ICS65.020.20 CCSB31 54 西藏自治区地方标准 DB54/T0086—2023 代替DB54/T0086-2015 脱毒马铃薯种薯生产技术规程 2023-07-01发布 2023-08-02实施 西藏自治区市场监督管理  发布 DB54/T0086—2023 I目次 前言..................................................................................II 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4脱毒组培苗生产......................................................................2 5原原种的生产........................................................................3 6原种生产............................................................................4 附录A（规范性）MS培养基贮备液的成分表...............................................6 附录B（规范性）马铃薯常见病虫害及防治技术............................................7 DB54/T0086—2023 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替DB54/T0086-2015《脱毒马铃薯种薯生产技术规程》，与DB54/T0086-2015相比， 除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下： ——修改了原标准中的“培养条件”内容（见4.2.4）。 ——修改了原标准中的“接种”内容（见4.3.2）。 ——修改了原标准中的“炼苗”内容（见5.2.1）。 ——修改了原标准中的“移栽”内容（见5.2.1）。 ——修改了原标准中的“单行起垄种植”内容（见6.3.1）。 ——修改了原标准中的“中耕培土”内容（见6.4.2）。 ——修改了原标准中的“包装”内容（见5.4.2）。 ——修改了原标准中的“贮存”内容（见5.4.3）。 ——修改了原标准中的“琼脂用量”内容（见附录A）。 本文件由西藏农牧业标准委员会提出。 本文件由西藏农牧业标准委员会归口。 本文件起草单位：西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所 本文件主要起草人：许娟妮、曾钰婷、祁驰恒、尼玛卓嘎、李淑萍、黄鹏程 本规程历次版本发布情况：DB54/T0086-2015 DB54/T0086—2023 1脱毒马铃薯种薯生产技术规程 1范围 本文本规定了马铃薯脱毒苗的培育、繁育、种薯的生产、扩繁栽培和各级脱毒种薯的检验、收获、 贮藏的生产技术操作规程。 本文本适用于脱毒马铃薯种薯生产。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB181332012马铃薯脱毒种薯 GB/T31001有关量、单位和符号的一般原则 GB7331马铃薯种薯产地检疫规程 NY/T1606-2008马铃薯种薯生产技术操作规程 DB54/T0028马铃薯生产技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 脱毒组培苗 脱毒苗是应用茎尖组织培养技术获得的，经检测确认不带马铃薯卷叶病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯X 病毒、马铃薯A病毒、马铃薯M病毒或马铃薯S病毒等和马铃薯纺锤块茎类病毒的再生试管苗，经过组织 培养方法大量扩繁的且不带上述病毒和类病毒用于生产原种的试管苗。 3.2 试管薯 脱毒苗经诱导培养，直接在试管（瓶）内结的小薯。 3.3 MS培养基 MS是人名MurashigeandSkoog的缩写，MS培养基是目前使用最普遍的培养基，它能够保证组织生 长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长，多数植物组织培养快速繁殖用它作为基本培养基。 3.4 脱毒种薯 从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加种薯数量的种薯生产体系生产出来的各级种薯。 脱毒种薯分为原原种、原种、生产用种薯。 