ICS 65.020.20 CCS B 05 22 吉林省 地方标准 DB22/T 3525—2023 高淀粉马铃薯杂交育种技术规程 Technical code of practice for hybrid breeding of high starch potato 2023-09-28 发布 2023-11-16 实施 吉林省市场监督管理厅 发布 DB22/T 3525 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 吉林省农业农村厅 提出并归口。 本文件起草单位：吉林省农业科学院。 本文件主要起草人：宋景荣、孙凯、霍云龙、吴胜男、 李雪、王忠伟、 王永志、张春雨、李小宇、 李茂海。 DB22/T 3525 —2023 2 高淀粉马铃薯杂交育种技术规程 1 范围 本文件确定了高淀粉马铃薯 杂交育种的程序， 规定了育种设施选择 、亲本的准备、田间管理、 杂交 授粉、实生果收获与清洗、实生种子保存、无性系生产、 品种比较试验及区域试验、品种登记等 阶段的 操作指示 ，描述了记录及档案 追溯方法。 本文件适用于设施内高淀粉马铃薯杂交育种 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 18133 马铃薯脱毒种薯标准 GB/T 19557.28 植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南 马铃薯 NY/T 1303 农作物种质资源鉴定技术规程 马铃薯 NY/T 1489 农作物品种试验技术规程 马铃薯 NY/T 2383 —2013 马铃薯主要病虫害防治技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 高淀粉马铃薯 high starch potato 块茎淀粉含量 不低于 17% 的马铃薯品种。 4 育种流程 高淀粉马铃薯杂交育种 流程包括 12 个阶段，具体程序流程如图 1 所示。 DB22/T 3525 —2023 3 图1 育种流程图 5 育种设施 选择 杂交育种设施为日光温室 或塑料大棚，并应具有遮荫、防虫、喷雾等设备。 6 亲本的准备 6.1 种质资源引进与鉴定 引进国外或国内的高淀粉优质种质 资源并建立种质资源库。 种质资源鉴定 应符合 NY/T 1303 的规 定。 6.2 杂交亲本 配制 根据高淀粉育种目标选择 高配合力、淀粉含量高的亲本配制 杂交组合； 选则适应当地条 件、亲缘关 系较远、具有双亲突出的优良性状并遗传力强 、优缺点互补的亲本组合 ，父母本 至少有一个高淀粉品种 (品系)。 6.3 亲本的播种 田间管理 （见第 7 章） 品种比较试验与区试试验（见 第 12 章） 无性系生产 （见第 11 章） 实生种子保存 （见第 10 章） 实生果收获与清洗 （见第 9 章） 杂交授粉 （见第 8 章） 育种设施选择 （见第 5 章） 品种登记（见第 13 章） 亲本的准备（见第 6 章） DB22/T 3525 —2023 4 6.3.1 栽培基质 采用马铃薯专用基质 。 6.3.2 父母本种薯处理 6.3.2.1 选择质量符合 GB/T 18133 的脱毒马铃薯种薯 原种。 6.3.2.2 种薯切块过程中，用 75% 酒精或 0.5% 高锰酸钾溶液浸泡切刀 5 min～7 min 进行消毒， 用 11% 咯菌氰.精甲霜灵 .嘧菌酯悬浮种剂， 每亩 70 ml 拌种或 25% 甲霜灵悬浮种衣剂 1:667～1:800（药 种比）拌种。 6.4 播种时间与方式 盆栽，一般选用规格为 35 cm×21 cm×20 cm（上直径×下直径×高 ）的容器栽培 。3 月中旬催芽， 4 月初播种。 采用人工播种方式每个容器播种 1 块种薯， 行株距为 1 m×1 m 埋入地下且上口与地面 持平。 7 田间管理 7.1 水肥管理 现蕾初期 采用滴灌方式追施 马铃薯专用水溶肥 3 kg/667 m2～5 kg/667 m2，现蕾期 至开花期叶面喷 施 0.2%～0.3% 磷酸二氢钾 1 次～3 次。 7.2 温湿度调控 马铃薯杂交期间 ，通过喷灌和上遮阳网等方式来调控 棚室内温、湿度。