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(19)国家知识产权局 (12)实用新型专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202222555216.7 (22)申请日 2022.09.22 (73)专利权人 英脉生物医药 (杭州) 有限公司 地址 310000 浙江省杭州市钱塘新区下沙 街道和享科技中心 9幢2层 (72)发明人 徐岩 赵海伟 潘曼曼 徐志豪 樊鹏程 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 宋家会 (51)Int.Cl. C12M 1/12(2006.01) C12M 1/02(2006.01) C12M 1/38(2006.01) C12M 1/00(2006.01)C12R 1/19(2006.01) (54)实用新型名称 用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液 预处理装置 (57)摘要 本实用新型涉及重组蛋白纯化技术领域, 具 体涉及一种用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白 发酵液预处理装置。 用于重组大肠杆菌表达系统 的蛋白发酵液预处理装置, 包括缓冲液存储容 器、 可调节温度的发酵液存储容器、 切向流过滤 装置和功能储存容器; 缓冲液存储容器通过第一 管路与可调节温度的发酵液存储容器相连通; 第 一管路上设置第一泵体; 可调节温度的发酵液存 储容器与切向流过滤装置之间连通设置有第二 管路和回流管路; 第二管路上设置有第二泵体; 切向流过滤装置通过第三管路与功能储存容器 相连通; 切向流过滤装置的内部设置超滤膜包。 该装置可依次连续完成发酵液缓冲液置换, 高温 细胞破碎和含有目的蛋白的上清液/包涵体收 集, 简化流程并提高效率。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 218058999 U 2022.12.16 CN 218058999 U 1.用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特征在于, 包括缓冲液存 储容器、 可调节温度的发酵 液存储容器、 切向流过 滤装置和功能储 存容器; 所述缓冲液存储容器通过第 一管路与所述可调节温度的发酵液存储容器相连通; 所述 第一管路上设置第一泵体; 所述可调节温度的发酵液存储容器与所述切向流过滤装置之间连通设置有第二管路 和回流管路; 所述第二管路上设置有第二泵体; 所述切向流过 滤装置通过第三管路与所述功能储 存容器相连通; 所述切向流过 滤装置的内部设置有超滤膜包。 2.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述缓冲液存 储容器包括烧杯、 存 储瓶、 存储袋、 不锈钢桶和储液 罐中的至少一种。 3.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述可调节温度的发酵 液存储容器包括储 存容器本体结构和可调温度搅拌器。 4.根据权利要求3所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述储 存容器本体结构包括烧杯、 存 储瓶和发酵 罐中的至少一种; 所述可调温度搅拌器包括温控组件和搅拌组件。 5.根据权利要求3所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述储存容器本体结构为存储瓶或发酵罐; 所述储存容器本体结构的顶端设置有 第一预留接口、 第二预留接口和取样接口; 所述切向流过滤装置包括切向流过滤装置进口端、 切向流过滤装置回流端和切向流过 滤装置透过端; 所述第一预留接口与所述第一管路相连通; 所述第二预留接口通过 所述回流管路与所述切向流过 滤装置回流端相连通; 所述取样接口通过 所述第二管路与所述切向流过 滤装置进口端相连通; 所述切向流过 滤装置透过端与所述功能储 存容器相连通。 6.根据权利要求5所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述第二管路的进液端口靠 近所述储 存容器本体结构的内部底面。 7.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述超滤膜包为截留分子量大于或等于10 00KD的超滤膜包。 8.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述功能储 存容器包括废液储 存容器和/或样品收集 容器。 9.根据权利要求8所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述废液储 存容器包括烧杯、 存 储瓶、 存储袋、 不锈钢桶和储液 罐中的至少一种; 所述样品收集 容器包括烧杯、 存 储瓶、 存储袋、 不锈钢桶和储液 罐中的至少一种。 10.根据权利要求8所述的用于重组大肠杆菌表达系统 的蛋白发酵液预处理装置, 其特 征在于, 所述废液储 存容器和样品收集 容器的个数分别为 一个或者多个。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 218058999 U 2用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装 置 技术领域 [0001]本实用新型涉及重组蛋白纯化技术领域, 具体而言, 涉及一种用于重组大肠杆菌 表达系统的蛋白发酵 液预处理装置。 背景技术 [0002]大肠杆菌是第一个用于重组蛋白生产的宿主细胞, 它有着遗传背景清 晰、 培养操 作简单、 生产繁殖快、 成本低廉, 可以快速大规模生产目的蛋白等优点, 使目前应用最广的 重组蛋白表达系统。 [0003]目的蛋白在大肠杆菌的主要表达方式主要包括胞内可溶性表达、 包涵体表达和细 胞周质空间表达等几种。 大部 分重组蛋白在大肠杆菌中的表达方式都以胞内可溶或包涵体 为主, 抗体片段如Fab、 scFv等大都通过信号肽表达在细胞周质空间。 目的蛋白在正式进入 下游纯化工艺之前都需要对发酵液进 行预处理。 而预 处理效率的高低对下游纯化的收率有 着较大的影响。 [0004]传统发酵液处理过程主要步骤包括发酵液转移 收集‑菌体细胞离心 收集‑菌体缓 冲液重悬 ‑菌体高压均质破碎 ‑离心收集上清/包涵体, 中间涉及样品转移和离心等多个不 连续处理过程, 工艺相对复杂。 [0005]有鉴于此, 特提出本实用新型。 实用新型内容 [0006]本实用新型的一个目的在于提供一种用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液 预处理装置, 以解决传统大肠杆菌发酵 液预处理工艺流程复杂, 步骤多, 效率低的问题。 [0007]为了实现本实用新型的上述目的, 特采用以下技 术方案: [0008]用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置, 包括缓冲液存储容器、 可 调节温度的发酵 液存储容器、 切向流过 滤装置和功能储 存容器; [0009]所述缓冲液存储容器通过第一管路与所述可调节温度的发酵液存储容器相连通; 所述第一管路上设置第一泵体; [0010]所述可调节温度的发酵液存储容器与所述切向流过滤装置之间连通设置有第二 管路和回流管路; 所述第二管路上设置有第二泵体; [0011]所述切向流过 滤装置通过第三管路与所述功能储 存容器相连通; [0012]所述切向流过 滤装置的内部设置有超滤膜包。 [0013]在一种实施方式中, 所述缓冲液存储容器包括烧杯、 存储瓶、 存储袋、 不锈钢桶和 储液罐中的至少一种。 [0014]在一种实施方式中, 所述可调节温度的发酵液存储容器包括储存容器本体结构和 可调温度搅拌器。 [0015]在一种实施方式中, 所述储存容器本体结构包括烧杯、 存储瓶和发酵罐中的至少 一种。说 明 书 1/6 页 3 CN 218058999 U 3
专利 用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置
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