以正式出版文本为准ICS67.040 CCSX04 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2231—2021 代替SN/T 2231—2008 出口食品中呋虫胺及其代谢物残留量的 测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of dinotefuran and its metabolites reduces in foods for export HPLC-MS/MS method 2021-11-22发布 2022-06-01实施 中华人民共和国海关总署发布以正式出版文本为准前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规则 起草。 本文件代替SN/T 2231—2008 《进出口食品中呋虫胺残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》, 与SN/T 2231—2008相比,主要技术变化如下: ———增加了两种呋虫胺代谢物残留量的检测; ———扩大了适用范围,检测基质由9种增加至19种; ———改进了样品的提取和净化方法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本文件起草单位:青岛海关技术中心、中国检验检疫科学研究院、山东杰诺检测服务有限公司。 本文件主要起草人:孙利、张禧庆、王建华、池连学、冷蕾,李立。 本文件所代替标准的历次版本发布情况为: ———SN/T 2231—2008。 ⅠSN/T2231—2021以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口食品中呋虫胺及其代谢物残留量的 测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本文件规定了出口食品中呋虫胺及其代谢物1-甲基-3- (四氢-3-呋喃甲基)脲和1-甲基-3- (四氢-3- 呋喃甲基)二氢胍残留量检测和确证方法。 本文件适用于小麦、大米、玉米、花生、大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝 卜、苹果、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲅鱼、牛奶中呋虫胺及其代谢物1-甲基-3- (四氢-3-呋喃甲基)脲和1-甲基- 3- (四氢-3-呋喃甲基)二氢胍残留量的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB 2763—2019 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法提要 试样用乙腈超声提取,提取液经C18 固相萃取(SPE)小柱净化,初始比例流动相定容,液相色谱-串 联质谱测定,外标法定量。 5 试剂和材料 除特殊注明外,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 乙腈:色谱纯。 5.2 正己烷:色谱纯。 5.3 甲酸:色谱纯。 5.4 针式滤器:亲水PTFE膜,0.22 μm。 5.5 0.1%甲酸乙腈溶液:取1.0 mL甲酸(5.3)至1 000 mL容量瓶中,并用乙腈(5.1)定容至刻度,充 分混匀,备用。 5.6 0.1%甲酸水溶液:取1.0 mL甲酸(5.3),至1 000 mL容量瓶中,并用水定容至刻度,充分混匀, 备用。 5.7 定容液:分别吸取0.1%甲酸乙腈溶液(5.5)和0.1%甲酸水溶液(5.6)按照体积比5:95混合均 1SN/T2231—2021以正式出版文本为准匀,备用。 5.8 C18 SPE柱:500 mg,3 mL,或相当。使用前需用3.0 mL乙腈,3.0 mL水,3.0 mL提取液活化, 保持柱体湿润。 5.9 呋虫胺标准物质(Dinotefuran,CAS登记号:165252-70-0,分子式:C7H14N4O4):纯度≥99.9 %。 5.10 1-甲基-3-(四氢-3-呋喃甲基)脲标准物质(Dinotefuran metabolite UF,CAS登记号:457614-34- 5,分子式:C7H14N2O2):纯度≥99.9 %。 5.11 1-甲基-3-(四氢-3-呋喃甲基)二氢胍标准物质(Dinotefuran metabolite DN, CAS登记号: 457614-32-3,分子式:C7H15N3O):纯度≥97.6 %。 5.12 标准储备溶液:分别精确称取适量三种标准物质(精确至0.1 mg)于50 mL容量瓶中,用乙腈配 制成200 μg/mL的标准储备液,0 ℃~4 ℃保存,可使用1 年。 