(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211284828.5 (22)申请日 2022.10.17 (71)申请人 山东省食品药品检验研究院 地址 250101 山东省济南市高新区新 泺大 街2749号 (72)发明人 林林　刘广桢　刘琦　张雷　 谭乐俊　 (74)专利代理 机构 北京元本知识产权代理事务 所(普通合伙) 11308 专利代理师 徐苹 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的 检测方法 (57)摘要 本发明属于药品检测技术领域， 尤其涉及一 种同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方 法。 所述的检测方法包括以下步骤： 制备供试品 溶液、 对照药材溶液和对照品溶液； 采用UPLC ‑Q‑ Orbitrap， 按照确定的色谱和质谱条件注入仪 器， 进行检测； 按照保留时间和精确质量数进行 鉴别。 本发 明所述的检测方法可以同时进行人参 健脾丸中人参、 陈皮、 木香、 黄芪、 当归、 远志、 白 术和酸枣仁八种原料药的检测， 简单、 易操作， 准 确度高， 分析时间短， 重现性好， 可用于人参健脾 丸的质量控制。 权利要求书2页 说明书6页 附图12页 CN 115541768 A 2022.12.30 CN 115541768 A 1.一种同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 利用UPLC ‑Q‑ Orbitrap高效液相色谱质谱 联用仪同时鉴别人参健脾丸中人参、 陈皮、 木香、 黄芪、 当归、 远 志、 白术和酸枣 仁八种原料 药。 2.根据权利要求1所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 包括以下步骤： (1)制备供试品溶液、 对照药 材溶液和对照品溶 液； (2)采用UPLC ‑Q‑Orbitrap， 按照确定的色谱和质谱条件注入仪器， 进行检测； (3)按照保留时间和精确质量数进行鉴别。 3.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述供试品溶液的具体制备方法为： 取人参健脾丸适量， 剪碎， 取约3g， 精密称 定， 加入80％甲醇25ml， 加热回流 提取30分钟， 放冷， 摇匀， 滤 过， 取续滤 液， 即得。 4.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述对照药材溶液的具体制备方法为： 取人参、 陈皮、 木香、 黄芪、 当归、 远志、 白 术和酸枣仁对照药材适量， 分别加80％甲醇25ml， 加热回流30分钟， 放冷， 摇匀， 滤过， 取续 滤液， 即得。 5.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述对照品溶液的具体制备方法为： 取人参皂苷Rg1、 人参皂苷Rb1、 苍术酮、 橙皮 苷、 木香烃内酯、 去 氢木香内酯、 黄芪甲苷、 毛蕊异黄酮葡萄糖苷、 阿魏酸、 藁本内酯、 酸枣仁 皂苷A、 酸枣仁皂苷B、 远志 酮Ⅲ和细叶远志皂苷对照品， 分别加80％甲醇制成10 μg/ml的 对照品溶 液， 即得。 6.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述色谱条件为： 以乙腈为流动相A， 以体积分数比0.05％甲酸溶液为流动相B， 采用梯度洗脱方式： 0 →12min， 乙腈11％ →35％； 12→20min， 乙腈35％ →65％； 20→30min， 乙腈65％→85％， 流速： 0.5ml/mi n。 7.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述质谱条件为： FullMS(m/z  90‑1350)， 电喷雾离子模式(ESI+、 ESI‑)， 分辨率 70000。 8.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述色谱柱为： Waters  Atlantis T3 C18， 4.6×150mm， 3 μm； 柱温： 40℃。 9.根据权利要求2所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在于， 步骤(3)中所述具体的鉴别操作为： 在保留时间14.07min和16.18min处分别出现精确质量数为845.4904([M+COOH]‑)和 1153.6011([M+COOH]‑)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有人参， 如果在对应保留时间 内缺失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有人参； 在保留时间21.54min处出现精确质量数为217.1587([M+H]+)色谱峰， 则待测人参健脾 丸样品中含有白术， 如果在对应保留时间内缺失该色谱 峰， 则待测人参健脾丸样品中不含 有白术； 在保留时间13.54min处出现精确质量数为611.1970([M+H]+)色谱峰， 则待测人参健脾 丸样品中含有陈皮， 如果在对应保留时间内缺失该色谱 峰， 则待测人参健脾丸样品中不含权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115541768 A 2有陈皮； 在保留时间22.42min和24.61min处分别出现精确质量数为233.1536([M+H]+)和 231.1379([M+H]+)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有木香， 如果在对应保留时间内缺 失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有木香； 在保留时间17.17min和12.23min处分别出现精确质量数为785.4681([M+H]+)和 447.1286([M+H]+)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有黄芪， 如果在对应保留时间内缺 失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有黄芪； 在保留时间12.94min和22.23min处分别出现精确质量数为193.0506([M ‑H]‑)和 191.1066([M+H]+)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有当归， 如果在对应保留时间内缺 失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有当归； 在保留时间16.80min和17.51min处分别出现精确质量数为1251.6015([M+COOH]‑)和 1089.5487([M+COOH]‑)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有酸枣仁， 如果在对应保留时 间内缺失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有酸枣 仁； 在保留时间11.77min和16.99min处分别出现精确质量数为569.1501([M+H]+)和 679.3699([M ‑H]‑)色谱峰， 则待测人参健脾丸样品中含有远志， 如果在对应保留时间内缺 失两个色谱峰中的任一色谱峰， 则待测人参 健脾丸样品中不含有远志。 10.根据权利要求9所述的同时鉴别人参健脾丸中八种原料药的检测方法， 其特征在 于， 所述保留时间误差在 ±5％以内， 质量数偏差在 ±5ppm以内。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115541768 A 3