ICS 65. 020. 20 CCS B21 DB53 云南省地 方 标准 DB53/T 1364—2025 草果无性苗繁育技术规程 2025-05－ 09 发布 2025-08-09实施 云南省市场监督管理局 发布 DB53/T 1364—2025 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由云南省农业科学院提出。 本文件由云南省农业标准化技术委员会（YNTCO7）归口。 本文件起草单位：云南省农业科学院药用植物研究所、中国热带作物科学院热带作物品种资源所、 怒江昂可达生物科技开发有限公司、云南植虫药生物科技有限公司、贡山县农业农村局农业综合发展服 务中心、福贡县农业农村局、贡山县独龙江乡农业综合服务中心、福贡县石月亮乡农业综合服务中心、 福贡县马吉乡农业综合服务中心、楚雄技师学院。 本文件主要起草人：张金渝、杨美权、许宗亮、起明菊、曾祥飞、杨天梅、杨维泽、左应梅、王丽、 石瑶、于福来、陈秀花、张春华、叶春、余四友、李新华、郭乔仪、余向清、李后江。 I DB53/T1364—2025 草果无性苗繁育技术规程 1范围 本文件规定了草果（Amomum tsaoko Crevost et Lemaire）无性繁殖的组培繁育、分株繁育、包装、 运输和储存、标识与档案管理。 本文件适用于草果组培及分株繁育。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 ，术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 无性苗 asexual seedling 通过无性繁殖方式培育出来的幼苗。 3. 2 分株苗 split seedling 将丛生植株从母株上分割下来进行独立新植株培育的苗。 4 组培繁育 4.1厂房、工作室、设备、试剂 4.1.1厂房 宜采用10cm规格的双面彩钢(彩钢板1mm厚)发泡塑料夹心板构筑的轻型材料的平房或砖混多层结 构用房。 4.1.2工作室 具有洗涤室、培养瓶晾干室、试剂室(称量室),培养基配制室、高压灭菌室、培养基储存室、更衣 室、接种室、培养室、出苗室和贮物室等。 4.1.3设备 具备灭菌设备、培养设备、实验设备、办公设备和消防设施等。 4.1.4 试剂 无机盐类,有机物类、植物生长调节剂、消毒剂等化学品。 4. 2 培养基配制 1 DB53/T 1364—2025 4.2.1要求 以MS培养基为基本培养基，添加琼脂4.5 g/L～5.0 g/L，蔗糖25 g/L～30 g/L，调节pH 值为5.8～ 6.0。激素的具体用量和比例应根据不同培养基类型、品种特性及其在培养中的表现加以适当调整和优 化。 4.2.2初代培养基 MS+6-BA （2.00 mg/L～4. 00 mg/L） +NAA （0. 05 mg/L～0.2 mg/L） 。 4.2.3增殖培养基 MS+6-BA （6.00 mg/L～8.00 mg/L）+NAA（0.01 mg/L～0.03 mg/L）。 4.2.4生根培养基 1/2MS+IAA (0. 5 mg/L～1. 0 mg/ mg 4.3灭菌 分装并密封好的培养基放入121℃下高压灭菌20 min, 自然冷却至压力表指针降至0时，开锅取出 备用。 地 4.4外植体处理 方 4.4.1采集和清洗 4.4.1.1选取生长健壮、无病虫害的草果植株，以1年生植株幼嫩茎段为外植体。 4.4.1.2将采集好的外植体置于常流水下冲淋1h 后，用 0.1%中性或弱碱性洗涤液10 min，再用细小 流水冲淋1 h～2 h。 准 4.4.2 消毒 4.4.2.1外植体置于已消毒的超净工作台士, 用无菌的吸水纸吸去水分 4.4.2.2用 75%酒精消毒 20 s, 无菌水刷洗2次 再用 8%过氧化氢摇动消毒 8min，无菌水冲 洗4次～5次。 4. 4. 2. 3最后用 0. 1%升汞+2 滴～3 滴吐温试剂摇动消毒 10 min, 再用无菌水冲洗5次～7次，于操作 工作台上备用。 4.5废弃液处理 使用过的氯化汞溶液应按照国家有关剧毒化学药品使用的法规进行回收处理。 4.6培养方法 4.6.1培养环境 培养温度为25℃±2℃，在光照强度为20001x～30001x，光照时长为10h/d下光暗交替培养。 4.6.2初代培养 将茎段切去两端伤口，留下带腋芽的茎段，按生长极性接种于初代诱导培养基上，培养时间为60 d～ 80d，培养基达不到营养条件时应进行转接。 2 DB53/T 1364—2025 4. 6.3 继代培养 将丛生芽切成具1芽～2芽的小团块,按生长极性接种于继代增殖培养基中,培养时间为35 d～45d。 4.6.4生根培养 切去基部多余团块，并将丛生芽切成单芽，按生长极性接种于生根培养基中，培养时间为25d30 d。 4.7注意事项 接种完毕立即盖好瓶盖并做好标记，注明材料名称、接种日期、接种人等事项。 4.8出瓶苗要求 苗高5cm以上，叶片肥厚鲜绿 即可出瓶炼苗。 4.9炼苗 4.9.1基质 按3:1的比例将过筛（孔径） )的生红土和腐殖土混匀配成基质,移栽前1d整理好苗床并浇透水备用。 地 4.9.2出瓶 4. 9. 2. 1 出瓶前 7 d～14 d, 将培养瓶移至具遮阴率达60%～8 -80%的温室中接受散射阳光的照射。 4.9.2.2出瓶时，用清水将附在根系」 的培养基清洗干净 4.9.2.3然后放进稀释 800 倍～1 000 倍的多菌灵或百菌清溶液中1min ～2 min,再从药液中捞出来, 晾干表面水分 4.9.3苗床准备 按3:1的比例将过筛（孔径）的生红 宽1.2m～1.5 m，移栽前1 d整理 好苗床并浇透水备用。 4.9.4定植 T 按株行距5cm×10cm定植在整理好的苗床上稍压实。 4.9.5驯化苗管理 4.9.5.1定植后立即喷施一遍800 倍～1000 倍的多菌灵或百菌清等水溶液消毒。 4.9.5.2搭建小拱棚保持 80%土壤湿度 30 d～40 d。 4.9.5.3定植20d～25d后视苗情状况喷施叶面肥，待小苗新叶展开后按常规管理。 4.9.6 病虫害防控 4.9.6.1苗期主要病害为疫病、叶瘟病和叶斑病。 4.9.6.2在温度≥30℃揭膜通风，用枯草芽孢杆菌、咪鲜胺等药剂防控。 4.9.6.3虫害主要为，零星发生时可用撒生石灰、草木灰防治，或用四聚乙醛等药剂防控。 4.10出圃 4.10.1出圃前一个月停止施肥，减少浇水次数。若幼苗长势过旺，则在出圃前一个月内逐步减少遮阳