ICS 65.020.30 CCS B 44 15 内蒙古自治区 地方 标准 DB15/T 3757—2024 围产期母羊酮病的诊断规程 The code of practice on diagnosis ketosis for perinatal ewes 2024-12-18发布 2025-01-18实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发布 DB15/T 3757 —2024 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（ SAM/TC 19 ）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、鄂尔多斯市农畜产品质量安全中心。 本文件主要起草人：孙海洲、金鹿、杨斌、李胜利、张春华、张崇志、萨初拉、陈攀亮、付乐、王 博、刘威、杨鼎、李文婷、诺民、赵亚星、宝华、孙余卓。 DB15/T 3757 —2024 1 围产期母羊酮病的诊断 规程 1 范围 本文件规定了围产期母羊酮病的诊断规程的临床表现和检测方法。 本文件适用于围产期母羊（包括绵羊和山羊）酮病的诊断。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 围产期 perinatal period 母羊产前 30 d到产后20 d这段时间。 酮病 ketosis 酮血病、醋酮血病、妊娠病等，是由于蛋白质、脂肪和糖代谢发生紊乱，在血液、乳、尿及组织内 酮的化合物蓄积而引起的一种代谢病。 4 临床表现 多生于高产母羊及妊娠羊。 多发病于妊娠母羊的 产前30 d到产后20 d。 发病初期食欲减退，呆立不动，空嚼，口流泡沫状唾液，驱赶强迫其运动时，步态摇晃。 发病后期意识紊乱，不听召唤，视力消散。 神经症状常表现为头部肌肉痉挛，并可出现耳、唇震颤，由于颈部肌肉痉挛，故头后仰或偏向一 侧，亦可见到转圈运动。 病程中表现为食欲减退， 瘤胃蠕动减弱，黏膜苍白或黄疸，体温正常或低于正常，呼出气及尿中 有丙酮气味。 若全身痉挛则突然倒地死亡。 5 检测方法 血液检测方法 —酶比色法。 DB15/T 3757 —2024 2 检测装置：分光光度计。 血样采集部位：颈静脉。 血样采集时间：早晨饲喂前。 血样处理方法：采集血液样本， 4 ℃静置30 min，3000 rpm 离心15 min后收集血清。 测定指标：β -羟丁酸。 检测方法 5.7.1 检测原理 在β-羟丁酸脱氢酶的催化下 ,β-羟丁酸被氧化生成乙酰乙酸，同时氧化型辅酶 I（NAD）被还原为 还原型辅酶 I（NADH），NADH在340 nm处有最大吸收峰，其吸光度的变化与样品β -羟丁酸的含量呈正 相关。 5.7.2 检测步骤 5.7.2.1 按照表1所示方式进行试剂混合。 表1 试剂加样表 空白管 标准管 测定管 去离子水 40 μL - - 标准品 - 40 μL - 血清 - - 40 μL β-羟丁酸脱氢酶 960 μL 960 μL 960 μL 显色剂 240 μL 240 μL 240 μL 5.7.2.2 混合均匀后， 37 ℃孵育5 min，将分光光度计调至 340 nm，去离子水调零，测定各管的吸光 度OD值。 5.7.2.3 按照公式（ 1）计算样品中β -羟丁酸的浓度： Y =（A2-A1）/（A3-A1）× B ………………………………………（ 1） 式中： Y——待测样品的β -羟丁酸浓度，单位为 mmol/L； A1——测定管的吸光度 OD值； A2——空白管的吸光度 OD值； A3——标准管的吸光度 OD值； B——标准品的β -羟丁酸浓度，单位为 mmol/L。 判定标准 根据母羊临床症状可作出初步诊断，经实验室诊断予以确诊见表 2。 DB15/T 3757 —2024 3 表2 围产期母羊酮病判定标准 结果判定 血酮含量 健康 ＜0.8 mmol/L 亚临床型酮病 0.8 mmol/L ～1.5 mmol/L 临床型酮病 ≥1.6 mmol/L