5.13 标准工作溶液:根据需要用定容液(5.7)稀释配制成适当浓度的标准工作液,现用现配。 5.14 乙腈饱和的正己烷溶液:分别取适量等体积的乙腈和正己烷,混合均匀,静置分层后,上层溶液即 为乙腈饱和的正己烷溶液。 6 仪器和设备 6.1 超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS-MS):配有电喷雾离子源。 6.2 分析天平:感量分别为1 mg和 0.1 mg 。 6.3 超声波清洗器。 6.4 涡旋混合器。 6.5 固相萃取装置,含真空泵。 6.6 比色管:25 mL。 6.7 移液器:100 μL ~ 1 000μL。 6.8 聚丙烯离心管:50 mL和2.0 mL。 6.9 低速冷冻离心机:5 500 r/min,可控温4 ℃。 6.10 高速离心机:10 000 r/min。 6.11 刻度定容管:3.0 mL 或5.0 mL,精度为0.1 mL。 7 试样的制备与保存 7.1 制样要求 制样操作过程中必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7.2 样品制备 7.2.1 将小麦、大米、玉米、花生样品充分搅拌,均质,分出0.5 kg作为试样,置于清洁样品容器中,密 封,并做好标记。将制备好的试样于0 ℃ ~ 4 ℃冷藏保存。 7.2.2 将大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲅 鱼、牛奶样品,按照 GB 2763 附录A 中食品类别及测定部位进行制样处理。样品置于清洁样品容器中, 密封,并做好标记。将制备好的试样于-18 ℃冷冻保存。 2SN/T2231—2021以正式出版文本为准8 测定步骤 8.1 提取 8.1.1 小麦、大米、玉米、花生样品 称取5 g样品(精确至0.01 g)至50 mL离心管中,加8.0 mL水浸润30 min,加入10 mL乙腈 (5.1),涡旋混合2 min,超声提取15 min,于4 000 r/min离心5 min,上清液转移至25 mL比色管 (6.6)中,残留物再用10 mL乙腈(5.1),涡旋混合2 min,于4 000 r/min离心5 min,合并提取液于 25 mL比色管(6.6)中,并用乙腈(5.1)定容至刻度,混合均匀,所得提取液待净化。 8.1.2 大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果样品 称取5 g样品(精确至0.01 g)至50 mL离心管中,加入10 mL乙腈(5.1),涡旋混合2 min,超声提 取15 min,于4 000 r/min离心5 min,上清液转移至25 mL比色管(6.6)中,残留物再用10 mL乙腈 (5.1),涡旋混合2 min,于4 000 r/min离心5 min,合并提取液于25 mL比色管(6.6)中,并用乙腈 (5.1)定容至刻度,混合均匀,所得提取液待净化。 8.1.3 鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲅鱼、牛奶样品 称取5 g样品(精确至0.01 g)至50 mL离心管中,加入10 mL乙腈(5.1),迅速涡旋混合2 min,超 声提取15 min,于4 ℃下4 000 r/min离心5 min,上清液转移至25 mL比色管(6.6)中,残留物再用 10 mL乙腈(5.1),涡旋混合2 min,于4 ℃下4 000 r/min离心5 min,合并提取液于25 mL比色管 (6.6)中,并用乙腈(5.1)定容至刻度,混合均匀,所得提取液待净化。 8.2 净化 8.2.1 小麦、大米、玉米、花生、鸡肉、猪肉、马哈鱼、鲅鱼、牛奶样品 吸取7.1.1和7.1.3 提取液2.0 mL,直接过预先处理好的C18 SPE柱(5.8),直接收集。准确吸取 1.0 mL 净化液于刻度定容管(6.12)中,40 ℃水浴氮气吹至近干,用定容液(5.7)定容至1.0 mL 刻度, 混匀后转移至2.0 mL塑料离心管中,加入1.0 mL乙腈饱和正己烷溶液(5.14),涡旋震荡1 min,于 10 000 r/min离心2 min,吸取下层溶液,过针式滤器(5.4),供上机检测。 8.2.2 大葱、圆葱、大头菜、青刀豆、菠菜、紫苏叶、马铃薯、芋头、胡萝卜、苹果样品 吸取7.1.2提取液2.0 mL,直接过预先处理好的C18 SPE柱(5.8),直接收集。准确吸取1.0 mL 净化液于刻度定容管(6.12)中,40 ℃水浴氮气吹至近干,用定容液(5.7)定容至1.0 mL 刻度,混匀后 过针式滤器(5.4),供上机检测。 8.3 测定