3.4.1 原原种 DB54/T0086—2023 2用育种家种子、脱毒组培苗或试管薯在防虫网等隔离条件下生产，经质量检测符合GB18133的，用 于原种生产的种薯。 3.4.2 原种 用用原原种做种薯、在良好隔离条件下生产的符合GB18133质量标准的种薯。 3.4.3 生产用种 用原种做种薯，在隔离条件下生产出的符合一级种薯标准的种薯。 3.5 隔离栽培 在与病虫害隔离的防虫网下进行的栽培方式。 3.6 扩繁栽培 1克以上脱毒原原种直接种入大田，采取调节播种期、喷药防虫、剔除病、杂株等综合保护措施， 生产脱毒原种的种植方式。 4脱毒组培苗生产 4.1脱毒组培苗的培育 4.1.1选材 选用生产上主栽的优良品种块茎的休眠芽或刚出土幼苗的茎尖、或田间成株上的叶芽做茎尖剥离材 料。 4.1.2培养基的制备 按附录A的配制每1000毫升的MS培养基中加入GA3(0.2mg)；6-BA（0.1mg）；NAA（0.01mg）,分装入 瓶。 4.1.3灭菌 在0.15Mpa/cm2压力下对培养基、操作工具等灭菌30min。 4.1.4茎尖剥离接种 将材料放入纱布袋，先用自来水冲洗30min后放入75%酒精中㓎5s，再用0.1%升汞消毒5-10min，取 出用无菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸干材料表面水分，然后在无菌条件操作，用解剖镜下、手术刀等工 具轻、准、快的剥去幼叶，切取带1-2个叶原基的生长点，迅速接入装有茎尖分化培养基的培养瓶中， 每瓶放一个生长点，注明品种、接种日期等。 4.1.5培养条件 日温25℃，夜温15℃，光照时数12h/d，光照强度2000lx-3000lx条件下培养25d左右。 4.1.6病毒检测 脱毒苗送国家法定质检部门与标准检测中心检测认定。 用于检测的数量不低于总数的10%，如果脱毒苗没有检测出马铃薯卷叶病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯 X病毒、马铃薯A病毒、马铃薯M病毒或马铃薯S病毒等和马铃薯纺锤块茎类病毒，则进行组培苗生产，不 合格的脱毒苗不得用于组培快繁。 4.2脱毒组培苗扩繁 4.2.1脱毒组培苗来源 DB54/T0086—2023 3经病毒检测，去除所含上述病毒的组培苗。 4.2.2培养基 用MS培养基。灭菌同4.1.3。 4.2.3快繁 将脱毒苗剪切1厘米左右，带一叶一芽的茎段接种在继代培养基上，每瓶培养基上接种8个茎段。待 茎段长成10cm左右的小苗，进行转接。 4.2.4培养条件 培养温度20℃±2℃，光照时数10h/d，光照强度2500lx条件下培养一个月。 4.3脱毒组培苗的保存 4.3.1培养基 MS+B9（10mg/l）+甘露醇（40mg/l）+琼脂（700mg/l）+白糖（3000mg/l）。灭菌同4.1.3 4.3.2接种 选继代培养中生长健壮的组培苗，进行茎段扦插切段，每瓶接种20个。 4.3.3培养 置弱光（1000lx）和较低的温度（5℃-10℃）下培养。 5原原种的生产 5.1隔离网室的建立 5.1.1环境条件 选择四周无高大的建筑物、水源、电源、交通便利，通风透光的地方建网室。 5.1.2建设要求 隔离网室用热渡锌管作支撑，网室内地表及网室四周内，应建成水泥地面，网室周围范围内不能有 其他可能成为马铃薯病虫害侵染源或可能成为蚜虫寄主的植物。严防网室内地表积水和网室外水流入。 用于隔离的网纱孔径要达到60目-80目。 5.2播前准备 5.2.1炼苗 将长到8片叶子，苗龄30d左右的组培苗打开瓶盖。炼苗3d-5d天。 5.2.2基质 市场上购买的马铃薯专用育苗基质。 5.2.3移栽 将试管苗根上的培养基清洗干净，每窝定株2棵，行距10cm，株距10cm。 5.3播种 5.3.1拱棚盖膜 试管苗移栽完后，轻细均匀洒水，使基质充分饱和吸水，及时拱棚盖膜，拱棚内相对湿度保持在95%。 5.3.2施肥 从小苗生根成活后及时去掉拱棚，根据苗情喷施0.2%N:P:K=2:1:3的营养液3次。 5.3.3浇水 勤浇、细浇、少浇，保持基质湿润，持水量在50%，收获前一周停止浇水。 5.3.4病虫害防治 马铃薯原原种病虫害防治对象和方法按DB54/T0028执行。 DB54/T0086—2023 45.4收获、包装、贮存 5.4.1收获 根据茎叶三分之二变黄为成熟期，收获时避免机械损伤和品种混杂，收获摊晾5d，剔除烂薯、病薯、 伤薯及杂物。 5.4.2包装 包装采用尼龙网袋包装，按大小分级包装，做好标记，双标签，袋内袋外各一个，装袋不超过网袋 容积的三分之二。 5.4.3贮存 根据当地气候，种薯生产量、收获期，设备条件等，将种薯置于低温室内避光贮藏。在温度3℃-5℃， 相对湿度90%的条件下贮藏。