人工授粉时， 棚室内温度控 制为 16 ℃～23 ℃， 湿度控制为 70%～90%。 7.3 病虫草害防治 使用 60 目以上的防虫网 进行防治， 按照 NY/T 2383 －2013 中 4.1、4.2 和 4.3 的要求进行 防治。 8 杂交授粉 8.1 花粉采集与保存 8.1.1 在授粉前一天，采集父本当日开放的新鲜花朵，把花药取下放于硫酸纸上，置于温度不能高于 25 ℃ 通风良好的室内， 4 h～24 h 后即可采集花粉。 8.1.2 收集花粉 放置在 1.5 ml 离心管内， 瓶上标记父本名称和采集时间， 用于杂交授粉或保存备用。 8.1.3 在 2 ℃～5 ℃ 条件下，新采集花粉可保存 6 d～7 d，置于氯化钙干燥剂的容器中可保存 30 d； 需长期保存的花粉需先将花药干燥，于 -20 ℃ 条件下保存。 8.2 花粉活力测定 取出花药中的花粉放在载玻片上用品红试剂进行染色， 静置 1 min～2 min 后在低倍显微镜下观察。 根据花粉活力测定为杂交选择父本提供依据。 8.3 去雄 DB22/T 3525 —2023 5 选择健壮母本植株上发育良好的花序进行“整花”，每个花序只留 5 朵 ～7 朵，将含苞待放的小 花进行去雄， 去雄时， 用镊子小 心地将雄蕊去掉， 不 应碰伤花柱和柱头， 凡是母本属于雄性不育的类型， 则不去雄。 8.4 授粉 8.4.1 当柱头为浅绿色、有光泽、用手指触有黏性时，说明雌蕊成熟，可进行有性杂交。 8.4.2 杂交授粉选择早上 4：00～9：00，或下午 18：00～21：00 进行，用棉签将 采集的父本雄蕊花 粉人工涂到成熟的母本雌蕊柱头上，尽量使柱头周围均粘上花粉。 8.4.3 授粉结束后及时挂牌到花柄上，牌子上注明杂交组合亲本名称，应 母本在前父本在后，并标明 杂交的时间。 8.5 套袋 授粉一周后即可检查杂交结实的情况，当果实直径在 1.0 cm 以上时即可套袋， 将标牌一起放入网 袋内，将袋系于茎杆上，网袋规格以 15 cm×20 cm 为宜。 9 实生果收获与清洗 当母本植株茎叶枯黄或者实生果变软时即可收获，按照组合分类收获， 进行后熟， 将变软的实生果 放入容器中搓碎，去除果肉 、果皮和种子上的黏液， 并倒出种子晾干。将晾干的实生籽装入纸袋中，并 注明杂交组合名称和日期。 10 实生种子保存 在室温条件下，实生种子可保存 4 年～5 年，在 -20 ℃ 条件下，可保存 6 年～10 年。 11 无性系生产 11.1 种子催芽 将杂交种子按组合放在培养皿中，用温水浸泡 30 min 后，倒掉水后放在带有滤纸培养皿中上，保 持种子湿润，置于 25 ℃ 种子发芽箱催芽至露白。 11.2 实生种子 播种 用无菌土与露白的种子轻轻拌在一起，均匀撒在育苗盘中，播完后插上组合编号。苗龄在 5 片～6 片真叶时移栽入 10 cm×10 cm 塑料营养钵内，每钵 1 株苗，浇定根水，放于日光温室或大棚内统一 管理。 11.3 收获 当块茎成熟后， 按照杂交组合， 每个基因型收获 1 个健康、无破损的块茎形成一套无性系。 11.4 杂交后代筛选 11.4.1 无性一代选择 DB22/T 3525 —2023 6 将无性系播种于育种圃，株距 30 cm～40 cm，根据农艺性状进行选择， 去除具有二次生长、匍匐 茎长、龟裂和腐烂病害的薯块，收获时每个基因型的块茎放在一起。 11.4.2 无性二代选择 将不少于 4 个块茎的无性二代种植在同一垄上， 根据高淀粉目标性状设对照，收获时块茎 进行淀 粉、产量、熟性、抗性、品质等性状的鉴定 及选择。 11.4.3 无性三代和高世代选择 将每个无性三 代种植在相邻的垄上，根据高淀粉性状设对照，生长中期对田间性状进行评价，收获 时对淀粉、产量、抗性等性状 再次进行块茎选择。 12 品种比较试验 及区域试验 进行 2 年的品比试验， 将高世代 材料的脱毒种薯 提交到国家区域试验， 试验按照 NY/T 1489 的方 法执行。 13 品种登记 马铃薯品种登记 按照《非 主要农作物品种登记指南 》进行登记 。DUS 测试按照 GB/T 19557.28 的 方法进行。 14 记录与档案 对整个育种过程进行及时记录、存档，档案 长期保存