ICS 65.020.01 CCS B 16 46 海 南 省 地 方 标 准 DB 46/T 700—2025 芒小果普瘿蚊检疫鉴定规范 Specification for detection and identification of Procontarinia fructiculi 2025 - 06 - 29 发布 2025 - 09 - 01 实施 海南省市场监督管理局 发 布 DB 46/T 700—2025 I 目 次 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 方法原理 ........................................................................... 1 5 器材和试剂 ......................................................................... 1 5.1 器材 ........................................................................... 1 5.2 试剂 ........................................................................... 1 6 鉴定特征 ........................................................................... 2 6.1 普瘿蚊属形态特征 ............................................................... 2 6.2 芒小果普瘿蚊形态特征 ........................................................... 2 6.3 与近似种的鉴别 ................................................................. 3 7 现场检疫 ........................................................................... 3 8 室内检测 ........................................................................... 3 8.1 镜检 ........................................................................... 3 8.2 分子检测 ....................................................................... 3 9 结果判定 ........................................................................... 3 10 标本保存 .......................................................................... 4 11 档案管理 .......................................................................... 4 附录 A（资料性） 芒小果普瘿蚊生物学特性 ............................................... 4 附录 B（资料性） 芒小果普瘿蚊成虫形态特征图 ........................................... 6 附录 C（资料性） 芒小果普瘿蚊及其近似种鉴别 ........................................... 7 附录 D（规范性） 芒小果普瘿蚊的分子检测 ............................................... 8 参考文献 .............................................................................. 9 DB 46/T 700—2025 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由海南省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。 本文件主要起草人：韩冬银、王建赟、叶政培、李磊、符悦冠、张方平、赵菁、邱海燕。 DB 46/T 700—2025 1 芒小果普瘿蚊检疫鉴定规范 1 范围 本文件规定了植物检疫中芒小果普瘿蚊的检疫鉴定方法，包括方法原理、器材和试剂、鉴定特征、 现场检疫、室内检测、结果判定等要求，描述了标本保存及档案管理等证实方法。 本文件适用于芒小果普瘿蚊的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 芒小果普瘿蚊 mango fruit-feeding gall midge 学名：Procontarinia fructiculi Jiao, Wang, Bu & Kolesik，隶属于双翅目 Diptera、瘿蚊科 Cecidomyiidae、普瘿蚊属 Procontarinia 的为害芒果的一种害虫。 注：芒小果普瘿蚊生物学特性见附录 A。 4 方法原理 以芒小果普瘿蚊形态特征为主要鉴定依据，COI基因的序列特征为辅助鉴定依据。芒小果普瘿蚊在 GenBank系统的序列号为MG637425、MG637426。 5 器材和试剂 5.1 器材 PCR仪，电泳仪，紫外分光光度计，凝胶成像系统，冰箱，低温冰箱，制冰机，水浴锅，离心机， 电子天平，微量加样器，体视显微镜，相机，放大镜，小毛笔，镊子，剪刀，白瓷盘，解剖针，指形管， 标签等。 5.2 试剂 TE缓冲液，Tris-盐酸，EDTA，氯化钠，蛋白酶K，氯仿，异戊醇，无水乙醇，75%乙醇，Taq聚合酶， 琼脂糖，DNA提取试剂盒，PCR反应试剂盒等。 DB 46/T 700—2025 2 6 鉴定特征 6.1 普瘿蚊属形态特征 普瘿蚊属成虫形态特征见表1。 表 1 普瘿蚊属成虫形态特征 6.2 芒小果普瘿蚊形态特征 芒小果普瘿蚊成虫形态特征见表 2，成虫特征实物图见图 B.1,雄成虫各部位特征示意图见图 B.2。 表 2 芒小果普瘿蚊成虫形态特征 部位 雄成虫 雌成虫 眼 头顶复眼桥长6～7个小眼直径。单眼突微隆起 具单眼突，微隆起 下颚须 下颚须4节，向端部逐节渐长 触角 具12节，第1节与第2节融合；梗节亚球形，略 微比柄节长；鞭节为双亚节，每个亚节具一圈 环毛；第3鞭节中部的无毛区约为基亚节长度 的0.6～0.7倍，颈部长约为端亚节长的1.0～ 1.1倍；基亚节的环毛伸至端亚节中部，端亚 节环毛伸达颈部末端 鞭节柱状， 第3节中部略缢缩， 颈部约为小节长的1/3； 环毛紧贴表面，由2条水平方向和2条垂直方向的环带 交联而成 翅 膜质，被稀疏细鳞片，R 1脉和C脉在翅前缘的近中部融合；R 5脉和C脉交会于翅端部，Rs脉细缩呈R 5脉 上的一个隆起，Cu脉叉状 足 足密被细鳞和稀疏短毛；前跗节齿状；爪间突与前跗节近等长；爪垫几不可见 背板 第1至第6节矩形，表面散布鳞片，各节后缘具 单排长毛，侧缘及中部散布短毛，前缘具成对 毛状感器；第6～8背板逐渐收窄 背板第1节至第7节与雄性相近，但毛及鳞片略多；第 8节背板未骨化，后缘稀疏散布一排短毛 腹板 第2至第7节矩形，具不规则长毛，侧缘及中部 短毛较背板密，前缘具一对紧邻的毛状感器 腹板第2节至第7节与雄性相近，但毛及鳞片略多； 第8节腹板未骨化，后缘稀疏散布一排短毛 部位 雄成虫 雌成虫 触角 具12个鞭小节，第１和第２鞭小节融合 触角鞭小节呈双结状，端结和基结形状大小接 近，其上分别具一圈发达的大环状环丝，其颈部 相对较长 触角鞭小节