ICS 13.020.40 CCS B 60 34 安徽省地方标准 DB34/T 5227 —2025 陆生野生脊椎动物种质资源样本采集规范 Specification for the collection of germplas m resources sample of terrestrial wild vertebrates 2025 - 05 - 06 发布 2025 - 06 - 06 实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 5227 —2025 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黄山学院提出。 本文件由安徽省林业局归口。 本文件起草单位： 黄山学院、 安徽省林业局野生动植物保护处、 安徽省野生动物疫源疫病监测总站、 安徽扬子鳄国家级自然保护区管理局。 本文件主要起草人：吕顺清、吴月龙、刘嵩、于超、邴晓慧、王德青、李伟、姜贺、周永康。 DB34/T 5227 —2025 1 陆生野生脊椎动物种质资源样本采集规范 1 范围 本文件规定了陆生野生脊椎动物种质资源样本采集的目标与原则、采集对象、采集许可、采集前准 备、采集、采集后处置、样本运输保存。 本文件适用于陆生野生脊椎动物（两栖类、爬行类、鸟类、哺乳类）种质资源样本的采集。 其它类群野生动物种质资源样本采集可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 2359 陆生野生动物疫源疫病监测技术规范 《中华人民共和国野生动物保护法》（2022年12月30日） 《中华人民共和国生物安全法》（2020年10月17日） 《中华人民共和国自然保护区条例》（2017年10月7日） 《陆生野生动物疫源疫病监测防控管理办法》（国家林业局令 2013第31号） 《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》（农业部公告 第503号） 《国家重点保护野生动物名录》（2021年1月4日） 《有重要生态、科学、社会价值的陆生野生动物名录》（2023年6月26日） 《安徽省重点保护野生动物名录》（2023年2月22日） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 陆生野生脊椎动物 terrestrial wild vert ebrate 本文件指除了鱼类和无脊椎动物以外的其他野生动物，包括两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类。 种质资源样本 germplasm re sources s ample 可现场直接采集、 包含有个体全部或部分遗传信息的生物材料， 包括但不限于生物体的细胞、 组织、 器官、整体，无需经过实验室复杂程序提取或培养即可长期保存，用于动物学研究，或用于未来种质遗传资源的繁育和利用。 DNA 提取样本 sample for DNA e xtraction 保存质量能够满足全基因组（包括线粒体基因组）提取的样本。 RNA 提取样本 sample for RNA e xtraction DB34/T 5227 —2025 2 保存质量能够满足 RNA提取的样本。 细胞培养样本 sample for cell culture 保存质量能够满足细胞培养的样本。 标本 specimen 样本采集的动物体，包括但不限于活体动物、死亡动物全部或部分尸体、博物馆或机构保存的野生 动物标本等。 非损伤动物样本采集法 Non-invasive Animal Sa mpling 在采集动物样本的过程中，不对动物造成伤害或应激，不影响其自然行为和生存状态的方法。 微损伤动物样本采集法 Mini-invasive Animal S ampling 在采集动物样本的过程中， 对动物造成微小伤害或应激、 不足以影响其自然行为和生存状态的方法。 4 目标与原则 目标 规范陆生野生脊椎动物种质资源样本采集，为动物种质遗传资源的保存、研究、保护和利用提供技 术规范。 原则 4.2.1 合法性原则 样本采集须符合生物安全管理规范，取得主管部门许可。到自然保护区采集或采集《国家重点保护 野生动物名录》、《有重要生态、科学、社会价值的陆生野生动物名录》、《安徽省重点保护野生动物名录》中的物种，按照《中华人民共和国野生动物保护法》、《中华人民共和国自然保护区条例》的规定执行。 