书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜２ ５ ５ ８．９—２ ０ １ ５ 进出口功能性纺织品检验方法第９部分：抗菌性能 　阻抗法 犜 犲 狊 狋 犻 狀犵犿 犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆狅 狉 狋 犳 狌 狀 犮 狋 犻 狅 狀 犪 犾 狋 犲 狓 狋 犻 犾 犲 狊 —犘 犪 狉 狋９：犃 狀 狋 犻 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犾犪 犮 狋 犻 狏 犻 狋 狔犻 狀狋 犲 狓 狋 犻 犾 犲 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆狅 狉 狋—犐 犿狆犲 犱 犪 狀 犮 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ５０ ５２ ６发布 ２ ０ １ ６０ １０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　Ｓ Ｎ／Ｔ２ ５ ５ ８《进出口功能性纺织品检验方法 》分为９个部分： — — —第１部分：防紫外线性能 ； — — —第２部分：负离子含量 ； — — —第３部分：免烫性能 ； — — —第４部分：抗菌性能 　平板琼脂法 ； — — —第５部分：消臭率的测定 　检知管法 ； — — —第６部分：透水汽性能 ； — — —第７部分：夜光纤维发光性能 ； — — —第８部分：光触媒除甲醛性能 ； — — —第９部分：抗菌性能 　阻抗法。本部分为 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ５ ５ ８的第９部分。本部分按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本部分由国家认证认可监督管理委员会归口 。本部分起草单位 ：广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、番禺出入境检验检疫局 。本部分主要起草人 ：任忠海、李太存、潘素华、黄伯熹、苏伟霞、梁清闲、赵丹霞、兰丽丽、赵涛。 Ⅰ犛 犖／犜２ ５ ５ ８．９—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.进出口功能性纺织品检验方法第９部分：抗菌性能 　阻抗法 １　范围 Ｓ Ｎ／Ｔ２ ５ ５ ８的本部分规定了采用阻抗法测定纺织品抗菌性能的定量试验和评价方法 。本部分适用于羽绒 、纤维、纱线、织物及其制品等各类纺织产品 。本部分不涉及抗菌产品安全性的评价 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ４ ７ ８ ９． ２ 　食品安全国家标准 　食品卫生微生物学检验 　菌落总数测定 Ｇ Ｂ／Ｔ１ ２ ４ ９ ０ 　纺织品　色牢度试验 　耐家庭和商业洗涤色牢度试验方法 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３．