以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2316 —2019 代替 SN/T 2316— 2009 中华人民共和国海关总署 发 布ICS 67.050 c 53 2019 -12-27发布 2020 -07-01 实施出口动物源食品中阿散酸、硝苯砷酸、 洛克沙砷残留量的检测方法 Determination of p-arsanilic acid 、4-nitrophenylarsonic acid 、3-nitro- 4-hydroxy-phenylarsonic acid residues in animal foods for export以正式出版文本为准以正式出版文本为准I SN / T 2316  —2019前 言 本标准按照 GB / T1.1— 2009 给出的规则起草。 本标准代替 SN / T 2316— 2009《动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量检测方法 液 相色谱 - 电感耦合等离子体 / 质谱法》 。 本标准与 SN / T 2316— 2009 相比，主要技术变化如下： ——标准名称修改为“出口动物源食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测方法” 。 ——增加了液相色谱 - 原子荧光光谱法（LC-AFS）为第二法。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津海关动植物与食品检测中心、中华人民共和国合肥海关、 北京海光仪器有限公司、上海新仪微波化学科技有限公司。 本标准主要起草人：肖亚兵、董志珍、高健会、韩芳、宋伟、马兴、宋旭、杨爽、逯玉凤、徐 渊。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——SN / T 2316— 2009。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN / T 2316  —2019出口动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、 洛克沙砷残留量的检测方法 1 范围 本标准规定了出口动物源性食品中阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷残留量测定的高效液相色谱 - 电感耦合等离子体 / 质谱检测方法、液相色谱 - 原子荧光光谱检测方法。 本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡肾、鸡可食用下水、猪肉、猪肝、猪肾、猪可食用下水中阿散酸、 硝苯砷酸、洛克沙砷残留量的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB / T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 第一法 液相色谱 - 电感耦合等离子体 / 质谱法 3 方法提要 试样中残留的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷用甲醇 + 水（1∶1，体积比）提取，离心后定容，过 0.45µm 滤膜，供高效液相色谱 - 电感耦合等离子体 / 质谱（HPLC-ICP / MS）测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 GB / T 6682 规定的一级水。 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 三氟乙酸：优级纯。 4.3 0.1% 三氟乙酸：准确移取 1 mL 三氟乙酸至 1000 mL 容量瓶中，定容。 4.4 滤膜：0.45 µm，直径 47 mm。 4.5 甲醇溶液：甲醇 + 水（1∶1，体积比） 。 4.6 阿散酸（CAS 号：2045-00-3，C6H8AsNO3）标准物质：纯度大于等于 99％。 4.7 硝苯砷酸（CAS 号：98-72-6，C6H6AsNO5）标准物质：纯度大于等于 95%。 4.8 洛克沙砷（CAS 号：121-19-7，C6H6AsNO6）标准物质：纯度大于等于 97.5%。 4.9 阿散酸标准储备溶液：准确称取适量的阿散酸标准物质，用去离子水配成浓度为 500 µ g / mL 的 标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。 4.10 硝苯砷酸标准储备溶液：准确称取适量的硝苯砷酸标准物质，用去离子水配成浓度为 500 µ g / mL 的标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。 4.11 洛克沙砷标准储备溶液：准确称取适量的洛克沙砷标准物质，用去离子水配成浓度为 500 µ g / mL 的标准储备液。根据需要用去离子水稀释成适当浓度的标准工作液。以正式出版文本为准2 SN / T 2316  —2019标准储备液在 0℃ ～4℃冰箱中保存，有效期为 12 个月，标准工作液在 0℃ ～4℃冰箱中保存。 有效期为 6 个月。