(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210906366.X (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 淮阴工学院 地址 223400 江苏省淮安市 涟水县海安路 10号安东大厦8楼 (72)发明人 柳森　沈灿　姜东升　钱苏梦　 杨婷　叶玮　潘长江　魏言春　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 柏尚春 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 47/42(2017.01) A61K 47/34(2017.01) A61K 31/704(2006.01)A61K 31/337(2006.01) A61K 31/4745(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种具有尺寸调控的纳米载体及其制备方 法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种具有尺寸调控的纳米载 体及其制备方法和应用， 该纳米载体是使用聚己 内酯‑聚乙二醇 ‑氨基(PCL ‑PEG‑NH2)， 水包油乳 化法(O/W)制备小尺寸纳米粒子(SNPs)； 再使用 两端羧基( ‑COOH)化的金属基质蛋白酶响应 (MMP)的肽段将SNPs 交联得到的大尺寸纳米粒子 (LNPs)。 本发明制备的纳米载体具备尺寸调控功 能， 实现在体内长循环时大尺寸、 肿瘤内小尺寸， 解决纳米药物在肿瘤中富集与渗透对纳米药物 尺寸的矛盾要求， 从而促进肿瘤的穿透， 大幅提 升癌症治 疗的效率。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 115227673 A 2022.10.25 CN 115227673 A 1.一种具有尺寸调控的纳米载体， 其特征在于， 所述纳米载体为LNPs， 结构似 “集束炸 弹”， 所述纳米载体LNPs是通过两端羧基化的肽段与SNPs纳 米颗粒的 ‑NH2反应交联得到， 所 述SNPs纳米颗粒 是由PCL‑PEG‑NH2采用水包油的方法合成。 2.根据权利要求1所述的具有尺寸调控的纳米载体， 其特征在于， 所述纳米载体LNPs含 有肿瘤过表达的金属基质蛋白酶响应的肽段， 利用此设计来进行尺寸调控。 3.根据权利要求2所述的具有尺寸调控的纳米载体， 其特征在于， 所述两端羧基化的肽 段的氨基酸残基序列为HOOC ‑Pro‑Leu‑Gly‑Val‑Arg‑Gly‑COOH， 其中， Pro： 脯氨酸； Leu： 亮 氨酸； Gly： 甘 氨酸； Val： 缬氨酸； A rg： 精氨酸。 4.根据权利要求1所述的具有尺寸调控的纳米载体， 其特征在于， 所述SNPs纳米颗粒的 直径5～15nm， 纳米载体L NPs的直径为80～15 0nm。 5.一种权利要求1 ‑4任一项所述的具有尺寸调控的纳米载体的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： (1)将PCL ‑PEG‑NH2溶于DCM中得到DCM溶液， 取吐温80加入去离子水中得到水溶液， 将 DCM溶液逐滴加入水 溶液中， 超声搅拌乳化反应， 真空抽去DC M， 过滤， 离心， 得到SNPs； (2)将两端羧基化的肽段加入制得的SNPs溶液中， 加入EDC和sulfo ‑NHS催化搅拌反应， 得到LNPs。 6.根据权利要求5所述的具有尺寸调控的纳米载体的制备方法， 其特征在于， 步骤(1) 中， 所述PCL ‑PEG‑NH2与DCM的摩尔比为1： 0.8～1.2， 所述吐温80的质量分数为2％～8％， 所 述DCM与吐温80的体积比为 1:0.2～5， 所述超声搅拌乳化反应过程需在冰浴条件 下完成， 乳 化时间为2 ～20min， 离心的过程中洗涤1～5次。 7.