１抗菌性能 　犪 狀 狋 犻 犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪 犾犪 犮 狋 犻 狏 犻 狋 狔纺织品所具有的能抑制织物上的细菌生长繁殖的性能 。 ３．２对照样　犮 狅 狀 狋 狉 狅 犾 犳 犪 犫 狉 犻 犮用于验证试验微生物生长条件的 、不经过任何处理的 １ ０ ０％棉织物。 注：已被证明采用色牢度试验用的棉标准贴衬织物 ，经高温蒸煮和蒸馏水洗涤后作为对照样是合适的 。 ３．３阻抗测定时间 　犻 犿狆犲 犱 犪 狀 犮 犲犱 犲 狋 犲 犮 狋 狋 犻 犿 犲 ；犇 犜由于微生物活动引起培养基中阻抗变化至能够被仪器检测记录的时间 。 ４　安全预防措施 本试验所采用的试验菌能使人感染致病 ，应采取一切必要的预防措施 ，免除对人员和环境的危害 ，试验应由经过培训的人员进行 。 ５　原理 将试样与对照样分别用试验菌液接种 。分别进行立即洗脱和培养后洗脱 ，洗脱的菌液加入阻抗检测瓶，通过微生物生长代谢将瓶内培养基中蛋白质和碳水化合物转变为氨基酸及乳酸等 ，引起培养基电阻抗微弱变化 ，可由阻抗检测仪器记录成 ＤＴ值，ＤＴ值与菌液中微生物数量和活性在一定范围内存在 １犛 犖／犜２ ５ ５ ８．９—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.相关关系 。通过建立 ＤＴ值与菌落总数之间的标准曲线及回归方程 ，利用该标准曲线和回归方程 ，并通过测定菌液的 ＤＴ值，从而得出活菌浓度 ，计算抑菌值或抑菌率 ，以此评价试样的抗菌效果 。 ６　设备和材料 ６．１　阻抗检测器 ：具有阻抗检测功能的阻抗检测仪器 。 ６．２　测量瓶：配套阻抗检测仪器使用 。 ６．３　微量移液器 ：２ ０ ０μＬ～１ｍＬ。 ６．４　分光光度计 ：检测波长 ４ ７ ５ｎ ｍ 或６ ６ ０ｎ ｍ。 ６．５　恒温振荡器 （摇床） ：温控精度为 ±１℃。 ６．６　恒温培养箱 ：温控精度为 ±１℃。 ６．７　冰箱：温度能保持在 ２℃～１ ０℃。 ６．８　高压灭菌锅 ：温度能保持 １ ２ １℃，压力能保持在 １ ０ ３ｋ Ｐ ａ 。 ６．９　玻璃小瓶 ：平底圆柱 ，容量为５ ０ｍＬ，带有瓶盖 。 ６．１ ０　旋涡式振荡器 。 ６．１ １　水浴锅：温度能保持在 ４ ５℃±２℃ 。 ６．１ ２　二级生物安全柜 。 ６．１ ３　试管、吸管、锥形瓶、平皿等实验室常用器具和设备 。 ７　培养基和试剂 试验所用试剂应是分析纯的或适合于微生物试验用的 。试验用水应是纯水 ，如蒸馏水 。 注：建议使用现有商业化的脱水原料制备培养基 ，并严格按照相关产品制造商的使用说明操作 。 ７．１　０ ０ １犅培养基 Ｂ ｉ Ｍ ｅ ｄ ｉ ａ０ ０ １Ｂ 　　　　　　　　 １ ９． ４ｇ蒸馏水 （最终定容至 ）１０ ０ ０ｍＬ灭菌后，ｐＨ值为７． ０±０． ２ 。 ７．２　营养肉汤 （犖 犅） 牛肉膏 ３． ０ｇ蛋白胨 ５． ０ｇ蒸馏水 （最终定容至 ）１０ ０ ０ｍＬ灭菌后，ｐＨ值为７． ０±０． ２ 。 ７．３　犛 犆 犇 犔 犘 液体培养基 酪蛋白胨 １ ７． ０ｇ大豆蛋白胨 ３． ０ｇ氯化钠 ５． ０ｇ磷酸氢二钾 ２． ５ｇ葡萄糖 ２． ５ｇ卵磷脂 １． ０ｇ聚山梨醇酯 ８ ０（吐温８ ０） ７． ０ｇ ２犛 犖／犜２ ５ ５ ８．９—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.