因修饰的稳定性以及在后代的稳定遗传。 引种 作为繁殖用种 猪的异种移植医用供体猪必须遗传背景明确或来源清楚，有完整的遗传背景档案（包 括种群名称、来源、遗传基因特点及主要生物学 特征等）， 不携带世界卫生组织（ World Health Organization ，WHO）指定供体动物应排除的潜在感染或条件致病和感染性人畜共患病病原，且所修饰 的异种移植关键基因稳定。 DB53/T 1167.1 —2023 2 建系 5.3.1 同一基因修饰类型的 纯合子异种移植医用供体猪公母个体进行交配，获得相同基因修饰的异种 移植医用供体猪群体。 5.3.2 或将基因修饰的异种移植医用供体猪与野生型猪交 配， 筛选 F1代中基因修饰的杂合子进行交配 获得F2代，获得 F2代中与亲代相同基因修饰的个体，进行组群建系。 5.3.3 或不同基因修饰类型的异种移植医用供体猪公母个体进行交配，获得不同基因修饰的异种移植 医用供体猪群体，并根据异种移植需求设计新的不同基因修饰组 合。 方法 具体繁殖方法 按照GB 14923 执行。 6 遗传质量监测 抽样 6.1.1 按表1要求随机抽取异种移植医用供体猪 进行检测 。 6.1.2 异种移植医用供体猪在开展异种移植手术前 均应进行检测 。 表1 异种移植医用供体猪遗传检测抽样要求 群体规模（ N头） 抽样数量 （N头） N＜100 ≥5 100≤N＜500 ≥10 N≥500 ≥20 检测方法 通过PCR、测序、流式细胞术、免疫组化和免疫印迹等检测方法 对所修饰的 异种移植关键基因 进行 检测，以确认修饰基因在异种移植医用供体猪的表达。 具体检测方法可参 见附录A和附录B。 结果判定 见表2。 表2 异种移植医用供体猪遗传质量检测结果判定 检测结果 判 定 在个体基因组中，所修饰的异种移植关键基因与预期的插入或缺失基因型一致，且达到预期 表达水平 未发生遗传变异 在个体基因组中，所修饰的异种移植关键基因与预期的插入或缺失基因型不一致；或所修饰 的异种移植关键基因与预期的插入或缺失基因型一致，但是未能达到预期表达水平 发生遗传变异 判定结论 所有样品检测的基因都符合预期所修饰基因的遗传质量检测标准， 则判定该异种移植医用供体猪合 格。否则判为不合格。