4.2.2 科学性原则 样本采集须由专业人员或经过专业培训的人员承担，按照技术规范操作。 4.2.3 安全性原则 样本采集过程中须注重环境、人员、动物及标本等的安全控制。采集和运输有传染性或人畜共患病 风险的样本，按照《中华人民共和国生物安全法》、 《陆生野生动物疫源疫病监测防控管理办法》、 《高 致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》及 LY/T 2359 的规定执行。 4.2.4 动物福利原则 尽量减少动物及样本的采集量；活体动物应优先使用非损伤或微损伤采集方式；采集方式应减少动 物的惊吓、精神压力或痛苦；处死动物尽可能减轻动物的痛苦。 5 采集对象 DB34/T 5227 —2025 3 陆生野生脊椎动物类别 陆生野生脊椎动物包括如下四类： a) 两栖类； b) 爬行类； c) 鸟类； d) 哺乳类。 种质资源样本类别 种质资源样本包括如下四类： a) 动物体（活体、尸体、标本等）； b) 器官（睾丸、卵巢、心脏等）； c) 组织（皮肤、肌肉、血液等）； d) 细胞（生殖细胞、胚胎干细胞等）。 6 采集许可 样本采集须取得政府主管部门许可或按照相关法律法规执行。 7 采集前准备 仪器设备 主要包括但不限于：交通运输工具（车辆）、车载超低温冰箱（-80℃）、车载普通冰箱（-20℃）、 显微镜、液氮罐等（见附录A）。 器材器具 主要包括但不限于：解剖刀、手术剪、镊子、冻存管、冻存盒、防护服、工作服、口罩、乳胶手套、 脱脂棉、纱布、急救箱、计量工具、记录工具等（见附录B）。 器材器具须清洗、消毒，分类整齐摆放于专用工具箱中。 药品试剂 主要包括但不限于：RNA保存液、RNase 抑制剂、细胞培养液、精液稀释液、乙醇、去离子水、麻 醉剂等（见附录C）。 药品试剂须封装于专用容器中，分类摆放于试剂箱（柜）中。 8 采集 信息采集 8.1.1 活体或死亡标本信息 活体或死亡标本信息包括但不限于以下内容： a) 标本号（自行命名，但需确保编码原则统一性、编码唯一性）； DB34/T 5227 —2025 4 b) 分类学信息：中文名、学名、种下名称（即亚种名，若有则须添加）、种上名称 （纲、目、 科，中文名和学名）、鉴定人等； c) 采集地信息： 地名（至少描述到村级行政单元） 、地理坐标（经纬度， 采用大地 2000 坐标系） 、 海拔（黄海高程）、生境类型、气候因子（温度、湿度）等； d) 标本信息：采集人（标本具体采集人或团队等）、采集时间（日期格式保持一致）、采集方式 （直接抓捕、网捕、灯诱、陷阱等）、个体信息（性别、年龄或发育阶段、健康状况等）、保藏单位（保藏单位全称）等。 信息记录见附录D。 8.1.2 馆藏标本信息 标本号、标本属性（正模、配模、副模、地模、普通等）、鉴定人、制作人、制作日期、保藏方式 （浸泡、干制、冰冻等）、实物状态（完整、破损等。非完整标本可简单描述破损部位）、保藏单位、联系人（包括单位、地址、邮编、电话、电子信箱等）。 8.1.3 图像信息 8.1.3.1 图像信息采集总则 图像信息采集分门别类进行； 同一地点或同一次采集的所有图像保存于同一个存储设备 （移动硬盘、 U盘），移交给保藏单位，同时做好备份。 8.1.3.2 生境图像信息 活体或野外死亡标本需要拍摄生境图像，要求尽可能体现采集地地貌、植被、水源等多项信息。每 个采集地拍摄照片不少于 4 张（前、后、左、右），分辨率 1500 万像素（4896×3264）以上，保存格式为“jpg”或“tif”格式；拍摄视频不少于 15 秒，拍摄内容不少于照片部分，分辨率不小于 4K（3840×2160），保持格式为“mov”。 所有生境图像自行命名，但需确保统一性、唯一性，保存于同一个文件夹内。 8.1.3.3 工作图像信息 工作图像信息要求体现工作场景、工作方式等。每个采集地拍摄照片 3-4 张，照片精度要求在 1000 万（2775×3700）像素值以上，保存格式为“jpg”或“tif”格式；拍摄视频不少于 15 秒，拍摄内容不少于照片部分，分辨率不小于 4K（3840×2160），保持格式为“mov”。 所有工作图像自行命名，但需确保统一性、唯一性，保存于同一个文件夹内。 8.1.3.4 标本图像信息 所有被采集样本的个体（活体、尸体、标本）均须拍摄形态图像，要求尽可能体现个体全貌及主要 鉴别特征。摆拍最好在原产地进行，尽可能还原其生境，并做好防逃逸措施；拍照前在适当位置放置一个刻度尺作为个体大小参考。 每个个体拍摄 1-3 张全身入镜照片 （至少 1 张含有个体标签或信息卡）