书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜２ ２ ０ ６．１—２ ０ １ ６ 代替Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６． １ —２ ０ ０ ８ 化妆品微生物检验方法第１部分：沙门氏菌 犕 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犿 犻 犮 狉 狅 犫 犻 狅 犾 狅 犵 狔犲 狓 犪 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犳 狅 狉犮 狅 狊 犿 犲 狋 犻 犮 狊 —犘 犪 狉 狋１：犛 犪 犾 犿 狅 狀 犲 犾 犾 犪 ２ ０ １ ６０ ３０ ９发布 ２ ０ １ ６１ ００ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.书书书中华人民共和国出入境检验检疫行　业　标　准 化妆品微生物检验方法 第１部分：沙门氏菌 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６． １ —２ ０ １ ６ 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京市朝阳区和平里西街甲 ２号（１ ０ ０ ０ ２ ９） 北京市西城区三里河北街 １ ６号（１ ０ ０ ０ ４ ５） 总编室： （０ １ ０）６ ８ ５ ３ ３ ５ ３ ３ 网址ｗｗｗ． ｓｐｃ ． ｎ ｅ ｔ ． ｃ ｎ中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本８ ８ ０×１ ２ ３ ０ １ ／１ ６　印张０． ７ ５　字数１ ８千字 ２ ０ １ ６年９月第一版 　２ ０ １ ６年９月第一次印刷 印数１—１１ ０ ０ 书号：１ ５ ５ ０ ６ ６·２  ３ ０ ４ ６ ０ 　定价１ ６．０ ０元 rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.书书书前　　言 　　Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６《化妆品中微生物检验方法 》共分为１ ３个部分： — — —第１部分：沙门氏菌 ； — — —第２部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌 ； — — —第３部分：肺炎克雷伯氏菌 ； — — —第４部分：链球菌； — — —第５部分：肠球菌； — — —第６部分：破伤风梭菌 ； — — —第７部分：蛋白免疫印迹法检测疯牛病病原 ； — — —第８部分：进出口化妆品中白色念珠菌检测方法 ； — — —第９部分：进出口化妆品中胆汁酸耐受革兰氏阴性菌检测方法 ； — — —第１ ０部分：金黄色葡萄球菌 　Ｐ Ｃ Ｒ法； — — —第１ １部分：金黄色葡萄球菌 　多重实时荧光 Ｐ Ｃ Ｒ法； — — —第１ ２部分：绿脓杆菌 　Ｐ Ｃ Ｒ法； — — —第１ ３部分：嗜麦芽窄食单胞菌 。本部分为 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６的第１部分。本部分按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本部分代替 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６． １ —２ ０ ０ ８《化妆品微生物检验方法 　第１部分：沙门氏菌 》 。本部分与 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６． １ —２ ０ ０ ８相比，主要技术变化如下 ： — — —更新了第一法试剂配制的引用标准 。 — — —删除了第二法涉及商品试剂盒信息 。 — — —删除了２ ０ ０ ８年版中的部分缩略语 （２ ０ ０ ８年版的９． ３、９． ５、９． ７） 。请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本部分起草单位 ：中华人民共和国广东出入境检验检疫局 、广州迪澳生物科技有限公司 。本部分主要起草人 ：凌莉、易敏英、刘静宇、王志强、胡科锋、袁慕云、陈碧玲、阳静、张旺、李志勇、石磊、张璜。 Ⅰ犛 犖／犜２ ２ ０ ６．１—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.化妆品微生物检验方法第１部分：沙门氏菌 第一法　常规培养法 １　范围 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ２ ０ ６的本部分规定了化妆品中沙门氏菌的常规检验方法 。本部分适用于化妆品中沙门氏菌的检验 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０　食品安全国家标准 　食品微生物学检验 　沙门氏菌检验Ｇ Ｂ７ ９ １ ８． １ 　化妆品微生物标准检验方法总则 ３　材料与设备 ３．１　吸管：２ｍＬ，分刻度０． １ｍＬ；１ ０ｍＬ，分刻度１ｍＬ。３．２　灭菌平皿 ：直径９ ０ｍｍ，底部平整的玻璃或一次性塑料灭菌平皿 。３．３　１ ０ ０ｍＬ 三角瓶。３．４　接种针、接种环。３．５　灭菌的样品处理器具 ：镊子、剪刀、勺子。３．６　灭菌小试管 ：３ｍｍ×５ ０ｍｍ 。３．７　可调移液器 ：１ ０μＬ～１ ０ ０μＬ，１ ０ ０μＬ～１０ ０ ０μＬ。３．８　天平：量程０ｇ～５ ０ ０ｇ，精度０． １ｇ。３．９　高压灭菌器 。３．１ ０　冰箱：０℃～４℃。３．