根据权利要求5所述的具有尺寸调控的纳米载体的制备方法， 其特征在于， 步骤(2) 中， PCL‑PEG‑NH2与两端羧基化的肽段的质量比为1： 0.8～2， 两端羧基化的肽段、 EDC与 sulfo‑NHS的摩尔比为1:0.5～4： 0.5～4， 反应温度为室温， 催化搅拌的时间为6～48h 。 8.权利要求1 ‑4任一项所述具有尺寸调控的纳米载体在制备治疗肿瘤药物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述纳米载体包覆阿霉素、 紫杉醇或喜树 碱中的任一种化疗药物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115227673 A 2一种具有尺寸调控的纳米载体及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及 一种具有尺寸调控的纳 米载体及其制备方法和应用， 属于生物医用高 分子聚合物材 料技术领域。 背景技术 [0002]有研究表明， 纳米载体进入血液循环后， 为了使纳米载体能够高效地在肿瘤内富 集， 纳米粒子的尺寸被限制在100～200nm之间， 尺寸太小会因血管渗漏或肾代谢而快速排 出体外， 尺寸过大则会被体内的生物屏障滞 留。 然而小尺寸纳米载体在肿瘤内具有良好的 组织穿透性是当下 的一种共识， 小尺寸纳米载体能够有效地穿透到肿瘤组织深处， 并取得 理想治疗效果。 这种纳米药物尺寸上 的矛盾性严重限制 了普通纳米载体的治疗效率， 因此 探索智能纳米载体在确保纳米药物能够实现在肿瘤内富集的前提下， 提高其向肿瘤其向肿 瘤深处的递释效率， 是纳米药物提高化疗治疗效果所必具的属性。 [0003]因此， 通过对纳米材料的设计， 使其在注射到体内时维持较大尺寸(100～200nm)， 进入肿瘤后变为较小尺寸(＜50nm)， 可以有效解决纳米材料在肿瘤内富集与渗透的难题。 这一尺寸策略在无机纳米材料中得到了验证， 通过肿瘤响应的肽段将粒径在5nm左右的 W18O49纳米粒子 交联成粒径约50nm的大球， 从而实现了体内长循环时为大尺寸球， 到达肿瘤 后解体为小尺寸球， 提升了纳米材料在肿瘤内的富集与渗透。 然而， 如何实现有机纳米材料 在肿瘤内大小尺寸 转换， 是目前尚未解决的一个难题。 发明内容 [0004]发明目的： 本发明的目的在于提供一种具有尺寸调控的纳米载体， 该有机纳米载 体能在肿瘤内进 行大小尺寸转换， 解决纳米递释系统在血液循环和肿瘤穿透过程中的尺寸 矛盾问题； 本发明的第二 目的在于提供构一种 具有尺寸调控的纳米载体的制备方法， 本发 明的第三目的在于提供 该具有尺寸调控的纳米载体在制备治疗肿瘤药物中的应用。 [0005]技术方案： 本 发明所述一种具有尺寸调控的纳米载体， 所述纳 米载体为LNPs， 结构 似“集束炸弹 ”， 所述纳米载体LNPs是通过两端羧基化的肽段与SNPs纳米颗粒的 ‑NH2反应交 联得到， 所述SNPs纳米颗粒是 由聚己内酯 ‑聚乙二醇 ‑氨基(PCL ‑PEG‑NH2)采用水包油的方 法合成。 [0006]其中， 所述纳米载体LNPs含有肿瘤过表达的金属基质蛋白酶响应的肽段， 利用此 设计来进行尺寸调控。 [0007]其中， 所述两端羧基化的肽段的氨基酸残基序列为HOOC ‑Pro‑Leu‑Gly‑Val‑Arg‑ Gly‑COOH， 其中， Pro： 脯氨酸； Leu： 亮氨酸； Gly： 甘 氨酸； Val： 缬氨酸； A rg： 精氨酸。 [0008]其中， 所述SNPs纳米颗粒的直径为5～15nm， 纳米载体L NPs的直径为80～15 0nm。 [0009]本发明所述的具有尺寸调控的纳米载体的制备 方法， 包括以下步骤： [0010](1)将PCL ‑PEG‑NH2溶于二氯 甲烷(DCM)中得到DCM溶液， 取吐温80加入去离子水中 得到水溶液， 将DCM溶液逐滴加入水溶液中， 超声搅拌乳化反应， 真空抽 去DCM， 过滤， 离心，说　明　书 1/4 页 3 CN 115227673 A 3