(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210961137.8 (22)申请日 2022.08.11 (71)申请人 山东省分析测试中心 地址 250014 山东省济南市历下区科院路 19号 (72)发明人 王晓　于金倩　赵恒强　闫慧娇　 (74)专利代理 机构 济南圣达知识产权代理有限 公司 372 21 专利代理师 李筝 (51)Int.Cl. C07D 263/26(2006.01) A61K 31/422(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 3/10(2006.01)A61P 9/00(2006.01) A61P 13/12(2006.01) A61P 37/00(2006.01) A61P 17/16(2006.01) A61P 39/00(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A23L 33/105(2016.01) A61K 8/49(2006.01) A61Q 19/00(2006.01) (54)发明名称 一种N-N-双-恶唑烷酮生物碱类化合物、 制 备方法及 在医药领域的应用 (57)摘要 本发明涉及一种N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类 化合物、 制备方法及在医药领域的应用。 本发明 提供了从忍冬叶中分离 纯化的两种新的N ‑N‑双‑ 恶唑烷酮生物碱同分异构体及其制备方法； 所述 化合物结构如下式1 或式2所示： 经验证， 上述化 合物1和2对AAPH所致肝癌细胞氧化损伤具有显 著保护作用， 并且化合物1和2均可不同程度抑制 APAP对HepG2细胞的损伤， 有望应用于医药途径 的开发。 权利要求书2页 说明书7页 附图7页 CN 115160251 A 2022.10.11 CN 115160251 A 1.一种N‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物， 其特征在于， 所述化合物具有如下式1或式2 所示的结构： 2.如权利 要求1所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物， 其特征在于， 所述N ‑N‑双‑恶唑 烷酮生物碱类化合物， 还包括式1或式2所示化合物药学上可接受的盐、 酯、 溶剂化物、 代谢 产物或前 药。 3.权利要求1或2所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物的制备方法， 其特征在于， 以忍 冬叶乙醇提取物为原料分离得到， 所述分离包括如下步骤： (1)采用大孔树脂对忍冬叶乙醇提取物进行梯度洗脱， 洗脱液依次为水、 35～45％乙 醇、 55～65％乙醇、 75～85％乙醇和9 2～98％乙醇， 获取 水洗脱部分， 加入硅胶拌样； (2)制备硅胶柱色谱， 所述柱色谱中硅胶采用二氯甲烷混匀后装柱； 将上述步骤(1)中 拌样后的硅胶加入柱色谱， 并采用二氯甲烷 ‑甲醇进行梯度洗脱， 所述洗脱液中二氯甲烷、 甲醇两试剂的洗脱梯度依次为13～17:1、 8～12:1、 4～6:1、 0.8～1.2:1； 合并上述各部分洗 脱液并浓 缩依次得到Fr.1～Fr.4四个部分； (3)将上述Fr.1部分加入甲醇溶液溶解， 通过MCI中压制备色谱进行分离， 以甲醇 ‑水体 系进行梯度洗脱， 上述洗脱液中甲醇的浓度 依次为4～6％、 13～17％、 23～27％、 33～37％、 96～100％； 收集上述洗脱液通过HPLC进行检查将相似馏分进行合并， 得到Fr.1 ‑1～Fr.1‑ 10共十个组分， 取组分Fr.1 ‑1通过半制备色谱进行分离纯化， 流动相为乙腈 ‑0.0.08～ 0.12％甲酸水， 得到化 合物1和化 合物2。 4.权利要求3所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物的制备方法， 其特征在于， 步骤(1) 中， 所述忍冬叶乙醇提取物的制备方法如下： 向粉碎后的忍冬叶中加入30～50％乙醇溶液 进行加热回流， 固液比为 1： 2.5～3.5， 将回流提取的醇溶液合并过滤并浓缩至无醇味， 得到 上述忍冬叶提取物； 优选的， 上述制备方法中， 回流的加热温度为95～ 105℃； 所述回流提取的次数为三次， 每次回流时间为1.8～ 2.2h； 或， 步骤(1)中， 所述大孔树脂采用弱极性吸附型大孔树脂； 进一步的， 为苯乙烯型弱极 性共聚体， 具体的实例如AB ‑8大孔树脂； 或， 步骤(2)中， 所述水洗脱部分与硅胶以质量比1： 0.8～1.2进行拌样。 5.权利要求3所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物的制备方法， 其特征在于， 步骤(2) 中， 所述洗脱液中二氯甲烷及甲醇的体积比为15:1、 10:1、 5:1、 1:1， 或为16:1、 11:1、 6:1、 1.2:1， 或14:1、 9:1、 4:1、 0.8 :1。 6.权利要求3所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物的制备方法， 其特征在于， 步骤(3) 所述洗脱液中， 甲醇的溶度依次为5％、 15％、 25％、 35％、 100％， 或为4％、 13％、 23％、 33％、 96％， 或为6％、 16％、 26％、 3 6％、 100％；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115160251 A 2或， 乙腈与甲酸水 溶液的体积比为8～12： 8 8～92， 进一步的， 为10： 90 。 7.一种药物 组合物， 其特征在于， 所述组合物中， 包括活性剂量的权利要求1或2所述N ‑ N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化 合物。 8.如权利要求7所述药物组合物， 其特征在于， 所述药物 组合物的施用方式包括但不限 于用于药物制剂、 营养品或护肤品的制备； 所述药物制剂、 营养品或护肤品的其中一个功效 在于预防、 改善或治疗过氧化途径相关的疾病， 或， 所述功效在于预防、 改善、 修复或治疗肝 损伤及肝损伤相关疾病； 优选的， 所述药物组合物中还包括药学上可接受的载体， 包括但不限于赋形剂、 润滑 剂、 粘合剂、 崩解剂、 溶剂、 增溶剂、 悬浮剂、 等渗剂、 缓冲剂、 舒 缓剂、 防腐 剂、 抗氧化剂、 着色 剂、 甜味剂或其 他添加剂。 9.权利要求1或2所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、 第三方面所述药物组合物在 医药领域的应用。 10.权利要求9所述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、 药物 组合物在医药领域的应用， 其特征在于， 其应用方式包括至少包括以下几种： (1)将上述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、 药物组合物应用于制备药物制剂、 营养 品、 食品或护肤品； (2)将活性剂量的上述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、 药物组合物施用于有需求的 个体以实现预防、 改善疾病症状或治疗疾病的作用， 所述疾病为过氧化相关疾病或肝部疾 病； 所述施用手段为剂量可精确调控的给 药方式， 包括手术、 口服、 注射或介入； (3)将上述N ‑N‑双‑恶唑烷酮生物碱类化合物、 药物组合物应用于疾病模型的制备， 如 过氧化抑制模型或肝损伤抑制模型。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115160251 A 3