１ １　乳液分散机 （转速１０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ以上） 。３．１ ２　恒温培养箱 ：３ ６℃±１℃ 、４ ２℃±１℃ 。３．１ ３　显微镜：１ ０×～１ ０ ０×。３．１ ４　全自动微生物生化鉴定系统 。 ４　培养基和试剂 ４．１　Ｓ Ｃ Ｄ Ｌ Ｐ 液体培养基 ：按Ｇ Ｂ７ ９ １ ８． １ 中规定。４．２　四硫酸钠煌绿 （ＴＴ Ｂ）增菌液：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中附录Ａ中Ａ． ２规定。４．３　亚硫酸铋琼脂 （Ｂ Ｓ） ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． ４规定。４．４　木糖赖氨酸脱氧胆盐 （Ｘ Ｌ Ｄ）琼脂：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． ６规定。４．５　ＨＥ琼脂：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． ５规定。 １犛 犖／犜２ ２ ０ ６．１—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.４．６　沙门氏菌属显色培养基 。４．７　三糖铁琼脂 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． ７规定。４．８　蛋白胨水 、靛基质试剂 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． ８规定。４．９　尿素琼脂 （ｐＨ ７． ２） ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． ９规定。４．１ ０　氰化钾（ＫＣＮ）培养基：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． １ ０规定。４．１ １　氨基酸脱羧酶试验培养基 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中Ａ． １ １规定。４．１ ２　糖发酵管 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． １ ２规定。４．１ ３　ＯＮ Ｐ Ｇ培养基：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． １ ３规定。４．１ ４　半固体琼脂 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． １ ４规定。４．１ ５　丙二酸钠培养基 ：按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ １ ０中Ａ． １ ５规定。４．１ ６　沙门氏菌 Ｏ和Ｈ诊断血清 。４．１ ７　生化鉴定试剂盒 。 ５　检测程序 ５．１　方法提要 化妆品中沙门氏菌的检测方法是通过前增菌 、选择性增菌 、分离、生化鉴定 、血清学分别鉴定等方法对化妆品中可能存在的沙门氏菌进行定性检测 。 ５．２　检测程序 化妆品中沙门氏菌的检测程序示意图见图 １。 图１　化妆品中沙门氏菌检验程序示意图 ２犛 犖／犜２ ２ ０ ６．１—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.６　样品制备 参照Ｇ Ｂ７ ９ １ ８． １ 进行制样 。 ７　检验步骤 ７．１　前增菌和增菌 取１∶１ ０样品稀释液 １ ０ｍＬ加到９ ０ｍＬＳ Ｃ Ｄ Ｌ Ｐ 液体培养基中 ，置培养箱 ３ ６℃±１℃ 培养１ ８ｈ～２ ４ｈ。移取１ ０ｍＬ，转种于１ ０ ０ｍＬ 四硫酸钠煌绿 （ＴＴ Ｂ）增菌液内 ，４ ２℃±１℃ 培养１ ８ｈ～２ ４ｈ。 ７．２　分离 按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中５． ３规定。 ７．３　生化反应 按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中５． ４规定的生化反应 ，也可采用生化鉴定试剂盒 。 ７．４　血清学分型鉴定 按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中５． ５规定。 ７．５　结果报告 综合生化反应和血清学鉴定结果 ，按Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ４ —２ ０ ０ ０中５． ５判定菌型 ，报告１ ０ｇ（ｍＬ）样品中检 出或未检出沙门氏菌 。第二法　环介导等温扩增 （犔 犃犕犘）法 ８　范围 本部分规定了化妆品中沙门氏菌的环介导等温扩增 （ＬＡＭＰ）检测方法 。本部分适用于化妆品中沙门氏菌的筛选检测 。本方法用于清洁类 、护理类和美容 ／修饰类化妆品的定性检测低限为 １ ０２Ｃ ＦＵ／ｇ（ｍＬ） 。 ９　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 Ｇ Ｂ７ ９ １ ８． １ 　化妆品微生物标准检验方法 　总则 Ｇ Ｂ／Ｔ２ ７ ４ ０ ３ —２ ０ ０ ８　实验室质量控制规范 　食品分子生物学检测 １ ０　缩略语 １ ０．１　Ｂ ｅ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ：甘氨酸三甲胺内盐 。 ３犛 犖／犜２ ２ ０ ６．１—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
u5[PO –0
SÑU.１ ０．２　犅 狊 狋酶：犅 狊 狋ＤＮＡｐｏ ｌｙ