蒸馏水 （最终定容至 ）１０ ０ ０ｍＬ灭菌后，ｐＨ值为７． ０±０． ２ 。 ７．４　计数培养基 （犈 犃） 脱水酵母膏 ２． ５ｇ胰酪蛋白胨 ５． ０ｇ葡萄糖 １． ０ｇ琼脂粉 １ ５． ０ｇ蒸馏水 （最终定容至 ）１０ ０ ０ｍＬ灭菌后，ｐＨ值为７． ２±０． ２ 。 ８　试验菌种 ８．１　菌种 革兰氏阳性细菌 ：金黄色葡萄球菌 犛 狋 犪狆犺狔犾 狅 犮 狅 犮 犮 狌 狊犪 狌 狉 犲 狌 狊 （ＡＴ Ｃ Ｃ６ ５ ３ ８ ） 。革兰氏阴性细菌 ：大肠埃希氏菌 犈 狊 犮 犺 犲 狉 犻 犮 犺 犻 犪犮 狅 犾 犻 （８ ０ ９ ９或ＡＴ Ｃ Ｃ１ １ ２ ２ ９ 、ＡＴ Ｃ Ｃ８ ７ ３ ９ 、ＡＴ Ｃ Ｃ２ ９ ５ ２ ２中的一种 ） ，或肺炎克雷白氏菌 犓 犾 犲 犫 狊 犻 犲 犾 犾 犪 狆狀 犲 狌犿 狅 狀 犻 犪 犲 （ＡＴ Ｃ Ｃ４ ３ ５ ２ ） ，根据需要选一种。 注１：可使用加入世界菌种保藏联合会 （ＷＦ Ｃ Ｃ）的菌种保藏机构提供的 、与上述菌种等效的试验菌 。 注２：如果需要 ，可采用其他的试验菌种 ，培养基成分 、培养温度和培养方法应根据要求调整 。 ８．２　菌种转种及保存 冻干菌激活后接种斜面试管培养 ，然后储存于冰箱 （５℃～１ ０℃） ，作为保存菌 。每一个月应转种一次，转种后放于冰箱 （５℃～１ ０℃）保存，转种次数不应超过 １ ０代。若转种后保存时间超过一个月 ，不能用于下一次转种 。 ８．３　标识 对每个菌种应标注如下信息 ： ａ）　供应冻干菌的菌种保藏机构名称 ； ｂ）　冻干菌的名称和编号 ； ｃ）　冻干菌的批号 ； ｄ）　冻干菌激活日期 ； ｅ）　保存菌的储藏日期 ； ｆ）　保存菌的实验室编号 。 ９　试验菌液的准备 ９．１　培养犃 用接种环取保存菌 （８． ２） ，以划线法接种 ＥＡ（７． ４）平皿上，３ ７℃±１℃ 下培养２ ４ｈ～±２ｈ。 注：该平皿在 ５℃～１ ０℃条件下保存 ，在１周内使用 。 ９．２　培养犅 取营养肉汤 ＮＢ（７． ２）２ ０ｍＬ放入１ ０ ０ｍＬ 的锥形瓶内 ，用接种环取培养物 Ａ（９． １）的典型菌落接种 ３犛 犖／犜２ ５ ５ ８．９—２ ０ １ ５ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.在肉汤内置于恒温振荡器 （摇床）中培养，培养条件为温度 ３ ７ ℃±１ ℃ ，振动频率 １ １ ０ｍ ｉ ｎ－１，时间 １ ８ｈ～２ ４ｈ。最后用ＮＢ（７． ２）调节菌液浓度为 １×１ ０８Ｃ ＦＵ／ｍＬ～３×１ ０８Ｃ ＦＵ／ｍＬ。 ９．３　培养犆 取营养肉汤 ＮＢ（７． ２）２ ０ｍＬ放入１ ０ ０ｍＬ 的锥形瓶内 ，从培养Ｂ（９． ２）取０． ４ｍＬ 菌液加入肉汤内置于恒温振荡器 （摇床）中培养，培养后的菌液浓度约为 １ ０７Ｃ ＦＵ／ｍＬ。培养条件为 ：温度３ ７℃±１℃ ，振动频率１ １ ０ｍ ｉ ｎ－１，时间３ｈ＋１ｈ 。 ９．４　试验菌液的制备 用蒸馏水对营养肉汤 ＮＢ（７． ２）进行２ ０倍稀释，调节培养 Ｃ（９． ３）的菌液浓度为 １×１ ０５Ｃ ＦＵ／ｍＬ～３×１ ０５Ｃ ＦＵ／ｍＬ，作为试验菌液 。采用分光光度计或适当的方法测定菌液浓度 。 注：该试验菌液冰冷 （３℃～４℃）保存，在４ｈ内使用，