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱 - 电感耦合等离子体 / 质谱仪。 5.2 高速均质器：15000 r / min。 5.3 离心机：3 000 r / min。 5.4 涡旋混合器。 5.5 超纯水仪。 5.6 天平：感量为 0.1 mg 和 1 mg。 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 将鸡肉、鸡肝、鸡可食用下水、猪肉、猪肝、猪肾、猪可食用下水等有代表性样品约 500 g、鸡 肾样品 100g 用绞肉机绞碎，混匀，均分成 2 份试样，分装入洁净的盛样袋内 , 密闭并标明标记。 6.2 试样保存 动物源性食品等试样于 -18℃以下冷冻保存。 7 测定步骤 7.1 提取 称取试样 1 g（精确至 0.001 g）置于微波辅助萃取内罐中，准确加入 10 mL 甲醇溶液（4.5） ，按 照微波辅助萃取仪的标准操作步骤进行提取（参见附录 A 中表 A.1） 。提取完毕，取出冷却至室温， 10 000 r / min 离心 10 min。取 4 mL 上清液，氮气吹扫，用甲醇溶液（4.5）定容至 2 mL，经 0.45 µm 有机微孔滤膜过滤后进行测定。按同一操作方法作空白试验。 7.2 测定 7.2.1 液相色谱条件 7.2.1.1 色谱柱：C18柱，粒径 5 µm，250mm×4.60 mm 或性能相当者。 7.2.1.2 流动相：甲醇 -0.1% 三氟乙酸水溶液（10∶90，体积比） 。 7.2.1.3 流速：1.0 mL / min。 7.2.1.4 进样量：20 µ L。 7.2.2 电感耦合等离子体 - 质谱工作条件和测量参数 电感耦合等离子体 - 质谱工作条件和测量参数见附录 B。 7.2.3 高效液相色谱 - 电感耦合等离子体 - 质谱测定 分别配制阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷标准使用液 0.0 ug / L，0.4 ug / L，2.0 ug / L，10.0 ug / L， 25.0 ug / L，50.0 ug / L，100.0 ug / L，测得其峰面积并求出峰面积与浓度关系的一元线性回归方程。阿 散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷标准溶液（25 ug / L）的高效液相色谱 - 电感耦合等离子体、质谱图参见以正式出版文本为准3 SN / T 2316  —2019附录 C。 7.2.4 空白试验 除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 7.2.5 结果计算和表述 按式（1）计算试样中阿散酸（或硝苯砷酸或洛克沙砷）残留量，计算结果应将空白值扣除。 Xi = （c1－c0）×V m×1 000× V2 V1 ……………………………（1） 式中： Xi——试样中被测物的残留量，单位为毫克每千克（mg / kg） ； c1——样液中被测物的浓度，单位为微克每升（ µ g / L） ； c0——空白液中被测物的浓度，单位为微克每升（ µ g / L） ； V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL） ； V1——吸取上清液体积，单位为毫升（mL） ； V2——最终定容体积，单位为毫升（mL） ； m——最终样液所代表的试样量，单位为克（g） 。 8 测定低限和回收率 8.1 测定低限 阿散酸、硝苯砷酸和洛克沙砷的测定低限均为 0.01 mg / kg。 8.2 回收率 样品添加回收率见表 D.1。 第二法 液相色谱 - 原子荧光光谱法 9 方法提要 试样中残留的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷经甲醇 + 水（1∶1，体积比）提取后，以液相色谱进 行分离，分离后的目标化合物在酸性环境下与硼氢化钾反应，生成气态砷化合物，用原子荧光光谱仪 进行测定。按保留时间定性，外标法定量。 10 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为优级纯，水为 GB / T 6682 规定的一级水。 10.1 试剂 10.1.1 甲醇：色谱纯。 10.1.2 盐酸。 10.1.3 硼氢化钾。以正式出版文本为准4 SN / T 2316  —201910.1.4 氢氧化钠。 10.1.5 磷酸二氢钾。 10.1.6 三氟乙酸。 10.1.7 过硫酸钾。 10.1.8 微孔滤膜：0.45 µm，有机系。 10.2 试剂配制 10.2.1 甲醇溶液：甲醇（10.1.1）+ 水（1∶1，体积比） 。 10.2.2 盐酸溶液（5%，体积分数） ：量取 50 mL 盐酸（10.1.2） ，溶于水并定容至 1000 mL。 10.2.3 硼氢化钾溶液（20 g / L） ：称取 5 g 氢氧化钠溶（10.1.4）于水，待氢氧化钠（10.1.4）充分溶 解后，称取 20 g硼氢化钾（10.1.3）于氢氧化钠（10.1.4）溶液中，溶于水并定容至 1000 mL。 10.2.4 三氟乙酸 （0.1%） - 磷酸二氢钾溶液 （50 mmol / L） ：称取 3.402 g磷酸二氢钾 （10.1.5） 溶于水， 待固体完全溶解后